А.И. Нетрусов, М.А. Егоров - Практикум по микробиологии (1125598), страница 144
Текст из файла (страница 144)
Индекс — величина, обратная титру. К СПМ относятся представллтели разных систематллческих групп бактерий. Наиболее важными СПМ во всем мире считаются бактерии группы кишечной палочки (БГКП). Под этим общим понятием объединяют бактерии семейства Епгегобасгепасаае родов Ехсбепсб(а, С(угобатег, Еп(егобаслег, 1(1ебз(е11а. К категории БГКП относят грамотрицательные, не образующие спор и не обладающие оксидазной активностью палочки, сбраживаюлцие лактозу и глюкозу до кислоты и газа при 37'С в течение 24 ч. Эти бактерии вьщеляются в окружающую срелу только с фекалиями человека и тегшокровных животных. Среди БГКП выделяют также колиформные палочки, которые сбраживают только лактозу при 37 С с образованием кислоты и газа, и фекальные кишечные палочки (ФКП), сбраживаюшие лактозу при 44,5 'С.
Из фекальных кишечных палочек к Е.со1(относятся только бактерии, не способные расти на среде, содержащей в качестве единственного источника углерода и энергии цитрат. Эти бактерии являются показателями свежего фекального загрязнения. Бактерии рода Рлгегососсиз также являются постоянными обитателями кишечника человека. Энтерококки отмирают во внешней среде значительно раньше, чем Е. со16 поэтому они всегда свицетельствуют о свежем фекальном загрязнении. Большое санитарное значение имеют представители рода Ргогеик Р. г11яаг1з свидетельствует о загрязнении объекта органическими вегцествами (его чаше обнаруживают в гниющих остатках), а Р. т(габ11о — о фекальном загрязнении (его чаще обнаруживают в Фекалиях). Обнаружение протеев в пищевых пролуктах свидетельствует о гнилостном распаде.
Таблица 46.1 Санитарно-показательные микроорганизмы окружающей среды и нивгевых продуктов (по Л.Б.Борисов> и др., 1993) Объект Характер загрязнения Фекальное ( Вода Фекальное ~ Почва Фекальное Орально-капельное згар1лу(ососсиз аигеиз Х аигеиз 51 руолепкл Пищевые пролукты Вода, почва, воздух Промышленно-бытовое (разлагающиеся отбросы) Орально-капельное Промышленное Сашлтарно-показатыльиые микроорганизмы Бактерии группы кишечных палочек Е, со11, С(ггобасгег Ггеипг(11, Епгегобасгег аеголепея, 51тргососсиз (аеса11з Те же бактерии и клострилии ( С(охгг(ьл(ит регУпщепз„С1 хропяенез и др.) Термофильные бактерии (Еасгобас11блз 1ас11Б Еггергососсиз гбегтор)б(из и др.), Ргогеиз ии(яаг(з Бактерии группы кишечных палочек, Еггергососсиз)аеса(1)л Р.
ги(рта Производственные ппаммы микроорганизмов Обнаружение С!оагЫ(иш регулллелз свидетельствует о некогда имевшем место фекальном загрязнении (эти бактерии образуют споры, что позволяет им длительно сохраняться в окружающей среде). В отечественной практике количественный учет клострилий предусмотрен при исследованиях почвы, лечебных грязей, воды открытых водоемов.
Определение этого микроорганизма проводят и в некоторых пищевых продуктах, но уже как возможного возбудителя пищевых отравлений. Термофильные микроорганизмы, имеющие санитарное значение, представлены преимущественно спорообразующими бактериями, способными размножаться при 50— 60 С. Их выделяют нз объектов внешней среды (загрязненных компостом или навозом), реже из кишечника человека и животных. В отечественной практике этот показатель применяют при исследовании почвы. Резкое увеличение количества этих бактерий в почве может свидетельствовать о загрязнении разлагающимися отбросами. Анализ на содержание термофилов проводят также при исследовании консервов для инликации эффективности автоклавирования. Обнаружение в объектах окружающей среды бактерий рода 5аплалейа всегда свидетельствует о фекальном загрязнении. Эти микроорганизмы являются наиболее распространенными возбудителями острых кишечных заболеваний и поэтому могут быть индикаторами возможного присутствия других возбудителей инфекций с аналогичными патогенезом и эпидемиологией.
ЯарЬуйсоссиз аигеиз — факультативный обитатель носоглотки, зева и кожных покровов человека. Присутствие этого микроорганизма в воздухе помещений или на находящихся там предметах указывает на орально-канальное загрязнение. Наличие Яарлу(всосав иигеиз в пищевых продуктах может привести к тяжелым пищевым интоксикациям. Гемолитические стрептококки, являясь зранзитными обитателями носоглотки и зева, выделяются с капельками слизи орально-капельным путем. Сроки их выживания во внешней среде аналогичны таковым для большинства других возбудителей воздушнокапельных инфекций.
Следовательно, обнаружение этих бактерий в воздухе помещегпий свидетельствует о возможном загрязнении патогенами. Санитарно-показательное значение имеют также бактериофаги. Они, как правило, сопутствуют тем бактериям, к которым адаптированы, однако бактериофаги могут длительно сохраняться и переживать соответствующих бактерий.
Это, тем не менгса, не исключает возможности использовать бактериофаги кишечных бактерий для гигиенической оценки внешней среды. На результап1 санитарно-микробиологических анализов могут повлиять различные факторы, поэтому при проведении таких исследований необходимо соблюдать следующие принципы: правильный отбор проб; серийность проводимых анализов; применение только стандартных и унифицированных методов исследования; использование комплекса тестов (прямых и косвенных); проведение оценки объектов по совокупности полученных результатов (с учетом результатов, полученных с помощью органолептических, химических, физических и других методов).
Приводимые ниже задачи (1 — 6) непосредственно знакомят студентов с методами санитарной микробиологии. Лчълабъ.ь: г бш ч л проведении санитарно-микробиологических анадизов воды, воздуха, почвы, предметов обихода и пищевых продуктов. ЗАДАЧА 4. САНИТАРНО-МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВОДЫ Вода водоемов содержит большое количество "микроорганизмов, относящихся к автохтонной микрофлоре, а также попадающих в нее с осадками, 484 сточными водами и другими загрязнениями — аллохтонных микроорганизмов.
Количество и видовой состав микрофлоры воды в значительной степени зависят от условий среды (наличие питательных веществ, температура, аэрапия, окислительно-восстановительные условия, рН и др., а также вещества, гюступающие в водоем). Основным путем микробного загрязнения водоемов является попадание неочищенных бытовых и промышленных отходов и сточных вод.
Микрофлора сточных вод содержит обитателей кишечника человека и животных, включая представителей нормальной и условно-патогенной флоры. Патогенные бактерии слабо приспособлены к существованию в воде, где на них оказывают неблагоприятное воздействие солнечный свет и различные другие факторы, включая конкурентную водную микрофлору, тем нс менее многие из них могут сохраняться в воде достаточно долго. Микробиологические методы исследования воды сводятся к определению общего количества микроорганизмов в 1 мл воды и выявлению патогенных микроорганизмов (сальмонелл, холерных вибрионов, лептоспир, щигелл и энтеровирусов).
Последний анализ проводится по эпидемическим показаниям. Кроме того„поскольку прямое выделение патогенных бакгерий из волы требует специальных исследований, существуют косвенные методы, позволяющие дать количественную оценку степени фекального загрязнения воды (выявление БГКП, Е. соП, энтерококков, стафилококков). Исследованию подлежит вода: централизованного водоснабжения, колодцев, открытых водоемов, плавательных бассейнов, сточные жидкости.
Жю Ра~~и: Р цгпЧ р -б воды, включающую 1) определение лгикробного числа водопроводной воды и воды открытых водоемов, 2) определение коли-титра и коли-индекса воды. Ход выполнения задачи Подготовка сред и материалов. Подготовить к стерилизации (в расчете на одного студента): чашки Петри — 10 штб пробирки — 10; пипетки на 1 — 2 мл— 10; на 5 — 10 мл — 3; бутылка или флакон (объем 500 мл) — 1 — 2 шт.
Приготовить (состав и приготовление сред — см. в прил. 4): 0,85%-й раствор )чаС1 стерильный (или вода водопроводная стерильная) — 150 — 200 мл; МПА стерильный — 150 мл; полужидкая среда с глюкозой — 30 мл (разлить в 3 пробирки гю 7 — 1О мл); среда Эндо — 50 мл (сразу после приготовления разлить в 2 — 3 стерильных чашки Петри, дать застыть, завернуть чашки в бумагу и оставить в холодильнике); среда КОДА или среда Кесслера — 33 мл концентрированной (и 10) среды (разлить по 10 мл в 3 колбы на 150 — 250 мл и по 1 мл в 3 обычные пробирки), в каждую колбу и пробирку поместить по поплавку или комочку ваты; б0 мл среды КОДЛ или Кесслера нормальной концентрации (разлить по 10 мл в 6 обычных пробирок), в каждую пробирку поместить по поплавку или комочку ваты. Отбор проб воды. Воду для санитарно-бактериологического исследования отбирают в количестве 500 мл в бутылки или флаконы, предварительно простерилизованные в бумажных пакетах, с ватно-марлевой пробкой.
К горлышку бутылки привязывают пакетик с завернутой в него запасной пробкой. Пробы воды из открьпых водоемов, бассейнов, баков и т.п. отбирают с глубины 10 — 15 см, а при малой глубине — не менее 1Π— 15 см от дна. Пробы 435 из проруби берут на глубине 10 — 15 см от нижней поверхности льда. Пробы воды из желаемого водного горизонта открытых водоемов (колодцев, бассейнов, озер, рек и пр.) отбирают с помощью батометров (рис.
46.1), После наполнения бутылки водой с заданной глубины ее извлекают из батометра и закрывают стерильной пробкой, сверху надевают бумажный колпачок. Из водопроводных кранов воду отбирают следующим образом. Кран протирают тампоном, смоченным в спирте, и обжигают, после чего 10 — 15 мин спускают воду. Затем отбирают приблизительно 400 мл воды. Заполненный флакон плотно закрывают стерильной резиновой или корковой пробкой, а сверху надевают бумажный колпачок.
При проведении анализа хлорированной воды во флакон для отбора проб (емкость 500 мл) перед стерилизацией вносят дехлоратор — 10 мг гипосульфита натрия. Бактериологическое исследование отобранных проб воды должно производиться не позднее 2 ч с момента отбора. В случае невозможности соблюдения этих сроков допускается проведение анализа воды не позднее чем через 6 ч при хранении пробы при температуре от 1 Рис.
46.1. Батометр до 6 С (прибор для взятия Определение микробного числа воды. С флаконов, солроб иоды) держащих пробу волы, снимают бумажные колпачки, вынимают пробки, горльппки фламбируют. Воду тщательно перемешивают осторожным продуванием воздуха через стерильную пипетку. Из каждой пробы делают посев не менее двух различных объемов, отобранных с таким расчетом, чтобы число выросших на чашках колоний колебалось от 30 до 300 (табл. 46.2). Для посева О,1 мл и меныпих объемов исследуемую воду разводят стерильной водой. Готовят последовательно десятикратные разведения, используя для каждого разведения стерильную пипетку. По 1 мл каждого разведения вносят в две стерильные чашки Петри, после чего их заливают 1Π— 15 мл расплавленного и остуженного до 45 — 50 'С МПА, который тщательно, круговыми движениями перемешивают.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
