Диссертация (1139716), страница 42
Текст из файла (страница 42)
3.2).Изучение зависимости «доза-эффект» ацилгидразона 2.220 показало, чтосоединение в дозах 15,0 мг/кг и 30,0 мг/кг оказывает мягко выраженное гипотензивное действие, максимум его наблюдался через 6 ч после введения, САДснижалось соответственно на 10,8% и 16,9% и через 24 ч оставалось ниже исходных значений на 7,1% (доза 15,0 мг/кг) и 6,8% (доза 30,0 мг/кг). Повышение дозы соединения 2.220 до 60,0 мг/кг к увеличению гипотензивного действия не приводило и к 8 ч эксперимента показатель САД был снижен на 8,3%от исходных значений, через сутки наблюдения снижение составляло 6,3%(табл.
3.2). При этом соединения 2.43 и 2.220 при пероральном пути введенияпрактически не оказывают влияния на ЧСС.Таким образом, впервые синтезированный – 6-метил-3-(1-оксотиетан-3ил)пиримидин-2,4(1H,3H)-дион (2.43) при внутривенном введении в дозе 7,1мг/кг снижает САД на 15% по сравнению с исходным уровнем. При пероральном введении соединение 2.43 наиболее существенно снижает САД в дозе 14,2мг/кг, по выраженности эффекта не уступает нормодипину и сопоставимо сдиротоном и небилетом, но превосходит их по продолжительности действия.Nʹ-[1-(4-Бромфенил)этилиден]-2-[6-метил-2,4-диоксо-3-(тиетан-3-ил)-1,2,3,4тетрагидропиримидин-1-ил]ацетогидразид (2.220) при внутривенном введении303Таблица 3.1Сравнительное влияние тиетансодержащих производных пиримидин-2,4(1Н,3Н)-диона и эталонных препаратов на САДкрыс при пероральном введенииСоединение,доза, мг/кгКонтроль, -Время с начала эксперимента, чИсходное127,7±3,6125,9±1,2124,9±4,3-1128,6±2,10,7121,1±2,9-3,8#120,4±3,7-3,62127,0±3,2-0,5#116,6±7,0-7,4#117,8±3,2-5,73130,2±3,72,0#112,3±6,5-10,8#115,9±5,4-7,24128,4±2,30,6#113,7±5,5-9,7#114,1±5,4-8,65129,2±1,41,2#113,5±9,7-9,8#114,6±3,4-8,36127,9±2,00,2#111,0±11,3-11,8#112,7±4,9-9,88128,6±1,90,7110,8±4,0-12,0111,0±5,5-11,124128,8±1,60,9&▲108,9±3,6-13,5&111,9±3,7-10,4M±S*%M±S2.43; 14,2%M±S2.45; 15,4%##M±S 126,1±4,7 123,4±3,02.49; 20,0123,8±1,7 119,1±3,1 118,6±3,4 115,9±3,4 112,9±4,2 113,9±4,0 121,4±3,3%-2,1-1,9-5,6-6,0-8,1-10,5-9,7-3,7M±S 127,3±1,2130,0±1,7127,3±3,2127,3±4,1122,0±3,2126,1±6,0125,0±9,8118,5±6,4125,7±2,82.194; 20,0%2,10,00,0-4,2-1,0-1,8-6,9-1,3M±S 127,2±0,2130,3±4,2123,8±3,1126,2±11,5 126,8±8,2 116,2±12,0 121,3±13,2 131,0±3,1129,3±2,42.197; 24,0%2,5-2,6-0,8-0,3-8,7-4,63,01,7#&#&###&#M±S2.220; 30,0119,8±0,2116,3±3,8112,0±3,8 109,2±1,2106,3±9,0128,0±3,8 125,5±2,1111,5±2,1119,3±16,0%-2,0-6,4-9,1-12,5-14,7-16,9-12,9-6,8#####Нормодипин; M±S 125,0±1,2124,8±3,0118,9±2,2115,1±4,7112,1±5,7111,4±5,1125,7±1,5109,2±5,9120,8±2,71,0%0,5-0,2-4,9-7,9-10,3-10,8-12,6-3,4#####M±S 129,2±0,7Диротон;118,9±1,8115,4±2,2113,3±0,9107,4±3,9106,2±2,8124,0±6,0106,1±3,1120,9±0,710,0%-4,0-8,0-10,7-12,3-16,9-17,8-17,9-6,4######M±S 128,2±2,4 119,1±4,8Небилет;118,0±2,6 115,3±3,5 112,7±1,2 106,7±3,1 105,0±2,5 103,7±2,7 118,9±8,12,0%-7,1-8,0-10,1-12,1-16,8-18,1-19,2-7,3Примечание: * - М – среднее значение, S-стандартное отклонение, % - изменение САД в процентах к исходному;#- данные достоверны относительно группы контроля (р<0,05); & - данные достоверны относительно группы животных, получавших препарат сравнения – нормодипин (р<0,05); ▲ - данные достоверны относительно группы животных, получавших препарат сравнения – диротон(р<0,05).304Таблица 3.2Зависимость «доза-эффект» по влиянию соединений 2.43 и 2.220 на САД крыс при пероральном введенииДоза, мг/кгКонтроль, -Исходное123,4±1,4-1ч123,6±2,20,12ч123,9±1,50,43ч123,6±1,50,14ч123,3±2,3-0,15ч123,7±1,80,26ч123,9±1,00,48ч125,0±0,61,324 ч124,9±1,31,2M±S*%Соединение 2.43M±S 126,7±1,0126,7±2,3125,3±2,8121,1±3,5120,9±6,2120,2±0,8121,9±0,5121,4±1,5121,9±2,47,1 мг/кг%0,0-1,1-4,4-4,6-5,1-3,8-4,1-3,8#####M±S 125,9±1,2121,1±2,9110,8±4,0108,9±3,6116,6±7,0112,3±6,5113,7±5,5113,5±9,7111,0±11,314,2 мг/кг%-3,8-7,4-10,8-9,7-9,8-11,8-12,0-13,5M±S 127,3±2,5124,7±0,3122,0±1,7120,1±0,7118,6±1,8116,9±2,4115,3±3,4113,9±6,0116,8±3,928,4 мг/кг%-2,1-4,2-5,7-6,9-8,2-9,4-10,6-8,3Соединение 2.220M±S 125,4±1,3122,4±1,8119,0±4,5114,4±7,5114,0±2,8114,3±3,6111,9±6,7112,9±4,2116,6±6,915,0 мг/кг%-2,4-5,1-8,8-9,1-8,9-10,8-10,0-7,1######M±S 128,0±3,8 125,5±2,1 119,8±0,2 116,3±3,8 112,0±3,8 109,2±1,2 106,3±9,0111,5±2,1 119,3±16,030,0 мг/кг%-2,0-6,4-9,1-12,5-14,7-16,9-12,9-6,8M±S 130,3±1,5127,9±2,2125,4±2,3122,2±1,9121,3±1,7119,6±3,2120,2±3,0119,6±2,3122,1±5,860,0 мг/кг%-1,9-3,8-6,2-6,9-8,3-7,8-8,3-6,3#Примечание: * - М – среднее значение, S-стандартное отклонение, % - изменение САД в процентах к исходному; - данные достоверны относительно группы контроля (р<0,05).305в дозе 15,0 мг/кг снижает САД на 21,2% по сравнению с исходным уровнем,при пероральном введении наиболее эффективно в дозе 30,0 мг/кг, по выраженности эффекта не уступает нормодипину и сопоставимо с диротоном и небилетом.
Это позволяет считать перспективным дальнейшее углубленное исследование сердечно-сосудистых свойств соединений 2.43 и 2.220 [14, 58].Выявленынекоторыезакономерностизависимости«структура-гитопензивная активность» в ряду тиетансодержащих производных пиримидин-2,4(1H,3H)-диона.Так,6-метил-3-(тиетан-3-ил)пиримидин-2,4(1H,3H)-дион (2.33) незначительно снижает САД, тогда как окисление тиетановогоцикла до тиетан-1-оксидного (соединение 2.43) и тиетан-1,1-диоксидного (соединение 2.45) приводит к выраженному гипотензивному эффекту. В ряду С5аминометилпроизводных наблюдается противоположная тенденция: соединение 2.49, содержащее в структуре тиетановый цикл, обладает выраженным гипотензивным действием, а тиетан-1,1-диоксид 2.62 практически не влияет наСАД.
Введение в положение 1 пиримидин-2,4(1H,3H)-диона алкильных радикалов, независимо от степени окисления атома серы тиетанового цикла, приводит к существенному уменьшению или фактической потере гипотензивногодействия. Наличие ацетогидразидного фрагмента в положении 1 (соединение2.194) приводит к значительному увеличению гипотензивного эффекта посравнению с исходным тиетанилпиримидин-2,4(1H,3H)-дионом 2.33. В рядутиетансодержащих ацилгидразонов гипотензивная активность зависит от природы заместителей в илиденовом фрагменте.4.3. Антиокислительная активностьОбразование активных форм кислорода (АФК) в клетках живых организмов является нормальным метаболическим процессом.
Физические нагрузки, стрессы, действие негативных факторов окружающей среды и т.д. вызывают изменение содержания различных форм свободных радикалов в живых организмах, что становится молекулярным механизмом патогенеза многих заболеваний. Для коррекции процессов образования АФК применяются антиокси-306данты, в связи с чем, поиск ингибиторов свободно-радикального окисленияпостоянно находится в фοкусе внимания исследователей.Ряд работ посвящен изучению антиокислительных свойств производныхпиримидин-2,4(1H,3H)-дионов, в том числе, и применяемых в медицинскойпрактике, в частности, метилурацила [19, 37, 137] и оксиметилурацила, который выбран нами в качестве препарата сравнения [52].
Интернет - прогноз спомощью компьютерной системы РАSS показал, что все синтезированныепроизводные пиримидин-2,4(1H,3H)-дионов могут обладать антиоксидантнойактивностью (Ра-Рi 0,60-0,20).Антиокислительную активность 36 новых производных пиримидин2,4(1H,3H)-диона исследовали совместно с сотрудниками центральной научноисследовательской лаборатории ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России под руководством д.м.н., проф. Фархутдинова Р.Р. [6, 13, 20].На первом этапе изучали влияние синтезированных соединений на процессы свободно-радикального окисления (СРО) in vitro в трех модельных тестсистемах, имитирующих наиболее распространенные реакции СРО в живыхорганизмах, с использованием экспресс-метода определения антиокислительной активности, основанного на регистрации хемилюминесценции (ХЛ) – свечения, возникающего при взаимодействии свободных радикалов [146].На следующем этапе изучали влияние наиболее активных соединений напроцессы СРО in vivo при моделирοвании в эксперименте на животных оксидативного стресса.Модельные тест-системы для изучения СРО in vitro.В качестве первой тест-системы in vitro, в которой инициировалось образование активных форм кислорода, использовали 10 мл фосфатного буфера(рН 7,45) с добавлением 0,1 мл раствора люминола (10-5 М) и цитрата натрия(50 мМ).
Для инициации окисления добавляли 1 мл 50 мМ раствора FeSO4.В качестве второй модельной системы in vitro, где протекают реакцииперекисного окисления липидов (ПОЛ), использовали липиды куриного желтка, сходные по составу с липопротеидами крови. Куриный желток гомогени-307зировали в фосфатном буфере в соотношении 1:5 с последующим разбавлением в 20 раз. Отбирали 10 мл и ХЛ инициировали добавлением 1 мл 50 мМ раствора FeSO4, что приводило к окислению ненасыщенных жирных кислот, входящих в липопротеиновые комплексы, и развитию ХЛ.Влияние на процессы генерации АФК фагоцитами (модель фагоцитоза)изучали с использованием гепаринизированной венозной крови.
Раствор исследуемого соединения и 0,1 мл крови инкубировали в течение 5 мин, затемсмешивали с 2,0 мл подогретого до 37ºС раствора люминола (10-5 М).Изучаемые соединения растворяли в ДМСО (50 мг в 10 мл ДМСО) и добавляли в тест-системы в объѐме 1; 0,1 и 0,01 мл приготовленного раствора. Вкачестве контроля (К) использовали раствор ДМСО в том же объеме.Хемилюминесценцию регистрировали на хемилюминомере ХЛМ-003(Россия). Основными параметрами ХЛ служили интенсивность максимальнойвспышки (Imax, у.е.) и светосумма свечения (S, у.е.), которую измеряли в течение 5 мин.Результаты исследований влияния тиетансодержащих производных пиримидин-2,4(1H,3H)-диона на процессы СРО in vitro в трех модельных тестсистемах представлены в приложении 5, на основании которых выявлены некоторые закономерности зависимости «структура-антиокислительная активность».Проведенные исследования в модельных системах генерации АФК иПОЛ in vitro показали, что соединения 2.33, 2.35, 2.38, 2.43, 2.49, 2.51, 2.55,2.57, 2.60, 2.62, 2.64, 2.65, 2.77, 2.123, 2.132, 2.139, 2.142, 2.144, 2.152, 2.154,2.160-2.162, 2.198, 2.215, 2.216, 2.230, 2.235, 2.245, 2.247 обладают антиокислительным действием, выраженным в разной степени.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
