А.И. Нетрусов, М.А. Егоров - Практикум по микробиологии (1125598), страница 142
Текст из файла (страница 142)
В качестве защитных орел используют водные растворы различных компонентов (%): 1) сахароза, 10,0 + желатин, 1,0; 2) сахароза, 22„0 + желатин, 11,0 + глутамат натрия, 4,4 + цитрат 476 натрия трехзамешенный, 5,0; 3) сахароза, 22,0 + глутамат натрия, 4,4. Лиофилпзация обеспечивает длительную жизнеспособность культур молочнокислых бактерий. Подбор условий лиофилизации и выбор защитной среды специфичен для разных типов бактерий.
Способ хранения под вазелиновым маслом обеспечивает высокий уровень выживаемости для лактобацилл и не эффекгивен для гомоферментативных лактококков. Использование молочнокнслых бактерий Молочнокислые бактерии уже более 100 лет привлекают к себе возрастающее внимание исследователей. Классические работы Л.Пастера открыли первые страницы в изучении этой важной группы микроорганизмов. Развитие микробиологии резко расширило и усовершенствовало области применения молочнокислых бактерий. На основе их использования возникли крупные промышленные производства. Промышленным источником углеводного компонента при молочнокислом брожении являются меласса, патока, молочная сыворотка.
Многие молочнокислые бактерии изначально присутствуют в молоке и вызывают его спонтанное сквашивание. Молочная кислота в молоке отщепляег кальций от казвина, белок превращается параказеин и выпадает в осадок, что вызывает свертывание молока, образование молочного сгустка. Заквашивание молока представляет собой своеобразный способ консервации этого скоропортящегося продукта. При изпповлении молочных продуктов, таких, как масло, сыр, йогурт, широко используются молочнокислые бактерии.
Изготовление сыра и других продуктов посредством стаораживания молока возникли также как способ консервации молока. При изготовлении сыра первичное молочно- кислое брожение осуществляется гомоферментативными лактококками Х.1асг1з зцЬзр. сгетогй и 1асдз, а затем в процесс включаются термофильные молочнокислые бактерии рода йасгоЬас11дз или микрорганизмы других таксономических групп, например пропионовые. Часто при изготовлении сыров используют молочнокислые бактерии в симбиозе с грибами, плесенями.
Некоторые обменные процессы лактобактерий обусловливают специфические функции, прямо или опосредованно участвующие в процессах созревания сыра: сбраживание лакзозы, восстановление окислительно-восстановительного потенциала сыра, сбраживание цитрата, расщепление казеина, действие ряда протеиназ, пептидаз и аминопептидаз. В результате гицролиза казеина образуются свободные аыинокислотьг, а также пептиды различной молекулярной массы. Таким образом, казеин служит источником незаменимых и ростовых аминокислот, используемых лактококками.
Выявлен ряд бактериоцинов, образуемых молочнокислыми бактериями. Некоторые из них с успехом применяются в пищевой промышленности, а также в медицине. Например, бактериоцин низин впервые был использован в промышленном производстве как консервант в Великобритании около 50 лет назад для сохранения сыров и пресервов. Низин обладает бактерицидным действием на грамположительные микроорганизмы: стрептококки различных серологических групп, стафилококки, пневмококки, микобактерии, споровые аэробные и анаэробные бактерии. Обладая способностью адсорбироваться на поверхности спор чувствительных к нему спорообразующих микроорганизмов, низин нарушает проницаемость мембран, снижает термоустойчивость спор.
Вследствие этого низин способствует сохранению качества продуктов при снижении режимов стерилизации в процессах производства консервов и пресервов. Качество молочнокислых продуктов зависит от способности микроорганизмов, входящих в состав закваски, образовывать вкусовые и ароматические вещества. К ним относятся ацетоин и диацетил. Диацетгп, продуцируемый 1.Ь. Ьи1яиг1сш, отвечает за ямасляныйь аромат и важен в создании вкусовых оттенков кислосливочного масла. В состав закваски для изготовления йогурта входят йх Ьи1яалсцг и Ь.!асгй зцозр. г11исег11асги. Биойогурт получают при сквашивании молока бактериями АЬ. исЫор/и!из и Ягергососсш 477 1ЬегаюрЬ11из.
Известен ряд кисломолочных продуктов, полученных в результате смешанного молочнокислого и спиртового брожения. Например, при приготовлении кесбира используют кефирные зерна — комплексную закваску на основе 1.. 1асгй. хибар. 1асг!з, ьЬ. Ьи1яапсш и дрожжей, сбраживаюших лактозу. Известны национальные напитки, такие, как мапуи, лсгбен, приготовленные на коровьем молоке. Широкую известность как лечебного напитка для лечения туберкулеза, заболеваний желудочно-кишечного тракта и сердечно-сосудистой системы получил кумыс. Готовят кумыс из кобыльего молока, близкого по составу женскому, посредством сквашивания его лактобациллами и оассЬаготусез 1аспк Лечебное назначение зависит от крепости кумыса и содержания в нем спирта, что определяется длительностью процесса брожения.
Из верблюжьего молока подобным образом готовят исубаол Осознание роли, которую играют микроорганизмы в производстве продуктов питания, привело к развитию особой ветви микробиологии — технической микробиологии пищевых продуктов. С помощью молочнокислых бактерий ьЬ. саке!, !.Ь. с(е1ЬгиЫ; 7.Ь. 1е)сЬетаай и лр. в промышленности получают молочную кислоту. Преимущество микробиологического способа получения молочной кислоты перед дорогостоящим и технически сложным химическим состоит в возможности направленного синтеза определенного изомера кислоты (наприл1ер, 1.-формы).
,1(екстрсип пролуцируемый некоторыми видами лейконостоков, например реисопожос тезеагегои!ез, нашел широкое применение в пищевой и медицинской промышленности. Это один из первых плазмозаменителей крови, на его основе получены (Ьерригликссн, реогликии и другие препараты, используемые прп различных патологических состояниях людей. Сульфатированные декстраны применяют как антикоагулянты крови при сердечно-сосудистых заболеваниях. Се(бадексы — нерастворимые сшитые декстраны, широко применяются в технике разделения полимерных веществ.
Огромна роль молочнокислых бактерий в мясной промьпцленности. Попадая извне, они могуг вызвать различные виды порчи мяса и мясных продуктов, но при целенаправленном применении стартовые культуры (наиболее используемые бактерии родов Рес(гососсиз и ьасгососсиз) при размножении в фарше вытесняют сопутствующую микрофлору и благоприятно влияют на консистенцию мясного фарша, способствуют сохранению цвета колбасных изделий, созданию их аромата. Подобную роль выполняют молочнокислые бактерии, например ).Ь. р!алгаипт, 1.Ь. согуасуогстз и др.
в хлебопечении. Лактобактерии с успехом применяют в рыбной, спиртовой промышленностях, при приготовлении кислых спиртных напитков (кваса, белого пива), при консервировании овощей, квашении капусты. Одна из основных задач техники силосования кормов состоит в создании благоприятных условий для жизнедеятельности молочнокислых бактерий, обитающих на растениях, и подавления сопутствующей вредной микрофлоры.
Глава 45 ВЫДЕЛЕНИЕ УГЛЕВОДОРОДОКИСЛЯЮЩИХ МИКРООРГАНИЗМОВ Среди различных видов техногенных нарушений природы одним из наиболее серьезных н трудно устраняемых является нефтезагрязнение. Микроорганизмы, способные использовать нефть, распространены оченыггироко и лгогут быть выделены из любой полевой, лесной или луговой почвы. Кроме того, способность использовать нефть в качестве источника энергии присуща не единичным специализированным формам, а многим группам микроорганизмов углеводородокисдяющих (УВОМ). В их числе бактерии из родов Ас1пегоЬасгег, 478 Апыгобас!ег, Вас!!!из, Суюрйаца, С!охптг!!вт, Согуыебас!сг!ит, НагоБас!епит, й1е!йаыойас!епит, Мкпкоссиз, МусоЬас!епат, Мосап!!а, Яйог!ососсш, Рзеиг!отоыаз, )апо, мицелиальные грибы родов Азрегя!!!из, Рел!а!!шт, !ыисюг, Баапит, Тпс!ыл!епыа, дрожжи — СаысЫа, ЕысХотусаг, Июг!оюп<!а, ЯассЬап>тусез, Топ~!ории. 45Л.
ПОЛУЧЕНИЕ НАКОПИТЕЛЬНОЙ КУЛЬТУРЫ УВОМ Накопительные культуры получают следукнцим образом: почвенную суспензию в соотношении 1:100 (1 г почвы вносят в 99 мл стерильной жидкой среды) переносят в колбы объемом 250 мл, добавляют стерильную нефть, керосин, дизельное топливо или соляровое масло, культивируют на качалке при 190 — 220 об/мин в течение 5 — 10 сут.
Среда содержит (г/л): )ЧаХОз — З,О; КгНРО4' ЗН20 — 1,0; МПВО~ 7НзΠ— 0,5; КС1 — 0,5; Ре50~ 7НзΠ— 0,01; вода водопроводная. Стерилизуют при 1 ати, рН после стерилизации б,5 — 7,0. Стерильную нефть и ес легкие фракции вносят в стерильные среды в количестве 1 % (по объему).
Нефть, керосин, дизельное топливо и соляровое масло в лабораторных условиях стерилизуют в пенициллиновых флакончиках, закрытых резиновыми пробками с тефлоновым покрытием, закрепленными металлическими колпачками, в автоклаве при 1 ати. Рост оценивают визуально по степени изменения эмульсии в сравнении с контролем, микроскопированием и по изменению белка биомассы. 45.2. ПОЛУЧЕНИЕ ЧИСТОЙ КУЛЬТУРЫ УВОМ Чистые культуры получают рассевом на минеральные агаризованные среды (содержание агара — 1,7 %), на поверхность которых наносят стерильную нефть или ее фракции. Готовят разведения накопительной культуры, чтобы получить изолированные колонии после инкубации колоний на чашке.
В качестве исходной суспензия используют 1 мл накопительной культуры в 100 мл стерильной среды. Наносят 0,1 мл разведенной культуры па поверхность среды в чашках Петри и затем равномерно распределяют шпателем по чашке, стараясь покрыть всю се поверхность. Чашки инкубируют при комнатной температуре (18 — 22 'С). Выросшие изолированные колонии отсевают петлей на поверхность скошенной плотной минеральной среды с углеводородами, в пробирки или на агаризованные среды в чашках Петри.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
