Диссертация (1139576), страница 36
Текст из файла (страница 36)
В 13 раз вышенормы было процентное содержание моноцитов этого типа (1,79 ± 0,04%, р <0,05), а абсолютное (5,05 ± 0,11 млн/л) — в 11 раз у пациентов с ХПС. У больныхХПТ CD284+-моноцитов было больше в 4,2 раза (0,60 ± 0,14%, 1,98 ± 0,46 млн/л),чем у здоровых людей при р < 0,05. Статистически достоверное снижениесодержания субпопуляции моноцитов, экспрессирующих TLR-4, было связано сувеличением степени тяжести пародонтита. Для больных КАП также былохарактерно повышенное в 10 раз процентное содержание CD284+-моноцитов(1,36 ± 0,14%) по сравнению с контролем, а абсолютного (5,58 ± 0,57 млн/л) — в12 раз.Максимальное содержание CD284+-нейтрофилов было у больных с ХГ(0,42 ± 0,06%, 20,45 ± 4,65 млн/л).
У людей со здоровым пародонтом ихколичество (0,35 ± 0,05%, 18,25 ± 3,11 млн/л) было статистически недостовернониже в 1,2 раза. При ХП наблюдалось снижение числа и доли этих нейтрофиловв зависимости от степени тяжести пародонтита. Так, при ХПЛ оно было в 1,2–2261,3 раза ниже (0,27 ± 0,07%, 14,79 ± 1,78 млн/л), р > 0,05. У больных ХПСабсолютное содержание CD284+-нейтрофилов (8,05 ± 2,67 млн/л) было в 2,3 разаниже, а долевое (0,21 ± 0,06%) — в 1,7 раза меньше при р < 0,05).
Абсолютноеколичество CD284+-нейтрофилов (6,35 ± 1,75 млн/л) у пациентов с ХПТ было в2,9 раза меньше, а процентное (0,17 ± 0,05%) — в 2,1 раза, чем у здоровых людей.У больных КАП абсолютное содержание (7,85 ± 2,18 млн/л) даннойсубпопуляции нейтрофилов было в 2,4 раза меньше, а процентное (0,18 ± 0,05%)— в 1,9 раза, чем у здоровых людей, р < 0,05 (таблица 34).Таблица 34Оценка экспрессии молекул CD284 (TLR-4) на лейкоцитах венозной кровив группах сравнения (М ± Δ)ГруппысравненияЕд.измеренияКонтрольная%абс.,млн/л1а%абс.,млн/л1б%абс.,млн/л1в%абс.,млн/л2%абс.,млн/л3%абс.,млн/лЭкспрессия маркера CD 284 (TLR 4)НейтрофилыМоноцитыЛимфоциты0,35 ± 0,0518,25 ± 3,110,14 ± 0,010,47 ± 0,130,26 ± 0,125,98 ± 2,760,27 ± 0,0714,79 ± 1,782,17 ± 0,18*6,47 ± 0,54*0,73 ± 0,13*15,69 ± 2,79*0,21 ± 0,06*8,05 ± 2,67*1,79 ± 0,04*5,05 ± 0,110,56 ± 0,14*11,31 ± 2,83*0,17 ± 0,05*6,35 ± 1,75*0,60 ± 0,14*1,98 ± 0,46*0,31 ± 0,116,63 ± 2,350,42 ± 0,0620,45 ± 4,652,35 ± 0,25*7,52 ± 0,80*0,85 ± 0,14*18,96 ± 3,12*0,18 ± 0,05*7,85 ± 2,18*1,36 ± 0,14*5,58 ± 0,57*0,39 ± 0,129,48 ± 0,86 *Таким образом, можно сделать заключение, что клетки — представителиосновных популяций лейкоцитов (нейтрофилов, моноцитов и лимфоцитов), как227периферической крови, так и десневой жидкости несут на своей поверхности(экспрессируют) TLR-2 и TLR-4, которые можно выявить с помощьюиммунофлюоресцентноймикроскопииилипроточнойцитометриисмоноклональными антителами к CD282- и CD284-маркерам соответственно.
Упациентов с интактным пародонтом (контрольная группа) отмечен самыйвысокий уровень экспрессии TLR-2 на лимфоцитах, меньше — на моноцитах исамый низкий — на нейтрофилах венозной крови. Напротив, в контрольнойгруппе было выявлено больше всего нейтрофилов, экспрессирующих TLR-4,существенно меньше — лимфоцитов и совсем мало — моноцитов.При развитии хронического пародонтита экспрессия TLR-2, очевидно,увеличивается на моноцитах, но снижается на нейтрофилах и лимфоцитах посравнению с контрольной группой; а экспрессия TLR-4 увеличивается не толькона моноцитах, но также и на лимфоцитах, но снижается на нейтрофилах.
Прихроническом катаральном гингивите в популяции лейкоцитов TLR-2 большевсего экспрессировали лимфоциты, в меньшей степени — моноциты и ещеменьше — нейтрофилы. TLR-4 в большей степени экспрессировали моноциты, вменьшей—лимфоцитыинейтрофилы.Упациентовскандида-ассоциированным пародонтитом доминировали CD282+-моноциты, в меньшейстепени выявляли CD282+-лимфоциты и CD282+-нейтрофилы. Экспрессия TLR4 преобладала в ряду: моноциты — нейтрофилы, лимфоциты.Таким образом, экспрессия рецепторов врожденного иммунитета TLR-2и TLR-4 на лейкоцитах периферической крови (нейтрофилах, моноцитах илимфоцитах) и десневой жидкости у людей со здоровым пародонтом имелапримерно одинаковый характер, но варьировала при различных формахвоспалительных заболеваний тканей пародонта.5.5.
Цитокиновый профиль десневой жидкости, биопленки пародонтаи плазмы периферической кровиНами также было проведена оценка содержания в бесклеточномсупернатанте из биопленки (таблица 35) и десневой жидкости (таблица 36)228провоспалительных цитокинов – интерлейкинов. Было установлено, чтоконцентрация интерлейкинов у людей со здоровым пародонтом и больных своспалительными заболеваниями полости рта значительно варьировала.Таблица 35Содержание интерлейкинов в исследуемом материале биопленки(М ± Δ), нг/мгПоказательIL-1βконтрольная0,68 ± 0,31(0,37–0,99)IL-60,06 ± 0,02(0,04–0,08)TNF-α0,12 ± 0,08(0,04–0,20)IL-41,54 ± 0,86(0,68–2,40)IL-81,62 ± 0,78(0,84–2,40)IL-17A2,33 ± 1,64(1,29–4,57)INF-γ1,39 ± 0,46(0,93–1,85)Всего:7,74 ± 4,15(3,59–11,89)1а3,49 ±0,83(2,66–4,32)0,39 ±0,11(0,28–0,50)0,34 ±0,16(0,18–0,50)4,86 ±1,68(3,18–6,54)4,94 ±0,85(4,09–5,79)5,36 ±1,42(3,94–6,78)4,35 ±0,64(3,71–4,99)23,73 ±5,69(18,04–29,42)Группа1б1в5,52 ±8,86 ±0,840,90(4,68–(7,96–6,36)9,76)0,65 ±0,99 ±0,130,21(0,52–(0,78–0,78)1,20)0,56 ±0,85 ±0,100,16(0,46–(0,69–0,66)1,01)5,22 ±8,59 ±0,981,27(4,24–(7,32–6,20)9,86)6,97 ±9,11 ±1,240,68(5,73–(8,43–8,21)9,79)7,02 ±9,36 ±1,360,87(5,66–(8,49–8,38)10,23)6,98 ± 10,21 ±1,141,27(5,84–(8,94–8,11)11,48)32,92 ± 47,97 ±5,795,36(27,13– (42,61–38,71)53,33)20,47 ±0,15(0,32–0,72)0,34 ±0,20(0,14–0,54)0,78 ±0,15(0,63–0,93)2,96 ±0,67(2,29–3,63)8,58 ±1,56(7,02–10,14)7,58 ±1,13(6,45–8,71)2,55 ±0,64(1,91–3,19)23,56 ±4,5(19,06–28,06)34,36 ±0,70(3,66–5,06)0,54 ±0,21(0,33–0,75)0,43 ±0,22(0,21–0,65)7,11 ±0,79(6,36–9,08)7,72 ±1,36(6,36–9,08)8,36 ±1,67(6,69–10,03)9,74 ±1,21(8,53–1,21)38,26 ±6,16(32,10–44,42)229Таблица 36Содержание интерлейкинов в десневой жидкости (М ± Δ), нг/мл.ПоказательIL-1βIL-6TNF-αIL-4IL-8IL-17AINF-γВсего:ГруппаКонтрольная4,60 ± 2,10(2,5–6,7)0,24 ± 0,02(0,22–0,24)0,85 ± 0,55(0,30–1,40)26,50 ± 2,30(25,2–28,8)18,70 ± 5,00(13,7–21,7)46,60 ± 13,70(30,02–59,9)13,57 ± 2,15(11,42–15,72)111,06 ± 25,42(85,64–136,48)1а1б1в2313,96 ± 3,31*20,44 ± 3,12*28,46 ± 2,89*2,68 ± 0,5219,64 ± 3,17*(10,65–17,27)(17,32–23,56)(25,47–31,25)(2,16– 3,20)(16,47–23,81)1,56 ± 0,22*1,89 ± 0,26*2,46 ± 0,18*0,84 ± 0,36*1,63 ± 0,21*(1,34–1,78)(1,63–2,15)(2,28–2,64)(0,48–1,22)(1,42–1,84)1,92 ± 0,882,78 ± 0,52*3,82 ± 0,16*3,61 ± 0,19*2,46 ± 0,34*(1,04–2,80)(2,26–3,30)(3,66–3,98)(3,49–3,80)(2,12–2,80)32,50 ± 2,40*30,64 ± 1,53*35,61 ± 3,14*12,37 ± 3,45*29,72 ± 0,58*(30,1–34,9)(29,11–32,27)(32,47–38,75)(8,92–15,82)(29,14–30,30)23,70 ± 4,3027,60 ± 2,13*32,42 ± 3,45*25,73 ± 2,84*29,57 ± 2,46*(19,40–28,00)(25,47–29,73)(29,97–35,87)(22,89–28,57)(27,11–31,13)82,20 ± 16,60* 89,47 ± 12,14* 94,58 ± 15,21* 87,65 ± 13,70*91,34 ± 9,73*(65,6–98,8)(77,35–101,61) (79,37–109,79)(80,92–94,38)(81,61–101,07)31,70 ± 3,10*38,63 ± 4,54*47,70 ± 3,67*11,69 ± 3,2535,43 ± 3,69*(28,6–34,8)(34,09–44,17)(44,03–51,37)(8,44–14,94)(31,74–39,12)187,54 ± 27,71* 211,45 ± 24,24* 244,95 ± 28,70* 144,57 ± 17,34* 209,79 ± 20,18*(142,33–222,25) (187,21–235,69) (216,25–273,65) (127,23–161,91) (189,61–229,97)230Так, содержание ключевого медиатора протективного иммунитета IL-1β улюдей со здоровым пародонтом в материале из биопленки составило 0,68 ± 0,31нг/мг, у больных ХПЛ — статистически достоверно значимо в 5,1 раза выше(3,49 ± 0,83 нг/мг), ХПС — в 8,1 раза (5,52 ± 0,84 нг/мг), ХПТ — в 13,0 раз (8,86± 0,90 нг/мг), КАП — в 6,4 раза (4,36 ± 0,70 нг/мг) и только у больных ХГ — в1,4 раза меньше (0,47 ± 0,15 нг/мг) при р > 0,05.
При этом концентрация IL-1β убольных ХПТ была статистически достоверно выше, чем у больных ХПЛ (в 2,5раза) и в 1,6 раза выше, чем у больных ХПС.Содержание провоспалительного цитокина IL-6 у людей со здоровымпародонтом в материале из биопленки составило 0,06 ± 0,02 нг/мг, у больныхХПЛ — в 6,5 раз выше (0,39 ± 0,11 нг/мг), ХПС — в 10,8 раза (0,65 ± 0,13 нг/мг),ХПТ — в 16,5 раза (0,99 ± 0,21 нг/мг), КАП — в 9,0 раза (0,54 ± 0,21 нг/мг) ибольных ХГ — в 5,7 раза (0,34 ± 0,20 нг/мг) при р < 0,05.
Среднее количествоэтого цитокина у больных ХПТ было в 1,5 раза выше, по сравнению с больнымиХПС и в 2,5 раза — по сравнению с больными ХПЛ (р < 0,05).Такая же тенденция отмечена и для TNF-α: в контрольной группе — 0,12 ±0,08 нг/мг, у больных ХПЛ — в 2,8 раз выше (0,34 ± 0,16 нг/мг), ХПС — в 4,7раза (0,56 ± 0,10 нг/мг), ХПТ — в 7,1 раза (0,85 ± 0,16 нг/мг), КАП — в 3,6 раза(0,43 ± 0,22 нг/мг) и больных ХГ — в 6,5 раза (0,78 ± 0,15 нг/мг) при р < 0,05.Количество TNF-α у больных ХПТ было в 2,5 раза больше, чем у больных ХПЛи в 1,5 раза, чем у больных ХПС.Средние значения IL-17A у людей со здоровым пародонтом были равны2,33 ± 1,64 нг/мг, у больных ХПЛ — 5,36 ± 1,42 нг/мг, ХПС — 7,02 ± 1,36 нг/мг,ХПТ — 9,36 ± 0,87 нг/мг, КАП — 8,36 ± 1,67 нг/мг, ХГ — 7,58 ± 1,13 нг/мг, тоесть в 2,3–4,0 раза выше при всех изученных нами формах воспалительныхзаболеваний тканей пародонта (р < 0,05).
Содержание IL-17A у больных ХПТбыло статистически достоверно в 1,3 раза больше, чем у больных ХПС и в 1,7раза, чем у больных ХПЛ.Концентрация IL-8 у лиц со здоровым пародонтом была на уровне 1,62 ±0,78 нг/мг, статистически достоверно в 3,0 раза меньше, чем у больных ХПЛ231(4,94 ± 0,85 нг/мг), в 4,3 раза, чем у больных ХПС (6,97 ± 1,24 нг/мг), в 5,6 раз,чем у больных ХПТ (9,11 ± 0,68 нг/мг), в 4,8 раз, чем у больных КАП (7,72 ± 1,36нг/мг) и в 5,3 раза, чем у больных ХГ (8,58 ± 1,56 нг/мг). У больных ХПТ онабыла в 1,8 раза выше, чем у больных ХПЛ и в 1,3 раза, чем у больных ХПС (р <0,05).Уровни IL-4 составили 1,54 ± 0,86 нг/мг у представителей контрольнойгруппы, статистически достоверно в 3,2 раза больше — у пациентов с ХПЛ (4,86± 1,68 нг/мг) в 3,4 раза — у больных ХПС (5,22 ± 0,98 нг/мг), в 5,6 раза при ХПТ(8,59 ± 1,27 нг/мг) и в 4,6 раза — при КАП (7,11 ± 0,79 нг/мг), а у больных ХГ в1,9 раза (2,96 ± 0,67 нг/мг). При ХПТ содержание IL-4 было в 1,8 раза выше, чемпри ХПЛ и в 1,6 раза, чем при ХПС (р < 0,05).Содержание INF-γ у людей со здоровым пародонтом варьировало впределах 1,39 ± 0,46 нг/мг, у больных ХПЛ статистически достоверно выше в 3,1раза (4,35 ± 0,64 нг/мг), в 5,0 раз — у больных ХПС (6,98 ± 1,14 нг/мг), в 7,3 раза— у больных ХПТ (10,21 ± 1,27 нг/мг), в 7,0 раза — у больных КАП (9,74 ± 1,21нг/мг), а у больных ХГ — в 1,8 раза (2,55 ± 0,64 нг/мг) при р < 0,05.