Диссертация (1139480), страница 21
Текст из файла (страница 21)
Они выявлялись в очагах скоплениялимфоцитов особенно на границе эпителия и подлежащей ткани (рисунок 29).CD8 позитивные лимфоциты располагались как интраэпителиально, так и всобственнойпластинкеслизистойоболочкидеснысредиклетоквоспалительного инфильтрата. При этом в участках выраженной деструкцииэпителиального пласта наблюдалось снижение интенсивности инфильтрацииCD8+ лимфоцитами (рисунок 30).
На фоне диффузного распределения CD20позитивных лимфоцитов в плотном мононуклеарном воспалительноминфильтратеопределялисьскопленияCD20позитивныхклеток,напоминающие лимфоидные фолликулы (рисунок 31).При иммунофенотипировании клеток воспалительного инфильтратабылопроанализированосостояниепопуляцииклетоксистемымононуклеарных фагоцитов. Макрофаги воспалительного инфильтратахарактеризовались экспрессией CD68 и обнаруживались в собственнойпластинке слизистой оболочки десны. Метка к антителам CD68 выявлялась ввидеслабо-коричневогомелкогранулярногоокрашиванияцитоплазмыкрупных мононуклеарных клеток воспалительного инфильтрата (рисунок 32).135Таблица45-Морфологическая,морфометрическаяииммуногистохимическая характеристика слизистой оболочки десны больныхпародонтитом до инициации базового курса терапииСтепень инфильтрации компартментов слизистой оболочки деснынейтрофильными лейкоцитамиСлабаяУмереннаяВыраженнаяМорфометрические показатели плотности нейтрофильных лейкоцитов(М±m) в 1 мм2 слизистой оболочки десны34±397±8*135±11*˄Степень инфильтрации компартментов слизистой оболочки деснымононуклеарными клеткамиСлабаяУмереннаяВыраженнаяМорфометрические показатели плотности мононуклеарных клеток (М±m) в1 мм2 слизистой оболочки десны137±11247±14*321±13*˄Иммуногистохимическое исследование субпопуляций лимфоцитов,мононуклеарных фагоцитов в 1 мм2 слизистой оболочки десныCD4+52,36±7,2283,74±8,16*112,24±9,11*˄CD8+25,51±4,0141,98±5,91*52,01±6,12* ˄CD20+26,43±4,1344,25±6,51*58,62±7,71* ˄CD45RO+19,6±3,1234,0±5,84*52,31±6,21* ˄CD68+29,12±3,6441,28±4,77*46,71±6,16*Ki67+ эпителиоциты28,65±3,430,27±4,230,42±4,3P53+ эпителиоциты27,01±4,827,26±6,128,71±5,2* - статистически значимые различия по сравнению с биоптатами деснысослабойстепеньюинфильтрациивоспалительнымиклетками,˄-статистически значимые различия по сравнению с биоптатами десны сумеренной степенью инфильтрации воспалительными клетками, р˂0,05, прииспользовании критерия Крускала-Уоллиса.136CD45ROТлимфоцитылокализовалисьвэпителиальномкомпартменте десны.
При большом увеличении обнаруживалось достаточнобольшое количество интраэпителиальных лимфоцитов памяти (рисунок 33). Впределах собственной пластинки слизистой оболочки десны среди клетоквоспалительного инфильтрата, ближе к границе эпителия, так же выявлялосьбольшое количество CD45RO позитивных лимфоцитов (рисунок 34).В биоптатах слизистой оболочки десны больных пародонтитомэкспрессия Ki-67 выявлялась в эпителиальном компартменте и в клеткахвоспалительного инфильтрата, преимущественно в местах выраженнойинфильтрации (рисунок 35).В биоптатах слизистой оболочки десны с признаками умереннойстепени инфильтрации мононуклеарнымиклетками CD4 позитивныелимфоциты имели тенденцию к периваскулярной локализации (рисунок 36).Популяция CD8 позитивных лимфоцитов также выявлялась в обоихкомпартментах слизистой оболочки десны, отмечался экзоцитоз CD8лимфоцитов в эпителиальный компартмент (рисунок 37).
В собственнойпластинке слизистой оболочки десны в участках максимальной выраженностивоспалительного инфильтрата локализовались CD20+ лимфоциты (рисунок38).Среди клеток воспалительного инфильтрата в собственной пластинкеслизистой оболочки десны диффузно располагались CD68 позитивныемакрофаги (рисунок 39).Отмечалосьдостаточноеколичествоинтраэпителиальнорасположенных клеток воспалительного инфильтрата, экспрессировавшихCD45RО рецепторы (рисунок 40).В собственной пластинке слизистой оболочки десны CD45RО Тлимфоцитылокализовалисьпреимущественнопространстве сосудов (рисунок 41).вэкстравазальном137Экспрессия метки Ki-67 определялась в эпителиальном компартменте ив клетках воспалительного инфильтрата в зонах более выраженнойинфильтрации (рисунок 42).В биоптатах десны с признаками слабой степени инфильтрациимононуклеарными клетками соответственно отмечалось наименьшее ихколичество.
В собственной пластинке слизистой оболочки десны CD4+лимфоциты были диффузно распределены в отдельных полях зрения,преимущественно, вокруг, сосудов, близко прилежащих к эпителию (рисунок43).Единичные CD8+ позитивные лимфоциты локализовались преимущественновэпителии(рисунок44).Взонахвоспалительнойинфильтрацииобнаруживались CD20 позитивные лимфоциты.Единичные CD68 позитивных клетки визуализировались, как правило, впериваскулярных пространствах в собственной пластинке слизистой оболочкидесны.Т - лимфоциты памяти CD45RO+ локализовались в эпителии ипериваскулярных пространствах собственной пластинке слизистой оболочкидесны (рисунок 45).Клетки с меткой Ki 67 выявлялись в зонах, где определялся инфильтрат(рисунок 46).В основе усиления процессов пролиферации в многослойном плоскомэпителии десны лежат процессы усиления темпов клеточного обновления,поддерживаемыеускорениемделенияклеток.Исследованиеуровняэкспрессии маркеров пролиферации (Ki67) и ядерного маркера поврежденияДНК (Р53) в слизистой оболочке десны выявило некоторые закономерности враспределении меченых клеток.
В биоптатах слизистой оболочки десны намиобнаружена высокая экспрессия маркера пролиферации Ki-67 в клеткахмногослойного плоского эпителия как базального, так и супрабазальногослоев, которая носила очаговый характер, с доминированием в акантотическихтяжах (рисунок 47). Ядерная метка Р53 визуализировалась преимущественно138в клетках пролиферативной зоны многослойного плоского эпителия (рисунок48). Наличие достаточного количества эпителиоцитов с меткой Р53свидетельствует об интенсивном повреждении ДНК данных клеток вмногослойном плоском эпителии десны у пациентов до начала лечения.Рисунок 29 - CD4-позитивные лимфоциты в собственной пластинкеслизистой оболочки в биоптате десны больного с «Агрессивным» течениемпародонтита (генотип: IL-1β -511Т; IL-1β +3953С; IL-1RN 2R; TNFα -308А;IL-4 3R/3R) с признаками выраженной степени инфильтрациимононуклеарными клетками до инициации базового курса терапии.Иммуногистохимический метод, докраска ядер гематоксилином, х400.139Рисунок 30 - CD8-лимфоциты в эпителии и собственной пластинке слизистойоболочки в биоптате десны больного с «Агрессивным» течениемпародонтита (генотип: IL-1β -511Т; IL-1β +3953С; IL-1RN 2R; TNFα -308А;IL-4 3R/3R) с признаками выраженной степени инфильтрациимононуклеарными клетками до инициации базового курса терапии.Иммуногистохимический метод, докраска ядер гематоксилином, х200.Рисунок 31 - Локализация CD20-лимфоцитов в собственной пластинкеслизистой оболочки в биоптате десны больного с «Агрессивным» течениемпародонтита (генотип: IL-1β -511Т; IL-1β +3953С; IL-1RN 2R; TNFα -308А;IL-4 3R/3R) с признаками выраженной степени инфильтрациимононуклеарными клетками до инициации базового курса терапии.Иммуногистохимический метод, докраска ядер гематоксилином, х400140Рисунок 32 - CD68 позитивные клетки в собственной пластинке, в базальномслое эпителия и акантотических тяжах слизистой оболочки десны в биоптатедесны больного с «Умеренно прогрессирующим» течением пародонтита(генотип: IL-1β -511Т; IL-1β +3953Т; IL-1RN 4R; TNFα -308А; IL-4 3R/2R) доинициации базового курса терапии.
Иммуногистохимический метод,докраска ядер гематоксилином, х200.Рисунок 33 - Интраэпителиальное расположение CD45RO Т- лимфоцитов вслизистой оболочке десны больного с «Агрессивным» течением пародонтита(генотип: IL-1β -511Т; IL-1β +3953С; IL-1RN 2R; TNFα -308А; IL-4 3R/3R) доинициации базового курса терапии. Иммуногистохимический метод,докраска ядер гематоксилином, х630.141Рисунок 34 - Скопления CD45RO Т- лимфоцитов преимущественно всобственной пластинке слизистой оболочки десны больного с «Медленнопрогрессирующим» течением пародонтита (генотип: IL-1β -511Т; IL-1β+3953С; IL-1RN 4R; TNFα -308G; IL-4 2R/3R) до инициации базового курсатерапии.
Иммуногистохимический метод, докраска ядер гематоксилином,х400.Рисунок 35 - Экспрессия Ki-67 в клетках воспалительного инфильтрата и вэпителиальном компартменте, «микропапилломатоз» слизистой оболочкидесны больного с «Агрессивным» течением пародонтита (генотип: IL-1β 511Т; IL-1β +3953С; IL-1RN 2R; TNFα -308А; IL-4 3R/3R) до инициациибазового курса терапии.
Иммуногистохимический метод, докраска ядергематоксилином, х100.142Рисунок 36 - CD4-лимфоциты в собственной пластинке слизистой оболочки вбиоптате десны больного с «Медленно прогрессирующим» течениемпародонтита (генотип: IL-1β -511Т; IL-1β +3953С; IL-1RN 4R; TNFα -308G;IL-4 2R/3R) с признаками умеренной степени инфильтрациимононуклеарными клетками до инициации базового курса терапии.Иммуногистохимический метод, докраска ядер гематоксилином, х400.Рисунок 37 - CD8-лимфоциты воспалительного инфильтрата в слизистойоболочки в биоптате десны больного с «Медленно прогрессирующим»течением пародонтита (генотип: IL-1β -511Т; IL-1β +3953С; IL-1RN 4R; TNFα-308G; IL-4 2R/3R) с признаками умеренной степени инфильтрациимононуклеарными клетками до инициации базового курса терапии.Иммуногистохимический метод, докраска ядер гематоксилином, х400.143Рисунок 38 - CD20-лимфоциты в собственной пластинке слизистой оболочкив биоптате десны больного с «Медленно прогрессирующим» течениемпародонтита (генотип: IL-1β -511Т; IL-1β +3953С; IL-1RN 4R; TNFα -308G;IL-4 2R/3R) с признаками умеренной степени инфильтрациимононуклеарными клетками до инициации базового курса терапии.Иммуногистохимический метод, докраска ядер гематоксилином, х200Рисунок 39 - CD68 позитивные макрофаги в собственной пластинкеслизистой оболочки и интраэпителиально в биоптате десны больного с«Умеренно прогрессирующим» течением пародонтита (генотип: IL-1β -511Т;IL-1β +3953Т; IL-1RN 4R; TNFα -308А; IL-4 3R/2R) с признаками умереннойстепени инфильтрации мононуклеарными клетками до инициации базовогокурса терапии.
Иммуногистохимический метод, докраска ядергематоксилином, ×200144Рисунок 40 - CD45RO Т- лимфоциты в эпителии слизистой оболочки десны вбиоптате десны больного с «Умеренно прогрессирующим» течениемпародонтита (генотип: IL-1β -511Т; IL-1β +3953Т; IL-1RN 4R; TNFα -308А;IL-4 3R/2R) с признаками умеренной степени инфильтрациимононуклеарными клетками до инициации базового курса терапии.Иммуногистохимический метод, докраска ядер гематоксилином, х400.Рисунок 41 - CD45RO Т- лимфоциты преимущественно в собственнойпластинке слизистой оболочки в биоптате десны больного с «Медленнопрогрессирующим» течением пародонтита (генотип: IL-1β -511Т; IL-1β+3953С; IL-1RN 4R; TNFα -308G; IL-4 2R/3R) с признаками умереннойстепени инфильтрации мононуклеарными клетками до инициации базовогокурса терапии.