Диссертация (Изменение клинических и иммунологических характеристик у больных с генерализованной формой миастении на фоне применения плазмафереза и озонотерапии), страница 6

При этом, в изучениипатологическогопроцессаоченьважночёткоепониманиеименноиммунопатологического и аутоиммунного механизмов в развитии этого тяжёлогоинвалидизирующего заболевания нервной системы, коим является рассеянныйсклероз. Изучению этих вопросов и посвящено настоящее исследование, цельюкоторого явилось выделение маркёров иммунного статуса, верифицирующихдисбаланс иммунной системы у больных с различными клиническими формами истадиями течения рассеянного склероза, а так же корреляции маркёровдисбаланса иммунной системы с особенностями течения различных клиническихформ и стадий у больных с этой нозологической формой.31ГЛАВА 2.

КЛИНИЧЕСКИЕ, ИНСТРУМЕНТАЛЬНЫЕ И ЛАБОРАТОРНЫЕИССЛЕДОВАНИЯ БОЛЬНЫХ С РАЗЛИЧНЫМИ КЛИНИЧЕСКИМИФОРМАМИ ТЕЧЕНИЯ РАССЕЯННОГО СКЛЕРОЗА2.1. Клиническая характеристика больных с различными клиническимиформами рассеянного склерозаСогласно современнойклассификации клинических форм течениярассеянного склероза, 170 больных, принявших участие в исследовании, былиразделены на 3 клинические группы:1 клиническая группа – 30 пациентов с первично-прогрессирующей формойклинического течения заболевания2 клиническая группа – 40 пациентов с вторично-прогрессирующей формойклинического течения РС3 клиническая группа – 100 больных с клинической формой течения РС,которые были разделены на 2 подгруппы: подгруппа А (50 больных) сремитирующей клинической формой РС в стадии обострения, подгруппа Б (50пациентов) с ремитирующей клинической формой РС в стадии ремиссии.4группусоставилиздоровыедонорывколичестве30человексоответствующей возрастной категории.Клиническое исследование неврологического статуса больных рассеяннымсклерозом выполнялось в соответствии с современными диагностическимикритериями [36, 46, 75].

Проводилась оценка функциональных систем организмаи рассчитывался балл по расширенной шкале инвалидизации по Куртцке (шкалаEDSS) (Приложение 1).Оценка неврологического статуса проводилась по шкале Scripps (Приложение 2).Согласносовременнымтребованиямкдиагностикедостоверногорассеянного склероза использовались широко распространенные в мировойпрактике новые диагностические критерии рассеянного склероза по МакДональду (Приложение 3) [113].322.2. Инструментальные методы исследования больных с различнымиклиническими формами рассеянного склерозаВсембольным для постановки диагноза «достоверный» рассеянныйсклероз было проведено исследование с помощью магнитно-резонанснойтомографии (МРТ) [80, 81] для верификации диссеминации очагов в структурахголовного мозга (рис.

2.1-2.8).Проводилось МРТ исследование головного мозга в режиме TSE (ТурбоСпин-Эхо) с получением Т2-ВИ (ТЕ/TR = 210/3200) в аксиальной и сагиттальнойплоскостях (толщина среза – 8 мм, шаг томографа – 0 мм; FOV=357; MTR = 256).При этом на аксиальных и сагиттальных срезах для больных РС характерноналичие очагов гиперинтенсивного МР-сигнала неправильной округлой формыдиаметром от 6 до 8 мм с относительно четкими контурами и локализующимисяпаравентрикулярно в правой и левой гемисферах (на уровне передних и заднихрогов боковых желудочков).

Боковые желудочки как правило, несколькорасширены, с заметным паравентрикулярным отеком. На аксиальных срезахопределяется слабовыраженная узурация мозолистого тела в средней его трети.Рис. 2.1. На уровне передних роговопределяются очаги гиперинтенсивногоМР сигнала, неправильной округлойформы, диаметром до 8 ммРис. 2.2. Отмечается узурациямозолистого тела в средней трети33Рис. 2.3. Очаг гиперинтенсивного МРсигнала диаметром до 8ммРис. 2.4. Узурация мозолистого телаРис. 2.5. Узурация мозолистого телаРис.

2.6. На уровне переднего рогаотмечается очаг гиперинтенсивного МРсигнала34Рис. 2.7. Паравентрикулярно на уровнезадних рогов очаги гиперинтенсивногоМР сигналаРис. 2.8. Асимметричное расширениебоковых желудочковНа рис. 2.9-2.18 приведены клинические примеры.Клинический пример 1. Больная О. Обследование 11.08.2006 г. На фонемножественных очагов демиелинизации головного мозга один крупный очаг слокализацией в левом полушарии (рис. 2.9)Рис. 2.9. Больная О.,15.03.94 – года рождения35Клинический пример 2. Больной П. Обследование 11.08.2006 г. Очагидемиелинизации в обоих полушариях головного мозга (рис.

2.10)Рис. 2.10. Больной П.,02.08.2000 – года рожденияКлиническийпример3.БольнаяБ.Обследование28.06.2006г.Множественные разноуровневые очаги демиелинизации в белом веществеголовного мозга (рис. 2.11).Рис. 2.11. Больная Б., 16 лет. Крупные очаги, а также множественные очагив белом веществе головного мозга36Клинический пример 4. Больная Е. Множественные очаги демиелинизациив белом веществе головного мозга многоуровневого характера (рис. 2.12).Рис. 2.12. Больная Е., 14 лет. Множественные очаги демиелинизациив белом веществе головного мозга многоуровневого характераКлинический пример 5.

Больная К. Узурация мозолистого тела (рис. 2.13).Рис. 2.13. Больная К., 16 лет. Узурация мозолистого тела37Клинический пример 6. Больная Л. Множественные очаги демиелинизациив обоих полушариях головного мозга многоуровневого характера (рис. 2.14).Рис. 2.14. Больная Л., 13 лет. Множественные очаги демиелинизациив обоих полушариях головного мозга многоуровневого характера38Клинический пример 7. Больная Ш. Множественные очаги демиелинизациив белом веществе обоих полушарий головного мозга (рис.

2.15).Рис. 2.15. Больная Ш., 14 лет. Множественные очаги демиелинизациив белом веществе обоих полушарий головного мозгаКлинический пример 8. Больная Ш. Очаг демиелинизации на уровнешейного отдела спинного мозга (рис. 2.16).Рис. 2.16. Больная Ш., 16 лет. Очаг демиелинизации на уровне шейного отделаспинного мозга39Клинический пример 9. Больная Г., расширение желудочковой системы какпроявление внутренней гидроцефалии, атрофия коры головного мозга и узурациямозолистого тела (рис. 2.17).Рис.

2.18 Больная Г., расширение желудочковой системыкак проявление внутренней гидроцефалии, атрофия коры головного мозгаи узурация мозолистого тела.ПомимоМРТпроводилосьнейроофтальмологическоеисследование,которое включает в себя исследование остроты зрения, полей зрения, цветовогозрения, а также оценку состояния глазного дна. Эти исследования очень важны вдиагностике оптического неврита, рассеянного склероза, оптикомиелита –болезни Девика и болезни Лебера – наследственной нейропатии зрительногонерва, протекающей по типу РС. При этих клинических формах острота зренияможет падать до амавроза.

Поля зрения могут быть изменены, при этомизменения носят вариабельный характер, особенно при исследовании на цвета,вплоть до появления скотом. Состояние глазного дна является очень важнымдиагностическимкритерием,изменения: широкие иможноотметитьнекоторыепатологическиеполнокровные вены, стушеванность границ дисковзрительных нервов, вплоть до развития застойного диска зрительного нерва,40иногда с осложнениями в виде кровоизлияний и полной размытостью границ,побледнение диска зрительного нерва, иногда двустороннее -проявлениеатрофии. Но патогномоничным для рассеянного склероза является побледнениевисочных половин дисков зрительных нервов.2.3 Лабораторное исследование иммунного статуса у больныхс различными клиническими формами рассеянного склерозаВсемкатегориямпациентовбылопроведеноклиническоеииммунологическое исследование крови (таблицы 2.1, 2.2).Таблица 2.1Клиническое исследование кровиНаименование показателяСокращениеГраницы нормыМ: 4,0-5,0Единицы измеренияЭритроцитыЭритр.ЛейкоцитыЛейк.4,0 – 9,0109 /лЛимфоцитыЛимф.20-25%ЭозинофилыЭозин.0,5 – 5,0%0,02 – 0,30109 /л1-6%0,04 – 0,30109 /л47-72%2,00 – 5,50109 /л3-11%0,09 – 0,60109 /лНейтрофилыпалочкоядерныеНейтрофилысегментоядерныеМоноцитыОседание эритроцитовНейтр.

ПЯНейтр. СЯМон.СОЭЖ: 3,9-4,7М: 2-10Ж: 2-151012 /лмм/ч41Таблица 2.2Иммунологическое исследование кровиУсловноеЕдиницыРеференсныеобозначениеизмеренияданныеТ910 / л0,8-2,2Т-хелперы - CD45+CD3+CD4+Тх910 / л0,6-1,6Т-цитотоксические - CD45+CD3+CD8+Тц109 / л0,19-0,65Активированные Т-лимфоциты СD3+HLA-DRТак109 / л0,03-0,2Т-регуляторные лимфоциты СD3+СD4+СD25+Тр109 / л0,01-0,2х)НК-клетки регуляторы СD3-СD16-СD56+НКр910 / л0,09-0,6х)НК-клетки цитотоксические СD3-СD16+СD56+НКц109 / л0,12-0,37НК клетки Т-зависимые СD3+СD16+СD56+НКт109 / л0,070-0,077Клетки-носители HLA-DR антигенаHLAед.0,134-0,139Ма910 / л0,09-0,6ЛИН910 / л0,08-0,25В109 / л0,1-0,5Иммунные глобулины МIg Mг/л0,5-2,7Иммунные глобулина АIg Aг/л0,8-3,2Иммунные глобулины GIg Gг/л6,6-15,0Циркулирующие иммунные комплексыЦИКУЕ0-55Молекулы средней массыМСМУЕ40-70Интерлейкин 4ИЛ-4пкг/мл19,6Интерлейкин 6ИЛ-6пкг/мл16,3Интерлейкин 8ИЛ-8пкг/мл14,1Фактор некроза опухолей альфаФНОпкг/мл0,2МоноцитыМон.109 /л3-11Фагоцитарный показательФП%55-90Фагоцитарное числоФЧМЧ5-9НСТ-спонтанныйНСТсп%5-12НСТ-активированныйНСТак%10-35Цитохимическое число спонтанного НСТЦХЧспУЕ1-1,12Цитохимическое число активированного НСТЦХЧакУЕ1-1,24НазваниеТ-клетки - CD45+CD3+Маркер апоптоза CD95Лейкоциты с интегрином - CD11вВ-клетки - CD19+Обозначения: х) Трактовка по С.Ф.

Гайдукову, А.Ю. Зурочке. Вопросы современнойпроточной цитометрии, 2008. (НКц – СD3 СD16>80-90% СD56<10-20%, НКр СD3 СD16<1020% СD56>80-90%).42Приэтомприменялисьследующиеметодикиисследованияиммунологического статуса.1. Иммуноглобулины класса GИммуноглобулинклассаGпредставляетмолекулярной массой около 150 000 Да.собойгликопротеинсIgG составляет около 75% всехрастворимых иммуноглобулинов. Основной функцией IgG является связывание сантигенами.Количественное определение содержания иммуноглобулина G общего всыворотке крови имеет диагностическое значение при заболеваниях печени,некоторых заболеваниях почек, при ревматоидном артрите и системной краснойволчанке, при хронических инфекциях.Для определения концентрации общего иммуноглобулина класса Gиспользовался набор реагентов IgG общий – ИФА- БЕСТ.

Набор рассчитан напроведение анализа в дублях 41 неизвестного образца, 6 калибровочных проб и 1пробы контрольной сыворотки при одновременном использовании всех стриповпланшета. Дробное использование набора может быть реализовано в пределахсрока годности.Необходимое оборудование:-спектрофотометр,позволяющийпроводитьизмеренияоптическойплотности растворов в лунках планшета в двух-волновом режиме: при основнойдлине волны 450 нм и длине волны сравнения в диапазоне 620-655 нм; или толькопри длине волны 450 нм;- центрифуга, позволяющая центрифугировать при 1,5-2 тыс. об./мин.;-термостатируемыйшейкерорбитальноготипана700об./мин.,поддерживающий температуру 37 С;- промыватель планшетов;- пипетки полуавтоматические одноканальные со сменными наконечникамиобъемом 10-5000 мкл;43- пипетка полуавтоматическая многоканальная со сменными наконечникамиобъемом 10-350 мкл.Методопределенияоснованнадвухстадийном«сэндвич»-вариантетвердофазного иммуноферментного анализа с применением моноклональныхантител к IgG.На первой стадии калибровочные пробы с известной концентрацией IgG ианализируемые образцы инкубируются в лунках планшета с иммобилизованнымимоноклональными антителами к гамма-цепям иммуноглобулинов класса Gчеловека.На второй стадии связавшийся в лунках IgG обрабатывают конъюгатомМКАТ к легким (каппа и лямбда) цепям иммуноглобулинов человека спероксидазой.ОбразовавшиесяМКАТ-IgG-конъюгат»тетраметилбензидина.иммунныевыявляютВкомплексыферментативнойанализируемом«иммобилизованныереакциейобразцесрастворомстепеньокраскипропорциональна концентрации IgG.