Диссертация (Экспериментальное обоснование комплексной стимуляции репаративно-регенеративных процессов при повреждении седалищного нерва), страница 3

Обнаружено, что ПЭС усиливает регенеративный эффектАТПКЛ, что выражается в увеличении интенсивности процессов реиннервациимышечных волокон.Впервые изучены механизмы реализации стимулирующего влияния АТПКЛпри повреждении и нейрорафии седалищного нерва. Установлено, что деградацияаутотрансплантированного кожного лоскута вызывает локальную инфильтрациюподкожной клетчатки эозинофилами, лимфоцитами и макрофагами. Тканевыереакции,наблюдаемыеваутотранспланте,сопровождаютсяувеличениемконцентрации в крови факторов роста, обладающих стимулирующим влиянием нарегенерациюнервныхволокон:фактораростаэндотелиясосудовинейротрофина-3, а также снижением уровня тяжелых цепей нейрофиламентов вкрови, что характеризует уменьшение дегенеративных процессов в нервной1213ткани.

Вместе с тем под влиянием АТПКЛ происходит стимуляция эндотелийзависимой вазодилатации и снижение нейрогенного тонуса прекапиллярногозвена микроциркуляторного русла пораженной конечности, что препятствуетразвитию признаков денервационной гиперчувствительности при нейрорафииседалищного нерва и обеспечивает поддержание адекватного уровня перфузиитканей,способствующегореализациирепаративныхпроцессов.Впервыевыявлено, что дистантный стимулирующий эффект АТПКЛ на микроциркуляциюреализуется не только в условиях нарушенной, но и при сохраненной иннервации.Однако у животных, не имеющих повреждений периферических нервных стволов,продолжительностьдистантногостимулирующегодействияАТПКЛнамикроциркуляцию меньше, чем в условиях экспериментальной нейрорафии.Научную новизну исследования подтверждает выданный Федеральнойслужбой по интеллектуальной собственности патент на изобретение RU 2587719"Способ коррекции микроциркуляции конечности при повреждении стволовпериферических нервов" Опубликовано: 20.06.2016 Бюл.

№ 17.Теоретическая и практическая значимостьРезультаты исследования расширяют представления о патогенетическихвзаимосвязях трофики тканей, дегенеративных и репаративных процессов приповреждении периферических нервов, за счет комплексного изучения изменениймикроциркуляции,функциональных,биохимическихиморфологическихпараметров регенерации нервного ствола в условиях эксперимента. Полученыновые данные о биостимулирующем действии трансплантации собственныхтканейорганизма.Выявленыособенностиреализациидистантногостимулирующего действия аутотрансплантата кожи на микроциркуляцию вусловияхсохраненнойиннервации,атакжераскрытымеханизмыегосаногенетических эффектов при повреждении нервного ствола.Результатыисследованиядополняютконцепциюиспользованияэлектростимуляционного воздействия при травмах периферических нервов засчет новых данных об особенностях регенеративных эффектов сочетания1314указанного физиотерапевтического воздействия с биостимуляцией методомтрансплантации собственных тканей организма.При выполнении работы разработан новый способ комплексной стимуляциирегенерации при повреждении седалищного нерва, заключающийся в примененииаутотрансплантациикожноголоскутадлясистемноговоздействияна репаративные процессы, так и в комбинации с прямой электростимуляциейнервного ствола после его нейрорафии.

Использование данного способа принейрорафии седалищного нерва обеспечивает поддержание адекватного уровняперфузии в тканях пораженной конечности, препятствует дегенеративнымизменениямиреиннервациюстимулируетмышечныхростнервныхволокониволокон,наступлениеатакжеускоряетимпульснойстадиирегенерации. Полученные данные о регенеративном эффекте дистантнойаутотрансплантации полнослойного кожного лоскута и ее комбинации с прямойэлектростимуляциейнервногообосновываютвозможностьрепаративныхпроцессовповреждениямистволапринейрорафиирекомендоватьдляданныйклиническойпериферическихнервов.Вспособапробацииходеэкспериментальноустимуляциипациентоввыполнениясработыдополнительно была разработана программа для ведения базы данныхпоказателей микроциркуляции, свидетельство о государственной регистрациипрограммы для ЭВМ № 2015616501 выдано Федеральной службой поинтеллектуальной собственности 11.06.2015.

Практическое применение даннойпрограммыприпроведенииэкспериментальныхисследованийпозволяетупростить процесс обработки данных, полученных с помощью лазернойдопплеровской флоуметрии. Для упрощения процесса нейрорафии седалищногонерва у крысы было разработано устройство для интраоперационной фиксациипериферического нерва. Патент на полезную модель RUS 145447 выданФедеральной службой по интеллектуальной собственности 15.05.2014.

Даннаяполезная модель позволяет прочно атравматично удерживать периферическийнерв любого размера во время осуществления хирургических и диагностических1415манипуляцийприупрощениипроцессавыполненияхирургическоговмешательства и сокращения его продолжительности.Методология и методы диссертационного исследованияРегенеративный эффект и дистантное стимулирующеедействиенамикроциркуляцию АТПКЛ и ее комбинации с ПЭС, а также механизмы ихреализациибылиизученынаэкспериментальноймоделиповрежденияседалищного нерва крысы. При выполнении работы был использован комплексфункциональных,биохимическихигистоморфологическихметодовисследования.

Функциональные методы исследования включали лазернуюдопплеровскуюфлоуметрию(ЛДФ)иэлектронейромиографию(ЭНМГ).Биохимические исследования концентрации нейроспецифических белков (NT-3,NEFH) и фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) в сыворотке крови быливыполненыметодомиммуноферментногоанализа.Гистоморфологическиеисследования включали микроскопию и морфометрию препаратов седалищногонерва и зоны АТПКЛ.Внедрение результатов исследованияПолученные результаты используются в процессе преподавания на кафедрепатологической физиологии имени А.А. Богомольца и кафедре гистологии,цитологии и эмбриологии ФГБОУ ВПО Саратовский ГМУ им. В.И.

РазумовскогоМинздрава России, курса патологической физиологии на кафедре медикобиологических дисциплин Филиала частного учреждения образовательнойорганизации высшего образования «Медицинский университет «Реавиз» в городеСаратове, научно-исследовательском процессе в ФГБУ «СарНИИТО» МинздраваРоссии.1516Положения, выносимые на защиту1.Аутотрансплантацияполнослойногокожноголоскутавмежлопаточной области при перерезке и нейрорафии седалищного нерва вусловиях эксперимента стимулирует микроциркуляцию в пораженной конечностии регенерацию нервных волокон.2.Прямая электростимуляция седалищного нерва после нейрорафии вусловиях эксперимента усиливает регенеративный эффект аутотрансплантацииполнослойногокожноголоскутавмежлопаточнойобласти,увеличиваяинтенсивность реиннервации мышечных волокон3.Регенеративноедействиеаутотрансплантацииполнослойногокожного лоскута в межлопаточной области при перерезке и нейрорафииседалищного нерва в условиях эксперимента реализуется за счет комплексамеханизмов,нейрогенноговключающеготонусаэндотелий-зависимуюпрекапиллярногозвенадилатациюиснижениемикроциркуляторногоруслапораженной области, а также стимуляцию продукции факторов роста –нейротрофина-3 и фактора роста эндотелия сосудов.Степень достоверностиДостоверность результатовисследованияопределяетсядостаточнымобъемом выборки экспериментальных животных (92 белых крысы), применениемсовременныхинформативныхметодик,выполненныхсиспользованиемсертифицированного оборудования и реактивов и включающих комплексфункциональных и биохимических методов в сочетании с морфологическойверификацией процесса регенерации.

В работе использованы непараметрическиеметодыстатистическойобработкивсоответствиивариационных рядов изучаемых показателей.16схарактеристиками17Апробация результатов исследованияОсновные положения работы доложены и обсуждены на: научнопрактической конференции молодых учёных, посвящённой 75-летию профессораВ.Г. Нинеля «Вклад молодых учёных в развитие травматологии, ортопедии инейрохирургии(Саратов,2014);заседаниирегиональногообществатравматологов-ортопедов (Саратов, 2014); Всероссийской научно-практическойконференции молодых ученых и студентов с международным участием«Медицинская весна 2015» (Москва, 2015); X Международной конференции:Микроциркуляция и гемореология. Клиника и эксперимент: из лаборатории кпостели больного (Ярославль, 2015); заседании регионального обществатравматологов-ортопедов (Саратов, 2015); Всероссийской научно-практическойконференции, посвященной 70-летию СарНИИТО «Травматология и ортопедия вРоссии: традиции и инновации» (Саратов, 2015); VIII Всероссийской научнопрактической конференции молодых ученых с международным участием«Цивьяновские чтения» (Новосибирск, 2015); III Межрегиональной конференциис международным участием «Наследственная и приобретенная патологиясвертывания крови - тромбозы и кровотечения: диагностика, профилактика,лечение, экономика» (Саратов, 2016);Международной научно-практическойконференцииобщество»«Наука,образование,(Тамбов,2016);XIVМеждународной заочной научно-практической конференции «Современныетенденции развития науки и технологий» (Белгород, 2016); научно-практическойконференции«Классикаиинновациивтравматологиииортопедии»,посвященной 75-летию профессора А.П.