Диссертация (1139719), страница 38
Текст из файла (страница 38)
Все анализируемыеобразцы в высоких разведениях проявляют АОА, отвары плодов, консервированные различными способами, обладают выраженными антитоксическими свойствами во всех изучаемых разведениях.191ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ 41.На основании проведенных исследований на двух моделях ЛРС (жирномасличного и нежир-номасличного), предложен методологический подход к формированию проектов ФС по показателям безопасности применения на ЛРС, масла-экстрагенты и МЭ, который может быть примененне только для исследованных, но и других подобных объектов.
Разработанный подход примененпри разработке проектов ФС «Облепихи крушиновидной свежие плоды», «Облепихи крушиновидной плоды», а также «Облепиховое масло» и дополнений и изменений к ОФС «Экстракты»и «Тяжелые металлы» для ГФ РФ XIII изд., принятые ФГБУ «НЦЭСМП» к рассмотрению вустановленном порядке.2. Результаты определения элементного состава ЛРС современными физико-химическими методами (ААС, КЭ, масс-спектрометрия) свидетельствует о необходимости контроля за содержанием в сырье не только токсичных тяжелых металлов, но и других, в том числе эссенциальных микроэлементов.
Особенно это актуально для видов ЛРС, заготавливаемых от дикорастущих растений, произрастающих на различных, в том числе и экологически неблагоприятныхтерриториях.3. Данные первичной оценки фармакологической активности водных извлечений, открываютновые возможности применения давно известных растений и подтверждают целесообразность иперспективность их использования в свежем, высушенном и замороженном виде для полученияновых ЛФ, нетрадиционных для данного вида ЛРС (отвары плодов облепихи крушиновидной).4.
Разработаны новые методики определения гидрофильных (АК, ОК, ДВ) и липофильных(ЖРВ) БАВ, которые могут быть использованы для стандартизации и оценки качества ЛРС различных видов:- методики разделения и идентификации свободных АК методом ТСХ с применением различных приемов элюирования. Предложен подход к определению состава АК в водных извлечениях из ЛРС, основанный на бесстандартной идентификации путем расчета величины Rs.
Установлено, что набор АК индивидуален не только для каждого вида ЛРС, но и зависит от способаего консервации.- методика спектрофотометрического количественного определения ДВ (танина и кислоты галловой) при совместном присутствии в ЛРС с применением расчетного метода Фиррордта.- методика определения и разделения ЖРВ (β-каротина, D2 и Е) методом ТСХ при совместномприсутствии в извлечениях из ЛРС.5. Хроматографический профиль различных групп БАВ (ОК, АК и ЖРВ) извлечений из ЛРСможно использовать для оценки его подлинности и доброкачественности.1926. Исследован полный состав АК и ОК изучаемого ЛРС с применением современного физикохимического метода КЭ.7.
Установлена целесообразность использования плодов облепихи в свежем, высушенном и замороженном виде не только для получения облепихового масла, но и других лекарственныхформ, содержащих гидрофильную фракцию БАВ.193ГЛАВА 5. ИССЛЕДОВАНИЯ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ КОМПЛЕКСА БАВ И ВЫБОРУОПТИМАЛЬНЫХ УСЛОВИЙ ХРАНЕНИЯ ПЛОДОВОБЛЕПИХИ КРУШИНОВИДНОЙОблепиха крушиновидная (Hippophae rhamnoides), семейства Лоховые (Eleagnaceae) перспективный источник БАВ, традиционным сырьем которого являются плоды. ГФ X, XI, XIIи XIII изданий не содержат статей на данный вид сырья. Свежие плоды облепихи крушиновидной включены в государственные реестры ЛС 2004 и 2008 гг [154].Химический состав плодов облепихи очень богат различными группами БАВ, в том числе гидрофильной природы, и жирным маслом [112-115,191,276,378]. Поэтому исследования повыбору способа консервации плодов, позволяющего максимально сохранить комплекс БАВ,для увеличения возможностей их использования являются весьма актуальными.5.1.
Исследование микродиагностических признаков высушенных плодов облепихикрушиновиднойВыявление микродиагностических признаков плодов облепихи крушиновидной различных способов консервации необходимо для создания современной НД, а также для оценки подлинности и доброкачественности ЛРС. Такой раздел, как «микроскопия» отсутствует в существующей НД на данный вид ЛРС [15].Ранее учеными ПМГМУ им. И.М. Сеченова [243] подробно изучены и описаны основные микродиагностические признаки свежих плодов облепихи крушиновидной. Информации омикроскопических признаках высушенного ЛРС в литературе не приводится. Данные по влиянию способа консервации плодов на их вариабильность также пока отсутствуют.С целью определения изменчивости диагностически значимых признаков плодов привысушивании исследованы анатомические признаки высушенного ЛРС. Микрофотографииприведены в Приложении 1 (рис.
1-10 в проектах ФС). Следует отметить, что микроскопирование высушенного измельченного ЛРС без дополнительной обработки значительно затрудняетсяиз-за большого количества жирного масла (Приложение 1, рис. 1-10), доля которого в плодахзначительно увеличивается при высушивании. Для проведения более точного анализа, были исследовали возможные способы удаления РМ из ЛРС, такие как предварительное выдерживаниеплодов в 96% этаноле, в гексане с последующим просветлением хлоралгидратом, а также ихразличные сочетания [123].
Оптимальным признано применение гексана с последующей обра-194боткой ЛРС раствором хлоралгидрата, максимально освобождающее ЛРС от жирного масла.Микрофотографии представлены на рис. в Приложении 1.Пробоподготовка. В течение суток высушенные измельченные плоды облепихи выдерживали в емкости с гексаном, а далее просветляли раствором хлоралгидрата и микроскопировали на увеличительном микроскопе «Биомед-6» (Россия), как описано в Главе 2 (п.
2.10).Подробное описание основных микродиагностических признаков приведено в разработанных проектах ФС (Приложение 1). Данные по вариабельности микродиагностических признаков свежих и высушенных плодов облепихи приведены в таблице 122.Таблица 122Микродиагностические признаки свежих и высушенных плодов облепихи крушиновидной[123]№Данные литературы для свежихЭкспериментальные данныеп/пплодов [243]Высушенные плодыСвежие плоды123Диаметр щитковидных волосков, мкм250-566215,60-411,60Диаметр ножек (место прикрепления волосков), мкм33-9228-92Клетки эпидермиса гипантия, мкмДлина (23-58)Длина (20-54)Ширина (3-46)Ширина (5-40)245,0-431,2028-92Длина (20-54)Ширина (5-40)Анатомическая структура, как показывают данные таблицы 122, и количественные показатели микродиагностических признаков плодов различных способов консервации, а такжеизученных ранее свежих плодов подвидов облепихи крушиновидной [243] (Южный, Подмосковный и Прибайкальский) практически одинаковы.5.2.
Изучение состава БАВ извлечений из свежих и высушенных плодов облепихикрушиновидной методом спектрофотометрииДля изучения спектральных характеристик вытяжки получали путем нагревания ЛРС срастворителем на кипящей водяной бане с обратным холодильником в соотношении 1:50 в течение 60 минут. Для исследования влияния состава экстрагента на состав БАВ в получаемомизвлечения использовали растворители в широком диапазоне полярности и величин рН (таблица 123). Полученные извлечения представляет собой сложную смесь БАВ, а также сопутствующих им веществ, извлекаемых из сырья в ходе экстракции [292].Электронные спектры поглощения измеряли на спектрофотометре СФ-2000 (Россия) вкварцевых кюветах с толщиной поглощающего слоя 10 мм в диапазоне длин волн 200-700 нм.Вид спектров представлен в Приложении 2 (рис.
1-6).195В результате обнаружены характеристические полосы поглощения исследуемого ЛРС вразличных растворителях, обусловленные присутствием в них разнообразных групп БАВ: 210230 и 320-360 нм – соединения фенольной группы (флавоноиды); 240-280 нм – ДВ; 310 – 325 нмГКК; максимумы 440-490 нм характерны для каротиноидов и ЖК; полосы в диапазоне 520-540нм обусловлены АЦ (таблица 123).Данные таблицы 123 свидетельствуют о том, что полярность экстрагента оказывает существенное влияние на качественный состав различных групп БАВ в извлечении из плодов.Причем, наблюдаются сходные результаты вне зависимости от способа консервации. Неполярные, как и сильнополярные растворители (гексан, вода очищенная, разведенная кислота хлористоводородная, 0,25% раствор аммиака) мало способствуют выделению различных групп БАВ спреимущественной экстракцией ДВ.
Растворители средней полярности в диапазоне 4,0 – 5,4способствуют извлечению как гидрофильных групп БАВ (ДВ, флавоноиды, ГКК, ОК, АК), таки липофильных БАВ (каротиноиды, токоферолы, ЖК и др.). Применение в качестве экстрагентаразведенной соляной кислоты способствует образованию в плодах и выделению веществ антоциановой природы [294,296].Таблица 123Спектральные данные извлечений из плодов облепихи крушиновидной в различных растворителях [292]Величина λ (max)№ЭкстрагентРп/пСвежие плодыВысушенные плоды1ацетон340; 450326; 4475,40270% этанол2162306,34396% этанол213; 245; 256; 450216; 246; 257; 4455,20440% этанол2182237,485гексан213; 257211; 28406хлороформ238; 459237; 284; 4554,407вода210214; 2849,0разведенная кислота8224; 270; 520214; 280хлороводородная90,25 % раствор аммиака210220; 284Р - полярность растворителя Л.
Снайдеру.Таким образом, проведенное исследование спектральных характеристик извлечений изплодов облепихи крушиновидной позволило выявить характеристические полосы поглощения,обусловленные присутствием не только традиционных для данного сырья БАВ липофильнойприроды, но и подтвердило богатое содержание гидрофильной фракции. Полученные результаты обосновали необходимость дальнейших исследований по разработке методик определениявсех групп БАВ данного вида ЛРС.1965.3.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
