Диссертация (1139576), страница 33
Текст из файла (страница 33)
Что касается других групп антибактериальных препаратов с низкой202частотойвыявлениягеноврезистентности(бета-лакамазозащищенныепрепараты, карбапенемы, ванкомицин), то их целесообразно применятьисключительно в период обострения пародонтита, так как они не обладаютспособностью проникать внутриклеточно. Применение таких препаратовжелательно проводить в виде ступенчатой терапии, причем второй ступеньюназначать пациенту антибактериальный препарат внутриклеточного действия.Предложенное обоснование позволит оптимизировать существующиесхемы применения антибактериальных препаратов в комплексном лечениивоспалительных заболеваний пародонта, которое в настоящее время, ксожалению, проводится эмпирически и потому дает кратковременный эффект.203ГЛАВА 5.РЕЗУЛЬТАТЫ КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКИХИССЛЕДОВАНИЙ: ОСОБЕННОСТИ ВРОЖДЕННОГОИММУНИТЕТА У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ПАРОДОНТИТОМБиопленки оказывают значительный вклад в формирование бактериальнойрезистентности к антибиотикам и факторам врожденного иммунитета организмахозяина.Приинтерпретациирезультатоввыявлениябиопленкообразующихбактерий нужно учитывать, что на процессы образования биопленок in vivoвлияют факторы организма человека [27, 28, 53, 61, 100, 173, 178, 201].Вместе с тем данные о влиянии биопленкообразования на устойчивостьбактерий к различным эффекторам иммунитета организма человека поканемногочисленны и противоречивы [315, 317, 343, 375, 458, 465].
Это определяетактуальность исследований, направленных на изучение взаимосвязи междууказанными свойствами.5.1. Количественный состав популяций лейкоцитов периферическойкровиРаспространение бактериальных и грибковых инфекций зависит от многихфакторов, в том числе от постоянного роста иммунокомпроментированныхлюдей. Особенно не защищены пациенты с дефектами количественногосодержания и функционирования нейтрофилов, клеточно-опосредованногоиммунитета, метаболической дисфункцией и исключительного возраста. Рискинфицированияувеличиваетсяприиспользованииширокогоспектраантибиотиков и цитотоксической химиотерапии.ПМЯЛ являются основными клетками врожденного иммунитета, которыеуничтожают инфекционных патогенов.У обследованных нами пациентов мы оценили количественный состав204популяций лейкоцитов в периферической крови (таблица 26).Было показано, что средние величины количества лейкоцитов впериферической крови при ХП различных степеней тяжести мало различаютсямежду собой и от значений у практически здоровых людей.
Однако у больныхХГ они были статистически достоверно значимо ниже, чем у здоровых людей,больных ХП легкой и средней степенью тяжести. Еще меньше были средниеколичества лейкоцитов у больных КАП.Так, средние значения процентного содержания нейтрофилов у пациентовс легкой (57,75 ± 0,51%), средней (59,25 ± 2,15%) и тяжелой (60,21 ± 1,63%)степенями ХП, а также у больных ХГ (56,31 ± 1,67%) и КАП (55,80 ± 1,23%)были ниже значений у представителей контрольной группы (68,23 ± 1,57%), p <0,05. Наблюдалось также снижение абсолютного количества нейтрофилов, какобщих, так и разных морфотипов (сегментоядерных, палочкоядерных).
При этомразница средних значений содержания общих Нф по сравнению с контрольнойгруппой (5,30 ± 0,35 млрд/л) была статистически достоверна у пациентов 1б (3,81± 0,48 млрд/л), 1в (4,24 ± 0,38 млрд/л) групп и КАП (4,36 ± 0,58 млрд/л);сегментоядерных Нф — у пациентов 1б (1,84 ± 0,19 млрд/л) и 1в (1,68 ± 0,35млрд/л) против 3,75 ± 1,75 млрд/л у здоровых людей; палочкоядерных Нф — убольных 1б группы (0,08 ± 0,01 млрд/л) относительно нормы (0,17 ± 0,07 млрд/л).Абсолютное и относительное число базофилов у пациентов всехобследованных групп с ХП было примерно в 3,5 раза выше числа базофилов вконтрольной группе (p < 0,05).Количество эозинофилов, напротив, было существенно ниже, чем упациентов контрольной группы, за исключением больных КАП (p < 0,05).Относительноесодержание лимфоцитовв периферическойкровипациентов всех обследованных групп с ХП было в 1,15–1,30 раза выше, а убольных КАП в 1,42 раза выше по сравнению с контрольной группой (p < 0,05),однако достоверная разница по абсолютным значениям отсутствовала.Относительное число моноцитов было приблизительно в 1,2 раза выше упациентов 1б и 1в групп по сравнению с контрольной группой.205Таблица 26Количество лейкоцитов в периферической крови пациентов в группах сравнения с воспалительнымизаболеваниями пародонта и в контрольной группе (с интактным пародонтом) (М ± Δ)ГруппаПоказательКонтрольная1а1б1в23количества в % иабс.Лейкоцитов7,72 ± 0,487,81 ± 0,617,33 ± 0,617,12 ± 0,446,71 ± 0,52*5,85 ± 0,58*Лимфоцитов, %28,33 ± 1,2137,00 ± 0,96*35,00 ± 2,45*32,60 ± 1,42*35,46 ± 0,58*39,62 ± 2,43*абс., млрд/л2,31 ± 0,172,15 ± 0,222,11 ± 0,252,16 ± 0,212,27 ± 0,262,45 ± 0,18Нейтрофилов, %69,3 ± 1,5757,6 ± 0,51*60,1 ± 2,15*61,5 ± 1,63*55,5 ± 1,67*57,80 ± 1,23*Общих абс., млрд/л5,30 ± 0,355,38 ± 0,613,81 ± 0,48*4,24 ± 0,38*5,08 ± 0,424,36 ± 0,58*Сегментоядерн., %52,38 ± 3,4854,75 ± 0,4748,42 ± 5,0544,38 ± 2,46*47,06 ± 0,64*47,64 ± 1,31*абс., млрд/л3,75 ± 1,752,94 ± 0,031,84 ± 0,19*1,68 ± 0,35*3,24 ± 0,362,39 ± 0,21Палочкоядерн., %1,95 ± 0,853,00 ± 0,322,05 ± 0,25*2,45 ± 0,363,24 ± 0,36*2,87 ± 0,26абс., млрд/л0,18 ± 0,070,17 ± 0,020,09 ± 0,01*0,13 ± 0,030,20 ± 0,020,17 ± 0,03Базофилов, %0,52 ± 0,252,05 ± 0,42*1,52 ± 0,16*1,89 ± 0,45*2,25 ± 0,34*1,33 ± 0,17*абс., млрд/л0,032 ± 0,020,16 ± 0,02*0,09 ± 0,02*0,12 ± 0,02*0,14 ± 0,03*0,08 ± 0,02*Эозинофилов, %2,76± 0,740,26± 0,11*0,67± 0,01*0,86± 0,11*1,84±0,381,47±0,51*Абс., млрд/л0,16 ± 0,050,014 ± 0,05*0,023 ± 0,01*0,05 ± 0,01*0,11 ± 0,040,09 ± 0,03*Моноцитов, %4,47 ± 0,645,05 ± 0,505,28 ± 0,11 *5,45 ± 0,17 *5,43 ± 0,356,36 ± 1,12 *абс., млрд/л0,34 ± 0,0430,31 ± 0,0260,28 ± 0,0280,33 ± 0,020,32 ± 0,020,45 ± 0,03*Примечание: * — различия статистически достоверны по сравнению с контрольной группой (при р < 0,05).206В то время как абсолютное количество моноцитов у пациентов разныхгрупп достоверно не различалось.
Только при КАП как относительное, так иабсолютное количество моноцитов оказалось в 1,4 раза выше по сравнению сконтрольной группой (что было статистически достоверно).Многие авторы считают, что при выходе из кровотока в очаг воспаленияу лейкоцитов меняется экспрессия генов и фенотипа [27, 29, 30, 53, 77, 96, 106,178, 201, 275, 375, 396]. Поэтому мы оценили содержание ПМЯЛ в смывах изполости рта (рис. 61).Рис.
61. Средние значения содержания «оронейтрофилов»Было установлено, что у представителей контрольной группы выделялиот 1,01·106 до 2,33·106 Нф на 1 мл. У пациентов с воспалительнымизаболеваниями полости рта содержание Нф в смывах из полости рта былостатистически достоверно выше. Так у больных ХГ их содержание составило3,3·106–5,9·106 Нф на 1 мл, ХПЛ — 3,1·106–4,2·106 Нф на 1 мл, ХПС — 5,0 106–6,3·106 Нф на 1 мл, ХПТ 9,8 106–14,8·106 Нф на 1 мл, у больных КАП — 12,2 106–17,5·106 Нф на 1 мл.
При этом разница в содержании Нф у больных с различнойстепенью тяжести пародонтита также была статистически достоверно значимой.2075.2. Функциональная активность нейтрофилов в периферической кровии полости ртаОценку функциональной активности лейкоцитов использовали методикуфагоцитоза in vitro с латексом опсонизированным IgG. Оказалось, что у людей создоровым пародонтом доля фагоцитирующих лейкоцитов периферической кровибыла больше, чем у пациентов с воспалительными заболеваниями тканей пародонта(таблица 27). Так, фагоцитарный показатель, соответствующий процентуфагоцитирующих клеток, был равен 82,00 ± 15,00% у представителей контрольнойгруппы, 67,50 ± 1,33% ‒ у пациентов с ХПЛ (p > 0,05), в 1,35 раза меньше (60,35 ±6,05%) ‒ у пациентов с ХПС и в 1,4 раза меньше (58,42± 5,68%) ‒ у пациентов с ХПТ(p < 0,05).Количество поглощенных частиц (фагоцитарное число) у представителейконтрольной группы было на уровне 7,52 ± 2,50 ед., а при ХПЛ ‒ статистическидостоверно меньше ‒ в 2,1 раза (3,55 ± 0,10 ед.), у пациентов с ХПС ‒ в 2,6 раза (2,93± 0,29 ед.) и у больных ХПТ — в 3 раза (2,47 ± 0,16 ед.) меньше ( p < 0,05).Коэффициент активности фагоцитов в норме был равен 3,26 ± 1,60 ед., приХПЛ — 2,85 ± 0,25 ед., ХПС — 2,37 ± 0,26 ед., ХПТ — 2,18 ± 0,34 ед., следовательно,наблюдалось незначительное снижение фагоцитарной активности в зависимости отстепени тяжести пародонтита, однако, оно было статистически недостоверным.В то же время доля фагоцитирующих нейтрофилов из смывов полости ртабыла статистически достоверно ниже у пациентов всех обследованных групп, чемлейкоцитов периферической крови: в 3 раза у людей со здоровым пародонтом, в 1,7раза — у больных ХПЛ, в 1,4 раза — у больных ХПС, в 1,1 раза — у больных ХПТ,в 1,6 раза — у больных ХГ и 1,2 раза — у больных КАП (таблица 28).
При этом упредставителей контрольной группы она составила 25,71 ± 1,43%, что в 1,5 разаменьше, чем у пациентов с ХПЛ (39,32 ± 1,63%). Процент фагоцитирующихоронейтрофилов (43,50 ± 2,12%) у больных ХПС был в 1,7 раза больше, чем вконтрольной группе, а у больных ХПТ — еще в 1,2 раза больше (50,44 ± 3,72%).208Таблица 27Фагоцитарная активность лейкоцитов периферической крови у больных c воспалительными заболеваниямитканей пародонта и в контрольной группе с интактным пародонтом (М ± Δ)ПоказательГруппаКонтрольная1а1б1в23Число фагоцитарное, ед.7,52 ± 2,503,55 ± 0,10*2,93 ± 0,29*2,47 ± 0,16*3,97±0,17*3,19±0,32*(5,0–10,0)(3,43–3,63)(2,62–3,20)(2,30–2,62)(3,79–4,13)(2,85–3,49)Показатель фагоцитарный, % 82,00 ± 15,0067,50 ± 1,3360,35 ± 6,05*58,42 ± 5,6865,46 ± 1,5956,64 ± 3,49*(65,0–95,0)(68,17–70,83) (54,28–66,38)(0,74–62,10)(64,87–68,15) (51,15–59,13)Активность фагоцитов3,26 ± 1,602,85 ± 0,252,37 ± 0,262,18 ± 0,343,04 ± 0,682,17 ± 0,38(коэффициент), ед.(1,60–5,00)(2,60–3,12)(2,13–2,65)(1,74–2,92)(2,36–3,72)(1,79–2,55)Таблица 28Фагоцитарная активность «оронейтрофилов» у больных c воспалительными заболеваниями тканей пародонтаи в контрольной группе с интактным пародонтом (М ± Δ)ПоказательГруппаКонтрольная1а1б1в23Число фагоцитарное, ед.12,43 ± 1,139,55 ± 1,10*5,51 ± 0,62*3,58 ± 0,46*14,91 ± 1,50*16,15 ± 0,32*(11,33–13,59)(8,43–10,63)(4,88–6,12)(2,90–4,02)(14,40–16,40) (15,85–16,49)Показатель фагоцитарный, %25,71 ± 1,4339,32 ± 1,63*43,5 ± 2,12*50,44 ± 3,72*40,5 ± 2,50*48,63 ± 3,29*(24,32–27,18) (37,72–40,98) (41,38–45,62) (46,70–54,14) (38,00–43,00) (45,35–51,93)Активность фагоцитов4,37 ± 1,344,06 ± 0,373,34 ± 0,273,48 ± 0,284,89 ± 0,583,37 ± 0,38(коэффициент), ед.(3,03–5,71)(3,69–4,43)(3,07–3,61)(3,20–3,76)(4,31–5,47)(2,99–3,75)209Таким образом, установлена статистически достоверная тенденция кснижению активности фагоцитирующих клеток при ХП, в том числе«оронейтрофилов», в наибольшей степени выраженная при увеличении степенитяжести заболевания (ХПС, ХПТ и КАП).
С другой стороны, фагоцитарнаяактивность «оронейтрофилов» во всех группах без исключения была примерно в1,5 раза выше, чем у нейтрофилов периферической крови.5. 3. Экспрессия лейкоцитарных эндогенных антимикробных пептидовВ настоящее время растет число исследований, свидетельствующих о том,что антимикробные пептиды (АМП) являются новой группой агентов, влияющихна биопленки [189, 190, 201].Активация нейтрофилов при инфекционных и воспалительных процессахприводиткбыстромувысвобождениюдефензинов,которыезатемобнаруживают во многих жидкостях организма, в том числе в плазме крови [191,392].Дефензины — мощные антимикробные катионные пептиды, нарушающиепроницаемость мембран микробов и формирующие ионные каналы. В организмечеловека определяют две основные группы АМП: альфа- и бета-дефензины.Существуют четыре типа α-дефензинов (HNP 1–4), которые содержатся вазурофильных гранулах нейтрофилов.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
