Дж. Уилсон, Т. Хант - Молекулярная биология клетки - Сборник задач (1120987), страница 108
Текст из файла (страница 108)
Неправильно. Апикальные и базолатеральные белки могут иметь разные сортируюшие сигналы, направляющие их к определенным областям мембраны, но может быть и так, что лишь один путь требует сортирующего сигнала, а другой реализуется и без такого механизма. Д. Правильно. Е. Правильно. 8-41 Медленная стадия конститутивной секреции трансферрина осуществляется в ЭР. Медленная стадия конститутивной секреции альбумина протекает в аппарате Гольджи. Из рис. 8-20 ясно видно, что большая часть трансферрина в клетке находится в ЭР, а большая часть альбумина — в аппарате Гольджи.
Характер стационарного распределения белков при конститутивной секреции указывает на то, что разные белки большую часть своего времени жизни находятся в клетке в разных компартментах. Как и в любой последовательности реакций накопление белка происходит на медленном этапе процесса. Следовательно, по локализации большей части материала можно определить местоположение этого этапа. Конститутивная секреция трансферрина идет медленнее, чем секреция альбумина, потому что первый задерживается в ЭР. Этот результат, по-видимому, отражает общий принцип: если консти- 382 Глава 8 тутивная секреция какого-либо белка идет медленно, то этот белок по какой-то причине задерживается в ЭР.
Литература: ЬоИПЬ, Н.Р., Коид, Л'., Яп!Аег, М., хггоиз, 6. КА.М. Нераготз зесгегогу ргогешз ш!8гаге Ггош гоп8Ь епдор1азш!с гейсп!шп го Оо!81 з! сЬагасзепзйс гязсз. Хаозге 304: 80 — 83, 1983. Ргуез, К, СизгиГагоп, Г... Регегзоп, Р. А. Гонг зесгезогу ргоибпз зупйеяшд Ъу Ьерагосугез аге !гапзрогге6 Ггош йе епгГор!азппс гебсп!шп го Оо!8! сошр!ех аг зГ!ГГегепг га!ез. ЕМВО 3. 3:147 — 152, 1984. путь с использованием сигнала для одной области плазматической мембраны, и движение по остаточному принципу для другого участка, то чужеродный белок должен был бы идти по тому ипи другому пути.
Поскольку чужеродные белки, по-видимому, не содержат сигнала для специфической сортировки, они, вероятнее всего, должны следовать по второму, неспсцнфическому пути. Высвобождение секретируемых белков в равных количествах из апикальной и из базолатеральной частей поляризованных клеток не согласуется с упрощенным представлением о предполагаемом механизме сортировки.
Таким образом, гипотеза раздельного существования рецепторного и неспецнфического путей в настоящем ее виде, судя по всему, не верна, Как следует из этих экспериментов, каким бы ни был механизм, по которому чужеродные белки переносятся через мембрану, он никак не связан с тем, через какую часть клеточной поверхности происходит их перенос. Литературы КоиАог-КоеЬ, С., Вгиео, Я., Ридег, 5.ГГ., Сшгег, ГГ., СагоЯ, Н. Рго!е!п яесгебоп 1и йе ро!апге6 ерЬЬе1!а1 сей йпе МВСК. Сей 43:297-306, !985. боггГгеЬ, Т.А., ВеаиАгу, б., и!ггеГо, !., Соьпаи, А., ЯМА!ег, М.У., ААезиГК М., ЯаЬагеи0 0.0. Яесгеноп оГ епбохепопз апгГ ехохепопз рго!е!пя Ггогп ро1апге6 МОСК гпопо!ауегз. Ргос.
Маг!. Асай 8сй ВЯЛ 83:2100 2104, 1986, Везикулирный транспорт и сохранение индивидуальности компартментов 8-43 А. Б. клатрин не покрытые клатрином А. Б. Правильно. Правильно. Ваши эксперименты показывают, что везикулы, не покрытые клатрином, переносят О-белок, ие концентрируя его. Концентрация О-белка во внутреннем пространстве цистерн на самом деле даже несколько выше, чем в зрелых и отпочковывающихся везикулах, как показали измерения, проведенные двумя различными методами, Если бы везикулы транспортировали О-белок по селективному пути !подобно везикулам, покрытым клатрином), то концентрация О-белка в них была бы существенно выше, чем в цистернах аппарата Гольджн.
Лзггератураз Ого!, С., Спец В. К, яоглтап, д Гх А пезг гуре оГ соаге6 геясп!зг сагпег йаз арреагз поГ Го сопза|П С!аГЬпп: !и розные го!е ш ргогеГп ггапзрогз поГЫп ГЬе По!81 з!ас1с Се!1 46: 171 — 184, 1986, 8-42 А. Если бы механизм сортировки в поляризованных клетках включал Клеточное ядро ДНК и белки, входящие в состав хромосом 9-1 А.
хромосома; геном Б. точка начала реплнкации; центромера; теломеры В. ген Г. экзоны; ннтроны Д. белки-регуляторы Е. метод торможения в геле Ж. «цинковые пальцы» 3. спираль — виток-спираль И. кооперативное К. В-форма; А-форма; У-форма Л. нуклеосомы М. гистоны; негистоновые хромосомные белки; хроматин Н. нуклеосомные„Н1 О, сверхчувствительные к нуклеазе сайты П. хроматин диаметром 30 нм 9-2 А.
Правильно. Б. Неправильно. Хромосомы нс реплицируются с абсолютной точностью-при каждой реплнкации утрачиваются концевые нуклеотиды. Теломера необходима для того, чтобы при каждой репликацни потери нуклеотидов происходили только в области самой теломеры.
Специальный фермент периодически надстранвает простую повторяющуюся последовательность, которая образует теломеру, н таким образом компенсирует неизбежную потерю нуклеотидов прн репликации линейной хромосомы. В. Правильно, Г. Неправильно. По размерам ннтроны действительно обычно превосходят экзоны, но по количеству экзонов на один больше в каждом гене. Д. Правильно. Е. Правильно. Ж. Правильно. 3.
Неправильно. Хотя для хорошо изученных ДНК-связывающих белков это и справедливо, однако представляется маловероятным, чтобы каждая из этих полезных структур встречалась только у бактерий или только у эукариот. Существование гомологнчных аминокислотных последовательностей позволяет предполагать, что структура спираль-виток — спираль имеется н в некоторых эукариотическнх ДНК-связывающих белках.
И. Правильно. 384 Глава 9 Вр~р Геломере во~и З Геломере Ряс. 9-32. Паливдромяая структу- ра рибосомной мини-хромосомы из Тесла)ту»те»р (ответ 9-3). Повтор Повтор К Л М Н О П Р С Т Неправильно. Если два белка связываются с частично перекры- вающимися последовательностями ДНК, связывание одного ю них будет препятствовать связыванию другого. Поскольку свя. зыванне одного белка исключает связывание другого, то их свя- зывание будет не кооперативным, а конкурентным. Правильно. Неправильно. Особые последовательности дают возможность ДНК скручиваться в спираль, когда нет взаимодействия с белками.
Внутри клеток же большинство последовательностей ДНК скру- чнваются в тугую спираль за счет связывания с белками типа гистонов, как это происходит, например, при образовании нук- леосом. Правильно. Правильно. Правильно. Неправильно. В коротких линкерных участках ДНК между нук- леосомами не обнаружено сайгон, сверхчувствительных к нуклеазе. Такие сайты чаще встречаются в длинных последовательностях ДНК, лишенных нуклеосом.
Правильно. Неправильно. На электронных фотомнкрографиях расправленного хроматина обычно наблюдаются регулярно расположенные нук- леосомные «бусины», присутствующие как в транскрибируемых, так и в нетранскрибируемых областях. Сумма величин рестрикционных фрагментов не равна 21 т.п.н., и электрофоретнчесиая картина меняется в зависимости от денатурации и ренатурапии потому, что рибосомная мини-хромосома представляет собой инвертированный днмер, илн палиндром (рис. 9-32).
Это означает, что последовательности, расположенные в левой половине мини-хромосомы, повторяются в противоположной ориентации в ее правой половине. Таким образом, рестриктаза разрезает каждое плечо (т.е. повторяющийся сегмент) в сайтах„ равно удаленных от концов,при этом получаются один центральный фрагмент и две одинаковые копии концевого фрагмента.
В случае обработки В81П центральный фрагмент содержит 13,4 т.п.н., а два концевых фрагмента — по 3,8 т.п.н. Сумма длин рестрикционных фрагментов не равна 21 т.п.н., поскольку концевые фрагменты надо считать дважцы: 2 фрагмента по 3,8 т. п.н. плюс 13,4 т.п.н. равно 21 т.п.н. Денатурация и ренатурация мини-хромосомы илн продуктов ее расщепления рестрнктазамн вызывают изменение электрофоретической картины, поскольку левая и правая половины одноцепочечных молекул, образовавшихся из центрального фрагмента, комплементарны и, следовательно, могут гибридизоваться сами на себя. Благодаря тому что две комплементарные половины входят в состав одной и той же молекулы, они гнбридизуются друг с другом намного быстрее, чем с другими молекулами.
Гибридизация «сама на себя» приводит к тому, что наблюдаемый размер молекулы уменьшается в 2 раза. Таким образом, не разрезанная рестриктазой хромосома после денатурации и ренатурацин уменьшается в размере с 2! до 10,5 т.п. н. Аналогичным Клеточное ядро 386 л-1428 образом центральный рсстрикт ВВП1 размером 13,4 т. п. н. уменьшается до 6,7 т.п.н. Одноцепочечные участки концевых фрагмен.гов некомплементарны друг другу и, естественно, могут ренатурировать лишь с другими комплементарными им цепями, восстанавливая при этом свою обычную двухцепочечную структуру. Наиболее неожиданными выглядят данные о том, что рнбосомные гены Те!та!!углева входят в состав хромосомы микронуклеуса в виде одной половины инвертированного повтора, образующего мини-хромосому в макронуклеусе.
Следовательно, когда после конъюгации из мнкронуклеуса образуется новый макронуклеус, рибосомные гены должны выщепиться из хромосомы таким образом, чтобы образовался именно инвертированный димер. Постарайтесь представить себе, как это происходит, а потом познакомьтесь с точкой зрения авторов одной из работ на эту тему (Уао, М-Сх 4.Ьц, Б-О,; т'ао, С-Н. Мо!. Се!!. Вю!. 5, 1260, 1985).
Лятература: Каггег, К.Мс баГГ, Х С. ТЬе гпасгоппс1еаг г(Ьоеогпа! ГзучА оГ Теггаьутепи ругГТопяй Ге а ра1!пс(гогпс. 3. Мо!. В(о1. 104421 — 453, 1976. 9-4 А. Рестрикцнонный анюшз плазмиды показывает, что она представ лает собой линейную молекулу. Если бы молекула была коль- девой, то после обработки рестрнктазами, расщепляющими плазмиду в единственном сайте, должна была получаться одна полоса, соответствующая длине 12 т.п.и. в каждом случае, чего на самом деле не наблюдается. С другой стороны, после разрезания линейной молекулы в одном месте должны получиться две полосы, дающие в сумме 12 т.и.