Методы общей бактериологии (том 1) (947292), страница 53
Текст из файла (страница 53)
Количество инокулята не является важным фактором при определении аминокислот, если в каждой пробирке оно одно и то же (достаточно одной капли). При турбидиметрическнх измерениях роста бактерий пробирки с культурой инкубируют в течение 20 ч при 3?'С. За ростом клеток следя~ фотометрически при длине волны ~600 нм, где снижена до минимума интерференция, вызываемая окраской среды (можно использовать, например, колорнметр ВапзсЬ апб (.ОпзЬ, мо.
дель 20). Прн использовании образцов объемом 2 мл время инкубацни удлиняется до 72 ч, а рост культуры измеряют с помощью тнтрования образуемой кислозы 0,2 н. ХаОН, Строят стандаргную кривую для аргинина на графике, по одной оси которого откладывают интенсивность роста (плотность клеток после 20 ч роста) или данные титровання, а по другой — количество добавленного стандартного раствора аргинина. Для каждого результата, полученного с известным количеством образца, по стандартной кривой находят то количество аргинина, которое вызывает соответствующую стимуляцию роста, Используют начальную (восходящую) часть кривой, где наблюдается линейная зависимость между интенсивностью роста бактерий н концентрацией аргинина.
В этот отрезок кривой должно уложиться несколько точек из разных разведений исследуемой пробы, причем расхождения доллсны быть незначительными. Полученные результаты выражают в миллиграммах аргннина на 1 г пробы или в других удобных величинах. 7.3.2. Витамины Витамины определяют методами, сходными с методами, используемыми для аминокислот. Вместо смеси ами- ЧАСТЬ Н. РОСТ нокислот в ростовую среду можно вносить лишенный витаминов гидролизат казвина с добавками аминокислот, которые были разрушены при кислотном гидролизе и.ти присутствуют в казеине в субоптимальных концентрациях. Обычно витамины нужны в значительно более низких концентрациях, чем аминокислоты.
Так, для типичной тест-бактерии уас1обас(1(из р(ал(агит оптимальная потребность в биотине составляет 1 нг)'10 мл культуры. В связи с этим необходимо всегда работать с очень тщательно вымытой стеклянной посудой, особенно пробирками. Для мытья посуды нельзя использовать растворы кислоты, содержащие хроматы, поскольку несмываемые с помощью многократного споласкивання хроматы даже в минимальных (следовых) количествах подавляют рост бактерий. Вполне пригодна следующая обработка: культуральпые пробирки заполняют дистиллированной водой, автоклавируют 10 мип, воду сливают и пробирки высушивают.
Поскольку пробки также могут служить источником химического загрязнения, их следует перед каждым опытом промывать. Так как витамины весьма различаются между собою по устойчивости и по химическому строению, не существует универсальной процедуры высвобождения связан. ных витаминов. Как правило, широко используют следующие способы обработки проб 12041: 1) гидролиз разбавленной кислотой, нейтрализация, доведение водой до нужного объема и фильтрование нли 2) обработка смесью ферментов, автоклавирование для остановки действия ферментов, доведение до нужного объема и фильтрование. 7.4. Л И ТЕ РАТУ РА 1.
Ааголаол В. 3. Вас1ебо1., 69, 67 — 69 (!955). 2, Аныоп М. Д, Вгуапг М. Р„поегас)г В. )У. Вс(епсе, 128, 474 — 475 (1958) . 3. Ацыоп М. 7., Вгуал( М. Р., Все!ага )с. Ж с. Вас!ег!о(, 83, 523— 532 (1962). 4. Агпенсап Туре Со!юге Сопесцоп. Са1о)ояпе о1 Мга(па 1, !ЗШ еб., Агпег!сап Туре Сапоге Сопеспоп, Носьыпе, Мб, 1978. 5. Арисгоеская Т. В. ДАН СССР, 136, 954 — 957 (1961). 6. Ва(гс(-Рагуег А. С. 14а1пге (1опг(оп), 180, 1056 — !057 (1957). 7 Ва(гг(-Рагаег А. С. д. беп. М!сгоЬ(о(., 22, 458 — 469 (!960). Г.
БИОХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ 8, ВаМасс( Е., босс( Я, !и: И. Е. Висбапап апб ЬЬ Е. В!ЬЬопв (ебв.), Вегиеу'в юапиа( о1 бе1еггп(па(!че Ьас1ег!о!обу, 81Ь еб., р. 829— 831, Тие Твг)И!агав апб Твг!!Ыпв Со., Ва1бпюге, 1974. 9. Вагап У.. 5., Сатеу )Тт, Р., Брутпап )Р'. М. Ргос. На(!. Асаи. Зс). ()ЗЛ, 45, 976 — 984 (1959). 1О Ваитапп Р., УУоийото)У М., 51ап!ет )7. У. У, Вас1ег!о)., 96, 58 — 73 (1968) .
11. Ваиталп Р., У)оийото(У М., Бгап!ет )7. у. У. Вас1еНо1„95, 1520— !541 (1968). 12 ВесМпу Н. У. Р1ап1 БоИ, 14, 49 — 81; 297 †3 (1961). 13. Весйпу Н. У. 1и: й. Е. ВпсЬапап апд Ы. Е, Сг)ЬЬопв (ебв.), ВегПеу'в юапиа! о! Ое1егпипа(!че Ьас1еНо(оду, Вра ег(., р. 268--259, ТЬе 971!Иаюв апб %6(г!пв Со., ВаИппоге, 1974, 14. Вегагсб У. Р., Белее У. Р. У Вас1еПо1., 89, 1195 — 1200 (1965). !5. Ветуап Т., Нос(у В.
Ас(а РаИво1. М1сгобют!. Зсапг1., 74, 42! — 430 (1968). !6, В(осУ )7. У., ВоП(лу Р. ТЬе агп(по ас(6 согпровгИоп о! рго1е!пв апг) 1оог)в, р. 485 — 492, СЬаг!ев С. Тиогпав, РиЬИвбег, Зрг!пдйеЬЬ !И., 1945. 17, Вове 5. К. !и: Н. Сгев1, А. Зап Р(е1го апб 1.. Р. гтегпоп (ебв.), Вас(еНа( рЬо1овуп(Ьев!в, р. 501 — 5!О, ТЬе Лп((ос!в Ргевв, УеИовч ЗрНпбв, ОЬ!о, 1963. 18.
Воигг!те У. Н., Кпеу М В., Но))тал Р, 5. Бт!Ьгт( )7. М. Арр(. Епч(гоп. М!сгоЬАо!., 31, !27 — 133 (1976). 19. Втетет У. Н. Бс!епсе, 96, 587 (1942) . 20. Втуап! М. Р., КоМпвоп 1. М. У. Вас1ег!о!., 84, 605 — 614 (1962). 21. Втуап! М. Р., йоугпвогг 1. М., Суи Н. У.
()а)гу Бс1., 42, !83!в 1847 (!959). 22, Втуапг М. Р., БтаП Н У. Вас1ег!о1., 72, 16 — 21 (1956). 23. Втуапг М. Р., 5таП М У. Вас(ег(о1., 72, 22 — 26 (1956). 24 Втуапс М. Р., 5таП Н., Воита С., Сии Н. 3. Вас1ег!о1., 76, !5— 23 (1958). 25. Вит!ол М. О., ЕосУЬеай А. 6. Сап.
3. Во1., 31, 145 — 151 (1953). 26. СаиаВат Е. Т., !Л, )г(соотг(вол 5. Н. (п1ес1, !юпп., 7, 567 — 572 (1973). 27 СатруеП Е. Е., Ут., ГтапУ Н. А, Нау Е. й, У. Вас1егю!., 73, 5!6— 521 (1957). 28 Сапоге-Рата!а Е., (чо!Уе й. 5. 3. Вас1егю1., 79, 857 — 859; 860— 862 (1969]. 29 Сатаигау В.
Н., Ктгед Ж В. Сап. 3. М(сгоЬ!о!., 18, !749 — 1759 (1972) . ЗО. СаРПп В, )Тт. У.!п(ес(. !)!в., 128, 178 — !94 (!973). 31, Сай!п (Р. 3. Вас1егю!., 79, 579 — 590 (1960). 32. СаРПп )Р'. У. Вас1еПо!., 83, 470 — 474 (1962). 33 С)галу П. )Р'., 5леП Е. Е. В!осиегп!в(гу, 7, 2005 — 2012 (1968). 34. Сйлвйе А. О., Рот(еоив У. )Р. 3. Сгеп, М!сгоЬ!о!., 28, 443 — 460. 35. СоЬеп-Вас(те С., БаПтот (р. й., Бгапгет )7. у. У.
Сеи Сагир. Риув!о!., 49, 25 — 68 (1957). Зб, Со!е )7. М., Тибу У. 6., РорУт Т. У„Воое У М. У, Вас1епо1, 115, 367 †3 (1973). 37 СоисЬ У, М У. ЕИвЬа МИсЬеИ Зс(. Зос., 66, 87 — 92 (!950). 38. СоисЬ У. М Л. ЕИвба МИсЬеИ бои Бос., 71, 148 †1 (1955). 269 Г, БИОХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ (ейв.), ТЬе Ьас(ег!а, чо1.
4, р. 33 — 93, Левает(с Ргевя, 1пс., Ыечт Тогу, 1962. Ч(. Оиттатй В. М., Язей Е. Е. Л. Вас!ег!о)., 87, 370 — 376 (1964). 72. Ои1теттег У., ОаоЫ В. Е„Е!ттйа81 Х. Е., Ууатса!сб Е. У. Арр). М!сгоЫо1., 7, 16 — 21 (1959). 73. Наттетзттот В. А., С1аия К О., Соду!ал У.
бг., МсВее К. Н. Лгсб. Вюсбетп. В)орбук, 58, 123 — 129 (1955). 74. Налет! Н. Агсб. М!)тгоЫоЫ бб, 348 — 376 (1968). 75. НарроЫ Р. С., Хобттз!еле К. Х., йоуетз Н. У., уооаН У. В. Л. Степ. МтсгоЫо1., 1О, 261 — 266 (!954]. 76. Нату Р. В., Озет В. Х... Яитпгетюп )Р. Н. Ртасбса) РЬуыо!об)са1 сбсппв1гу, 121Ь сд., р. 109, ТЬе В1а!тпбоп Со., Ыеит Уоту, 1951. 77, Нау(усу Е., С)талосб (!. М.
Вас1епо). Ееч., 29, 185 — 221 (!965). 78. Наугеоой Н. )7, 5!ай!татя Т. С. Л. Вас!епо)., 78, 567 — 561 (1959). 79. НеПтал Т. К. Л. 1п(ес1. ТХ!я., 69, 32 — 51 (!941). 80. Нетр(иН Н. Е., Еатт!ег 5. А. Л. Вас1егю1., 95, !011 — !017 (1968). 81. Нелйеттол Е. М., 5пзН Е. Е Л.
В!о). СЬет., 172, 1б — 29 (1948). 82. Нелйпе М. 5., НойуМзз %'., Ябетап Х. 97. Л. Сеп, М!стоЫоЫ 64, 151 †1 (1970). 83. Нелззеп А. АгсЬ. М!)тгоЫо1., 26, 373 — 414 (1957). 84. Нетбзт Е. У., ЯпеВ Е. Е Л. Вю!. СЬсн., 176, 989 — 990 (1948). 85. Незреу )7. В., Сапате-Рата!а Е. Л. Вас1ег!о1., 103, 216 — 226 (1970) . 86. ННзсб Р. !п: Е.
Е. Висбапап апй )Ч. Е. О1ЬЬопв (ейя.), Вегдеу'в тпапиа) о1 де!егпнпабче Ьас!егго1оау, ВРЬ ей., р. 149 — 151, ТЬе )У!!!!аюв апд 1У!1Ыпв Со., Ва!!!тоге, 1974. ВЧ. Но)з(ай Т. Ас1а. Ра(бо). М1стоЬ)о). Зсапй., 69, 543 — 548 (!967). 88. Ной 5, С., Соп1! 5. Р., ГиНет В. С. Л. Вас1ег)о1., 91, 311 — 323 (1966). 89. Ноте!! А., Рте Е. Л. Вас1епо1., 71, 47 — 53 (1956). 90. Ни!лет 5. Н. Л. Ввс1егю1., 43, 629 — 640 (1942). 91. Ни!лет 5.
Н., РгооаяоП Х., Ясба1г А., ХХазб!лз С. Р. Ргос. Ат. РЫ!ов. Яос., 94, ! 52 — 170 (1950). 92, ХасМаз Н. С., Ватбет Н. А. Л. Вас!епо)., 61, 101 — !14 (!951). 93, Лаибе А. Лгсб. МтсгоЬю1., 15, 116 — 1!8 (1950). 94, Уепзеп Е. М., Яее1еу Н. )бт. Л. Вас1епо1., 67, 484 — 488 (1954). 95, Хепзел Н. Е. Ргос. Ыпп. 5ос. )4. 5.%., 57, 173 — !80 (1932).
96. Хепзел Н. Е., Регеттол Е. У., Ое Р. К., ВбаНасбатуа Е. АгсЬ, МбтгоЬю!., 36, 182 — !95 (1960). 97. Уоблзол Е. С., 97!!зол У. В. Л. Вас1ег!о1., 80, 406 — 4! 1 (1960). 98, Хопез Н. Е., Рагу В. ВГ. А. Л. Оеп, М!сгоЬто1., 47, 369 — 378 (1967). 99. Хоиез Х. В„ЯтатНтал Т. С.
Л. Вас(епо!., 130, 1404 — 1406 (1977). 100. Хогйаа В, М. М. Вг Л. Ехр. Райс!., 33, 2Ч вЂ” 54 (1952). 101. Кале К'. Р. Л. Е)МЬа М1!обе!1 Яс!. бос., 82, 220 — 230 (!966). 102. Казас О. У. Л. !)еп!. Рея., 44, 1015 — 1022 (1965). !03. Ка1гпеНоп Н., Еоса)теай А. О. Л. Вас!епо), 64, 97 — 1ОЗ (1952). !04. Каифиалл Е ТЬе Ьас1егю1оду о1 Еп1егоЬас1епасеае, р. 311— 332, ТЬе Тгт)!1)атв апй УУ!1)г!пв Со., ВаИнпоге, 1966. 105. Кай!тал Х., Нитрбт!ез У, С. Арр1, М!сгоЫо1., 6, 3!! — 315 (1958). 271 часть и.
Рост 105а. Каоапаиуь К Лпа)убса! ш)сгоЫо!оау, чо1. 1 апб 2, Асабеш!с Ргезв, !пс, Ыечг Уог)г, 1963, 1972. 106. Ке!!ощ О. 5., РеасосЬ )Р. Е., /г., Оеасоо )Уг. Е., Вговп 1... Р!гЫе С. /. Л. Вас!епо)., 85, 1274 — 1279 (1963). 107. Кгьага Н., 5пе1! Е. Е. Л. В(о!. СЬеш., 235, 1409 — 1414 (1960). 108. К!пй!ег 5.
Н., Марег 1., 6гоззов!се Лг. Л. Сеп. М!сгоЫо)., 15, 386 — 393 (1956). 109. К/пу Е. М„АИег О. !.. Агп Л. СПп. Ра(Ьо)., 41, 230 — 232 (!964). 1!О. КНауага К., Еа! С. 1.. Л. Сеп. Арр!. МкгоЫо)., 13, 197 — 203 (1967) . 110а. КНанага К., 5игиМ 1. Л. Сеп. Арр1. МкгоЫо1., 9, 59 — 71 (1963) . 11!. Кп!у!г! В. С. /. 6., Ргоот Н, Л. Сеи, М(сгоЫо1., 4, 508 — 538 (1950), 112 Кп!дй! 5. 6. 1и: С.
Н. Трег1апап апд Р. %. ФПзоп (едв.), Вас!епа! ше1аЬоПвгп, р. 500 — 516, Лсабеш)с Ргезз,!ис., 1!еьч УогЫ 1951. 113. Кондратьева Е. Н., Красильникова Е Н., Новикова Л М. Микробиология, 37, 417 †4 (1968). 114. Козег 5. Ч(1аш!п геОшгешеиЫ о1 уеав1 апд Ьас1епа, СЬаг1ев С. Трошев, РиЫЫЬег, Брг1па(1е)В, 1П., 1968. 115. Кова652 У., Ргтцзье!т Е. 6. Аш. Л. Во1..
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
