Диссертация (1139516), страница 35
Текст из файла (страница 35)
Это определяет необходимость совершенствования клиниколабораторной диагностики ВУИ у новорожденных, что особенно важно длябыстрой расшифровки неонатальных пневмоний.Так, например, при обследованииобразцовТБА и мазков из зева иотделяемого с ВДП у новорожденных с ВУП в первые дни исследования ДНКM.pneumoniae определена в 2,5% случаев, а Cl.pneumoniae - в 8,9%.Анализ полученных данных показал, что ДНК изученных инфекцийвыявлена во всех группах, в том числе у детей без признаков ВУИ. Так, наиболеечасто ДНК CMW и HSV выявлялась в группе с ВУИ чаще (р ˂ 0,001), чем вдругих группах, а ДНК M.pneumoniaе не выявлялась в группах срединоворожденных без ВУИ и контрольной. ДНК M.pneumoniae выявлены в 7,8%случаев, а ДНК Cl.pneumoniae у 9,1% обследованных новорожденных с ВУП и сдиагнозом хронической ВУИ у родильниц.
В группе обследованных безпризнаков ВУИ ДНК M.pneumoniae не обнаружены ни в одной пробе, тогда какДНК Cl.pneumoniae в 16,5% случаях.Полученные данные могут свидетельствовать о том, что выявленныеметодом ПЦР инфекции могут быть причиной ВУП у обследованныхноворожденных с лабораторно не подтвержденным диагнозом, но с типичнымиклиническими проявлениями легочной патологии.РазвитиеВУП,тяжесть,локализацияираспространенностьпатологического процесса, а также исход возникшей патологии определяются247видом возбудителя, его патогенностью и тем, какими путями микроорганизмыпроникли от матери к плоду.С целью подтверждения внутриутробного характера развития пневмоний уноворожденных и дифференциации ВУП от РНП, а также для оценкисанитарного состояния родильного стационара, нами было проведено санитарномикробиологическое исследование воздуха, медицинского оборудования иизучено микробное носительство среди медицинского персонала ОРИТН.В серии исследований нами проведена качественная и количественная(подсчет общего количестваколониеобразующих единиц (КОЕ)) оценкабактериальной обсемененности воздушной средыродильного дома на при-сутствие санитарно-показательных микроорганизмов.Многократное обследование воздуха (94 пробы) различныхотделенийродовспомогательных учреждений показало, что санитарное состояние этих типовпомещений удовлетворительное, микробное число не превышает допустимыенормы.С целью выявления этого фактора инфицированияусловно-патогенноймикробиотой нами было проведено бактериологическое исследование смывов,взятых с различных объектов родильного стационара.Из изученных 62 образцов с сухих поверхностей, положительный результатдали 34 (54,8%) посева.
С влажных поверхностей частота положительных посевовсоставила 34, из которых в 19 (55,9%) случаях выделялась грамотрицательнаямикрофлора, а грамположительная составила 15 (44,1%) случаев.Внашемисследовании,поколичествуположительныхнаходокдоминировали аппарат искусственного дыхания и контуры кислородной маскинаркозного аппарата (23,5 и 14,7% соответственно).Из 34 положительных находок полученных при исследовании 62 смывов смедицинскогооборудованияграмотрицательныеимикроорганизмыинвентаря–61,7%,суммарнотогдадоминироваликакнадолюграмположительных микробов приходилось – 38,2% (p<0,05). Полученные внастоящем исследовании данные коррелируют с ранее проведенными нами248результатами санитарно-бактериологического исследования в родильном домеРКБ, а также данными литературы [97].Так как медицинские работники являются контингентом высокого рискаинфекционного заражения как условно-патогенными, так и патогеннымимикроорганизмами [82], нами было проведено санитарно-микробиологическоеисследованиямедицинскогоперсоналананосительствопатогенныхмикроорганизмов.Было обследовано 29 медицинских работников (врачи, средний имладшиймедперсонал),которыеимелипостоянныйконтактсноворожденными.В ходе проведения исследования было установлено, что носительство S.aureus наиболее было распространено среди врачей в ОРИТН – 37,5%, вродблоке и в палатах новорожденных этот показатель составил – 25%, впослеродовом отделении – 12,5%.У медицинских сестер в ОРИТН в 33,3% случаев, у акушерокпослеродового отделения в27,7%, а у акушерок родильного блокамикроорганизмы выделялись в 22,3%, несколько меньше у медсестер палатноворожденных 16,7%.
Показатели носительства S.aureus у младшего медперсонала статистически не отличались от показателей среднего медперсонала.Показатели носительства S. aureus у сотрудников ОРИТН оказались выше, чем вдругих отделениях, что объясняет доминирующий характер выделенной флоры вэтиологической структуре пневмоний у новорожденных, находящихся в ОРИТН (р< 0,05).Существеннымфакторомпередачимикроорганизмоввотделенияхродильного дома являются и руки медицинского персонала.
С целью выявленияносительства патогенной микробиоты медперсоналом (n = 58), нами был проведенанализ, в котором изучался качественный и количественный состав микробиотыкожи рук до начала работы и в течение рабочего дня. Суммарное количествомикроорганизмов колебалось в широких пределах: от 0 до 10-10 КОЕ.249В результате при бактериологическом исследовании смывов с кожи рукврачей акушеров-гинекологов высевалитолько культуру S.epidermidis в 33,3%случаев.
У акушерок родильных блоков была выделена культура S.epidermidis в29,2%, E.coli - в 12,4% случаев. При исследовании смывов с кожи рук младшегоперсонала видовой состав микроорганизмов представленS.epidermidis была выделена в 31,6%,более широко -E.coli - 21%, Proteus spp. - в 10,5%,P.aeruginosa - в 5,2 % случаев.Наши исследования подтвердили, что колонизация кожных покровов рукS.epidermidis является отражением защитных возможностей организма, а степеньколонизации - объективным показателем предрасположенности к осложненномутечению инфекции, в частности, неонатальных пневмоний.Такимобразом,порезультатампроведенныхбактериологическихисследований можно сделать вывод, что рост удельного веса условно-патогенноймикрофлоры в этиологической структуре ранних неонатальных пневмонийнапрямую зависит от инфицирования кожи рук медперсонала, обсемененностиаппаратуры медицинского назначения, в частности аппарат ИВЛ, которыенедостаточно стерилизуются и дезинфицируются.Для определениядиагностическойзначимостимикробиологическогометода и эффективности проведенных исследований, мы провели сравнительныйанализ полученных результатов.При бактериологическом исследовании в целомв обеих группахнаблюдения отмечался рост как грамположительной, так и грамотрицательноймикробиоты.Грамположительные микроорганизмыдостоверно чаще (р < 0,05)высевалась при внутриутробных пневмониях (56%).
А грамотрицательнаямикробиота с высокой степенью достоверности (р < 0,001) чаще отмечалась приранних неонатальных пневмониях (58,6%). В группе внутриутробных пневмонийотмечались ассоциации грамположительной и грамотрицательной микрофлоры вравных соотношениях, а в группе ранних неонатальных – преобладали250грамотрицательные микробные ассоциации.
Практически идентичныданнымбактериологического исследования результаты ПЦР.Из230обследованныхбактериологическийноворожденныхпосевмикроорганизмом являлсябылсВУПположительным.S. epidermidis. Из различногоу213(87,5%)Доминирующимисследованногобиологического материала от новорожденных выделено и идентифицировано довида 414 штаммов, представителей различных таксонов.
Наиболее обсемененнымбиотопом у новорожденных с ВУП являлся зев – 140 штаммов (33,8%), наименее,кровь – 21 (5,2%).Приэтомобщееколичествоположительныхрезультатовбактериологических посевов клинического материала из очагов воспалениясоставил 64,8%. Чаще у детей были инфицированы зев - 61,3%, ТБА - 59,3% иВДП - 52,4% (p < 0,05). У 246 обследованных новорожденных с РНП быловыделено и идентифицировано 348 штаммов в этиологически значимомколичестве.Среди выделенных микроорганизмов по частоте выделения на первом месте- К.
pneumoniae (19,7%), на втором - E.coli (17,1 %) на третьем - S.epidermidis (15,5%) и далее P. aeruginosa (11%).Учитывая приведенные данные, а такжетотфакт, что вероятностьвозникновения инфекционных осложнений при неонатальных пневмонияхвозрастаетдляноворожденныхвродильныхдомах,представляетсяцелесообразным подробное изучение факторов патогенности УПМ.В подавляющем большинстве случаев при оценке видовой принадлежностимикроорганизмов, в том числе и стафилококков, опираются не только на ихбиохимические свойства, но и на наличие или отсутствие у них характерныхфакторов патогенности.ДляоценкиStaphylococcus,изучилисвойстврядавыделенныхмикроорганизмовродаизолированных из различных биотопов новорожденных, мынекоторыефакторыпатогенности,вчастности,наличиелецитовителлазной и ДНКазной активности, наличие гемолитических свойств.251Все выделенные штаммы стафилококков на основании изучения их свойствидентифицированыкакпредставителикоагулазаотрицательныхвидовстафилококков (КОС).ВыделенныекультурыStaphylococcusбиохимической активностью, ферментировалиобладалиspp.и окисляливысокойс выделениемкислоты (без газа) глицерин, глюкозу, мальтозу, лактозу, сахарозу, маннит.Приисследованиибиологическихсвойстввыделенныхштаммовмикроорганизмов семейства Enterobacteriaceae было выявлено, что все ониобладали определенным набором факторов патогенности.
У большинстварегистрировали гемолитическуюактивность, наличие ДНК-азы и ферменталецитовителазы.Условно-патогенные энтеробактерии рода Kiebsiella в последние годыпривлекаютвниманиебиологическойиисследователей,экологическойтаккак,пластичностью,обладаяонивыраженноймогутприобретатьвозможность длительного существования в организме человека и являтьсяпричиной развития различных заболеваний [154].
В качестве одного из основанийэтого явления рассматривают изменение патогенности этих микроорганизмов[75].Установлено, что изменение патогенности у бактерий реализуется нагенетическом уровне через мутации и генетические рекомбинации [154].Наиболеепатогенныхсущественнымиэнтеробактерий,дляввидуизмененияпатогенности«скачкообразного»условно-характераикардинальности происходящих превращений микроорганизма, рассматриваютгенетические рекомбинации, которые определяют геномную пластичностьEnterobacteriaceae, реализуемую через несколько конкретных механизмов,связанных, в частности, с «островами» и «островками» патогенности [75].Нами было обнаружено, по меньшей мере, 78 серотипов (К антиген,капсульный) для K.
pneumoniae. Несколько серотипов (включая преобладающиеК1 и К2) обладают уникальным гиперслизистым (гипервирулентным) фенотипомвследствие повышенной продукции капсульного полисахарида (КПС), который252считается главным фактором вирулентности K. pneumoniae и определется поналичию гиперслизистых колоний на чашке Петри. Степень слизистостиположительно коррелирует с инвазивностью инфекционного агента. Однако связьгипервирулентных штаммов с гиперпродукцией капсулы остается под вопросом,поскольку повышенное содержание полисахаридов может быть следствиемвключения полисахаридов из внешней среды, а не полисахаридов «истинногопроисхождения».Гипервирулентные штаммы K.
pneumoniae являются высоко инвазивнымиимогутпоражатьдажездоровыхиндивидов,приводякразвитиювнутрибольничных жизнеугрожающих инфекций, таких как пиогенный абсцесспечени,менингит, некротизирующийфасциит,эндофтальмититяжелаяпневмония. В частности, K1/K2-вызванный абсцесс печени часто осложняетсяметастатическимраспространениеминфекции.Этаособенностьявляетсяхарактерной для гиперслизистых штаммов K. pneumoniae и не присуща другимграмнегативным бактериям.На данный момент не опубликовано полноценного обзора патогенеза K.pneumoniae на молекулярном уровне.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
