Диссертация (1139681), страница 27
Текст из файла (страница 27)
В основе этого процесса лежит выключение из кровотока части артериол и полное их исчезновение (Шпагина Л.А. с соавт., 2009).Причиной снижения числа функционирующих артериолимелких артерий яв-166ляется апоптоз эндотелиальных клеток (Багмет А.Д., 2002; Шпагина Л.А.,2008). Механизмы программируемой гибели клеток эндотелия при АГ окончательно не выяснены. Защитным эффектом на эндотелий сосудов средипрочих обладает фактор роста эндотелия сосудов (HolmesK. etal., 2007).Установленное в работе повышение концентрации VEGF при АГ являетсямеханизмом, сдерживающим разряжение микроциркуляторного русла. Однако,повышение проницаемости эндотелиального барьера под влияниемVEGF приводит к воспалительным изменениям в медиальном слое иинтимесосудов, что является дополнительным фактором развития межклеточногофиброза,апоптоза и/или пролиферации ГМК сосудов (Шляхто Е.В.
с соавт.,2002). По-видимому, баланс между индукторами и ингибиторами апоптозаэндотелиальных клеток и определяет степень их повреждения.При повышении числа апоптотических клеток (эндотелиальных, гладкомышечных) в циркуляцию выделяются мембрано-связанные микрочастицы, которые привлекают моноциты и макрофаги.Погибшие клетки, не ставшие жертвой быстрого фагоцитоза, начинают выделять воспалительные цитокины.
Фагоцитоз большого числа погибших клеток не эффективен, так какприсутствие в циркулирующей крови модифицированных липопротеидовнизкой плотности препятствует фагоцитозу апоптотических клеток (КумсковаЕ.М.ссоавт.,2012).Высвобождениесповерхностимоноци-тов/макрофагов в процессе выполнения ими фагоцитарной функции цитокинов пролонгируетиммунное воспаление сосудистой стенки (КузнецоваТ.Ю., 2009).Таким образом, функциональное состояние эндотелиоцитов через рядпатофизиологических механизмов связано с выраженностью иммунного воспаления у больных АГ. Для подтверждения этого предположения у больныхРАГ цитокиновый профиль изучали в зависимости от функционального состояния эндотелия (табл. 5.10-5.11).167Таблица 5.10Цитокиновый профиль у больных 1-й группы в зависимости от метаболической устойчивости эндотелияПоказательМетаболическая устойчивостьрэндотелиоцитовПрисутствует (n=29)Отсутствует (n=42)ИЛ-1β, пг/мл0,82±0,0861,5±0,140,033ИЛ-6, пг/мл4,1±0,477,7±0,310,002ИЛ-8, пг/мл3,1±0,427,2±1,230,0000ФНО-α, пг/мл4,5±0,839,1±1,460,0001раИЛ-1β, пг/мл1083,4± 202,961097,3± 189,830,7836,3±2,1239,2 ± 1,950,34ИФ-γ, пг/млСравнительный анализ цитокинового профиля в двух подгруппахбольных РАГ позволил отметить более высокие уровни провоспалительныхцитокинов у больных при рефрактерной АГ и отсутствием метаболическойустойчивости эндотелия.
Причем, повышение содержания изучаемых провоспалительных цитокинов носило достоверный характер (p<0,05). Концентрация противовоспалительных цитокинов у больных рефрактерной АГ неотличалась в подгруппах с разной выраженностью метаболической устойчивости эндотелиоцитов (табл.5.11).Таблица 5.11Цитокиновый профиль у больных 1-й группы в зависимости от механической чувствительности эндотелия к продольным сдвигамПоказательМеханочувствительность эндотелиоцитовpcнижена (n=64)нормальная (n=7)ИЛ-1β, пг/мл1,42±0,091,02±0,110,042ИЛ-6, пг/мл7,57±0,526,34±0,390,048ИЛ-8, пг/мл7,81±0,236,62±0,450,041ФНО-α, пг/мл8,8±0,747,7±0,570,54168раИЛ-1β, пг/млИФ-γ, пг/мл1179,8± 167,121439,2± 153,210,8233,1±2,1330,4 ± 2,150,58У больных РАГ с низкой механочувствительностью эндотелиоцитовсодержание провоспалительных цитокинов по сравнению с подгруппой снормальной механочувствительностью было выше: ИЛ-1β -на 39,2%(р=0,042), ИЛ-6 – на 19,4% (р=0,048), ИЛ-8 – на 18% (р=0,041).
Сопряжениемежду механочувствительностью эндотелиоцитов и уровнем противовоспалительных цитокинов отсутствовало.Корреляционно-регрессионного анализ показал наличие прямой теснойдостоверной взаимосвязи между содержанием в крови ИФ-γ (r=0,69,p<0,001), ФНО-α (r=0,76, p<0,001), ИЛ-6 (r=0,71, p<0,001) иизменением линейной скорости кровотока при стимуляции холинорецепторов эндотелия.Обнаруженные ассоциативные связи у пациентов с РАГ между сосудодвигательной функцией эндотелиоцитов исодержанием в крови цитокинов показать наличие влиянияиммунологических регуляторных систем на функциональное состояние эндотелия.Определена обратная корреляционная связь между провоспалительнойцитокинемией и амплитудой ЭЗВД, напряжением сдвига на эндотелиоцитах,коэффициентом их механочувствительности, а также прямая достовернаясвязь с уровнем в крови VEGF (рис.
5.2).VEGFЭЗВДVEGFЭЗВД0,54*-0,48*0,64*-0,64*-0,53*ИЛ-6К-0,43*-0,59*ФНОК-0,55*169VEGFЭЗВД0,52*-0,40*-0,48*ИЛ-8К-0,39*VEGFЭЗВД0,61*0,48*-0,12ИФ-К-0,18Рис.5.2. Коэффициенты корреляции у больных РАГ между уровнями цитокинов и амплитудой ЭЗВД, содержанием VEGF в крови, параметрами механочувствительностиПолученные результаты показали, что провоспалительная цитокинемияу больных РАГ является дополнительным фактором ремоделирования сосудов, действие которого опосредуется через воспалительные процессы в сосудистой стенке и повреждение эндотелия.
Таким образом, развитие рефрактерной АГ сопровождается структурным повреждением эндотелиоцитов снеобратимым угнетением функционального состояния, что ассоциировано сповышением уровня провоспалительных цитокинов в плазме крови.Вместе сэтим, повышение содержания противовоспалительных цитокинов можно понимать как адаптивное явление, ограничивающее воспаление и наблюдалосьвне зависимости от выраженности дисфункции эндотелия1705.3.
Генетические аспекты иммунного воспаления при рефрактерной артериальной гипертензииПолиморфизм генов цитокинов обусловливают иммунную конституцию больных. При обнаружении провоспалительных вариантов геновцитокинов формируется повышенная склонность к активации иммунной системы при инфекциях, механическом воздействии на ткань (BidwellJ. etal.,2009). У больных РАГ определяли 3 полиморфных варианта генов: «-31 T/C»в гене интерлейкина 1β, «-174 G/C» в гене интерлейкина- 6 и « 308 G/A» вгене ФНО-α.Частота полиморфизмов генов цитокинов у пациентов с РАГ оказаласьвысокой. Полиморфизм «-31 T/C» в гене интерлейкина-1β был обнаружен в53,5%, «-174 G/C» в гене интерлейкина-6 – в 64,8%, «308 G/A» в гене ФНО-α– в 84,5%.
У пациентов с контролируемой АГ встречаемость полиморфизмагенов провоспалительных цитокинов была ниже (p<0,05): «-31 T/C» в генеИЛ-1β – в 12,9%, «-174 G/C» в гене ИЛ-6 – в21,4% и «308 G/A» в генеФНО-α – в 25,7% (табл.5.12).Чаще всего среди больных с РАГ встречался полиморфизм «308 G/A» вгене ФНО-α, что способствовало синтезу этого провоспалительного цитокинаи реже всего - полиморфизм «-31 T/C» в гене интерлейкина-1β.Таблица 5.12Частота полиморфизмов генов провоспалительных цитокинов убольных АГПолиморфизм«-31 T/C» в генеИЛ-1β«-174 G/C» в генеИЛ-6«308 G/A» в генеФНО-α1-я группа, n=71абс.%3853,52-я группа, n=70абс.%912,9р0,0474664,81521,40,0486084,51825,70,039Однако при АГ, как и в случае с другими многофакторными заболеваниями, недостаточно лишь знания продукта гена и влияния полиморфизма171этого гена на функциональные свойства белка.
Конечный эффект гена вомногом зависит от его ближайшего окружения и свойств системы, в которойон функционирует. Это, в свою очередь, в значительной мере зависит от индивидуальных особенностей и условий окружающей среды. Поэтому один итот же набор генов может обладать различным функциональным значением вразных популяциях. В связи с этим является актуальным выяснение роли полиморфизма ряда генов-кандидатов, факторов риска и некоторых клинических особенностей в течении АГ.В табл. 5.13-5.15 отражена оценка сопряжения метаболической устойчивости эндотелия и полиморфизма «-31 T/C» в гене ИЛ-1β,«-174 G/C» вгене интерлейкина-6 и « 308 G/A» в гене ФНО-α. В результате было установлено, что метаболическая неустойчивость эндотелия к окислительномустрессу у больных РАГ была сопряжена с наличием полиморфизма «-174G/C» в гене интерлейкина-6 (р=0,003) (табл. 5.14) и « 308 G/A» в гене ФНО-α(р=0,02)(табл.5.15).Сполиморфизмом«-31T/C»вгенеИЛ-1βметаболическая неустойчивость эндотелия к окислительному стрессу сопряжена не была, о чем свидетельствовало низкое значение коэффициентаПирсона и отсутствие доверительной значимости.Таблица 5.13Оценка сопряжения метаболической устойчивости эндотелия иполиморфизма «-31 T/C» в гене ИЛ-1βМетаболическая Абс./%неустойчивостьэндотелияПолиморфизм «-31 T/C» вгене ИЛ-1βприсутствует отсутствуетВсегоприсутствуетАбс.количество% от суммы постолбцу2360,51957,64259,2отсутствуетАбс.количество% от суммы постолбцу1539,51442,42940,8172Всего:Абс.количество38% от суммы по100,0столбцу2=0,06; р=0,833100,071100,0Таблица 5.14Оценка сопряжения механочувствительности эндотелия и полиморфизма «-174 G/C» в гене интерлейкина-6Метаболическая Абс./%неустойчивостьэндотелияПолиморфизм «-174 G/C» вВсегогене интерлейкина-6присутствуетотсутствуетприсутствуетАбс.количество% от суммы постолбцу3371,7936,04259,2отсутствуетАбс.количество13% от суммы по28,3столбцуАбс.количество46% от суммы по100,0столбцу2=8,56; р=0,0031664,02940,825100,071100,0Всего:Таблица 5.15Оценка сопряжения механочувствительности эндотелия и полиморфизма «308 G/A» в гене ФНО-αМетаболическая Абс./%«308 G/A» в гене ФНО-αВсегонеустойчивостьэндотелияприсутствует отсутствуетприсутствуетАбс.количество% от суммы постолбцу3965,0327,34259,2отсутствуетАбс.количество21829173% от суммы по35,0столбцуАбс.количество60% от суммы по100,0столбцу2=5,48; р=0,02Всего:72,740,811100,071100,0В табл.5.16 -5.18 отражена оценка сопряжения механочувствительности эндотелия к деформации сдвига и полиморфизма «-31 T/C» в гене ИЛ1β,«-174 G/C» в гене интерлейкина-6 и « 308 G/A» в гене ФНО-α.Таблица 5.16Оценка сопряжения механочувствительности эндотелия иполиморфизма «-31 T/C» в гене ИЛ-1βМеханочувствительность эндотелияАбс./%сниженаАбс.количество% от суммы постолбцу3386,83193,96490,1нормальнаяАбс.количество5% от суммы по13,2столбцуАбс.количество38% от суммы по100,0столбцу2=0,99; р=0,3226,179,933100,071100,0Всего:Полиморфизм «-31 T/C» вгене ИЛ-1βприсутствует отсутствуетВсегоТаблица 5.17Оценка сопряжения механочувствительности эндотелия и полиморфизма «-174 G/C» в гене интерлейкина-6Механочувствительность эндотелияАбс./%Полиморфизм «-174 G/C» вгене интерлейкина-6присутствуетсниженаВсегоАбс.количество41отсутствует2364174% от суммы постолбцунормальнаяВсего:89,192,090,1Абс.количество5% от суммы по10,9столбцуАбс.количество46% от суммы по100,0столбцу2=0,15; р=0,6928,079,925100,071100,0Таблица 5.18Оценка сопряжения механочувствительности эндотелия и полиморфизма «308 G/A» в гене ФНО-αМеханочувствительность эндотелияАбс./%сниженаАбс.количество% от суммы постолбцунормальнаяАбс.количество2% от суммы по3,3столбцуАбс.количество60% от суммы по100,0столбцу2=18,56; р=0,0000Всего:«308 G/A» в гене ФНО-αприсутствует5896,7Всегоотсутствует654,56490,1545,579,911100,071100,0У пациентов с РАГ со снижением механочувтсвительности эндотелия кпродольным деформациям был ассоциирован только полиморфизм«308G/A» в гене ФНО-α.
Как известно, с потерей механочувствительности эндотелия связана способность сосуда к вазодилатации.Итак, проведение генетических исследований позволило обнаружить упациентов РАГ высокую встречаемость провоспалительных вариантов генов,кодирующих ранние этапы воспаления и иммунного ответа. Наличие провоспалительных вариантов генов предрасполагало к формированию у боль-175ных иммунного воспаления в сосудистой стенке, ограничивающего функциональные способности эндотелиальных клеток – их вазодилататорные потенции, метаболическую устойчивость к окислительному стрессу и механочувствительность к продольным сдвигам.5.4.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
