Методы общей бактериологии (том 1) (947292), страница 54
Текст из файла (страница 54)
53, 80! — 806 (1966). 116. Красильников Н. А., Агре Н. С. Микробиология, 33, 829 — ВЗо (!964). 117 Кг!ед Лг. /!. !и: П. Е. ВисЬапап апг) Х. Е. СОЬЬопв (ебв.), ВегОеу'в гпаппа) о1 Ве1егш)па(!че Ьас!ег!о!оду, 8!Ь еб, р. 198 — 200, ТЬе %)П)ашз апб )ЧПЫив Со., ВаИппоге, !974. 118. КиЫса 6;Р., К!т Т. Н., ОипЬаг Р. Р. !и!. Л. ВуаЬ Васгег(о!., 22, 99 — !06 (1972). 1!9.
Ки!р )р. !., Еогйеп О. 6. Л. Вас1епо!., 44, 673 — 685 (1942). 120. Лапу/огд С. Е., 5йащз Р. К. АгсЬ. В1осьею., 9, 265 — 283 (1946) 12!, !апЬ/огд С. Е., 5пеИ Е Е. /. Вас!епо(., 45, 410 — 411 (!943). 122. /.а Раде 5. Р., 58еПоп 1, Е., МйсйеИ Т. 6. 1п: Л. й.
когтй апг( О. %. РПЪЬопз (едв.), МеПгобв (и ш!сгоЫо!о87, чо(. ЗЛ, р. 1- 133, Асадеш(с Ргевв, 1пс., Ыечг Уог)г, !970. 123 йагзеп Н Л. Вас1егю)., 64, 187 — 196 (1952). 124. Еагзеп Н. 1и: Н. Сев(, А. Вап Р!е1го апд Ы Р. Чегпоп (едв.], Вас1епа1 рЬо1овуп!Ьез(в, р. 509, ТЬе АпПосЬ Ргевв, УеПов 5рпиав, ОЫо, 1963. 125. /ес!гееа!!ег Н. А., 5о1о!огоезьу М., МсОигтоп! С. /. Л. Сеп. МкгоЫо)., 26, 1! — ! В (!961).
126. ЕесьееаИег М. Р., Евсьгоа!!гг Н. Н., Но!Ьег! Р. Е. Аип. )пз!, Рав!еиг Рапв, 114, 277 — 285 (1968). !27, 1.еппеНе Е. Н., Еа!овз А„Наив!ег ЯГ. 1., 1г., Тгиаи! /. Р. (едз.). Маппа) о1 с1ш)са! шкгоЫо(оау, Згг( сб., р. 965 — 999, Агпепсап Вос)е1у 1ог 54!сгоЬю!оду, )ЧавЫп3(оп, О. С, 1980. 128. йев!гг /7. А. Саи.
Л. МкгоЫо!., 8, 555 — 563 (! 962) . 129, 1.ев!и /!. А. Сап. Л. М)сгоЫо1., 16, 511. -515 (1970). 130. Лев!и Лг. А., !.оинзЬеггу О. М. Л. Сеп. М1сгоЫо)., 58, 145 — 157 (1969) . 131. У.иЫп М. 1п: Л, Н. НоПшаи (ед.). ТЬс сеПи!аг !ипс(юи о! г. БИОХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ гпегпЬгапе 1гапьрог1, р. !93 — 209, Ргеп!!се-На!1, 1пс., Епа1ечтоод С1ВЬК Ы. У., !964. 132. абие|(етаптг 6. М. У. Вас1ег!о!., 96, 1848 — 1858 (1968). !ЗЗ. Еит(а 5. Е, Витготь У. ]Р.
У. Вас1ег1о1., 74, 461 (1957), ! 34. Масйеот( Я. А., 5пеН Е. Е, У. Вас1егю1., 59, 783 — 792 (1950). !35. Маует У., К!ит(!ет 5. Н., Отоььоилсг Л'. У. Оеп. М!сгоЬю1., 10, 130 †1 (!954). !36. Май У(. А., Еииу О. У. С., Мосье 5. А. Арр1. М!сгоЬ|о!., 15, 866— 870 (!967). 137. Матьйай А. У. Вас(епо1., 61, 1 — 16 (!951). 138.
Майитае А. М., ОЫаи| М., ТаИеьЫта Н., На(а Т. У. Ап(!Ыо1., 21, 616 †6 (1968). 139 МсС|еьйеу С. 5. !. Вас!ег|о!., 64, 140 — 141 (1952). 140. МсСитг(у Н. О. Сап. У. М]сгоЪ|о!., 10, 935 — 936 (1964). 14!. МсСитг(у Н. О. Сап. У. М|сгоЫо1., 15, 1453 — 1461 (!969). 142. МсСип1у Н. О. 1и; )!. Е. ВисЬаиап апд Ь]. Е. СЧЬЬопь (едь.), Вегдеу'ыпапиа! о1 4е!египпаВче Ьас!ег!о1оиу, 8й ед., р, 87 — 88, ТЬе БУ!1!!згиь апд %!!]г!пв Со., Ва!1!|поте, 1974. 143 М!сйе!ьоп М У. У.
Вас1епо1., 88, !58 — 164 (1964). 144. МЫЕ!еу У., 1арауе 5. Р., Уепй!пь В. А. 6., Ваттоит 6. У., Усойетй М. Е., ВисИ А. 6. У. Мед. М!сгоЫо], 3, 91 — 98 (19?О). 145. М(Ыоап А. 5. !и: Р. О. Воуег (ед.), ТЬе епгугпеь, ь!идеи! ед!. 0оп, чо]. 2, р. 445 — 536, Асадегшс Ргеьь, !пс., Ыез| Уогй, ! 970. 146. МИНет Т. 1., Еиаиь У. В. Л. Оеп. М!сгоЫо!., 61, 131 — 135 (1970]. !47. МНсйеН Т. 6., Непг(т(е М. 5., 5йехап У.
М. У. Арр!, Вас!епо1., 32, 40 — 50 (1969). !4?а. Мосс С. Ег., ОотеН ]т. Н., Ут., ГатьМсЫ О., Натет 1.. У., Сйетту )Г В. У. Вас!епо1., 97, 561 — 570 (1969). !48 Моьь С. ]Р., Ооые!! ]т. У(. Ут., 1.емй ]Р, У., 5сйеМет М. А. У. Вас!егю!., 94, 1300 1305 (1967). !49. МиеНет У. Н. !. Вас1ег!о!., 36, 499 — 515 (1938). !50. МиЫет Е. 6. !. Арр!. Вас!егю!., 27, 151 — 173 (!964). !51 МиЫет Е. 6., оаи Еееп ]Р. Е. !и: В. Е. Впсйапап аид Н. Е. 6!ЬЬоиь (едь.), Вегиеу'ыпапиа( о1 бе!егпппа1|се Ьас1ег!о!оду, Зй ед., р. !ЗЗ, ТЬе %!!!!а|па ап4 %!!Ь(пь Со., Ва]!!|поге, 1974.
152. Муеть 9?. Е,, Си|!ет 1.. О., Ет(ььетаи С.! ., !. Вас!епо!., 97, 663— 666 (1969). 153. Ногль О. О. Найге (Ьопдоп), 182, 734 — 735 (1958). 154. Оттетот( У. 6., Оттето|У К 5., ОегН Н. АгсЬ. Вюсйет. В|орЬуь., 94, 449 †4 (!961]. 155. Охеит(ет О. 1. Аппп. Всч. В|осйет., 41, 777 — 814 (1972). !56. Раз 5. Е., Уее Я., Оегоп Н. М. У.
Вас1епо1., 73, 402 — 409 (1957). !57 Ретту У. У., Еоаиь У. В. У. Вас(ег!о!., 91, 33 — 38 (1966). 158 Р)еитгц Ж., 1|рретг К О Атей М!ЬгоЫо(, 55, 245 — 256 (1966) 159. Рй(!1|рь У. Е. !и: В. Е. ВпсЬапзи апд Ь]. Е, ЯЬЬопь (е0ь.), Вегеу'ь тиаппа( о! 4е1егппиаВъс Ьас1ег!о!оду, бй ей, р. 373 — 374, Ье 97!!!!а|из апд %!]Ь!пь Со., Ва1|ипоге, !974. 160. Р|ие Е., %а1ьоп 5 У !. 1.аЬ.
С!!п. Ме0., 54, !07 — 1!4 (1959). 161. Р||Нпап К. А, Втуаз| М Р. У. Вас1ег!о]., 88, 40! 410 (1964). !62. Рости(ех!ег У 5 Взс!ег!о!. Кеч., 28, 231 — 295 (1964). 273 Глава 8 ПОЛУЧЕНИЕ НАКОПИТЕЛЬНЫХ И ЧИСТЫХ КУЛЬТУР Н, Криг В условиях естественного обитания чистые бактериальные культуры встречаются довольно редко. Тем не менее основная часть современных представлений о свойствах бактерий, а также их взаимоотношениях получена при изучении чистых культур.
Поэтому часто возникает необходнмосгь выделить в виде чистых культур различные виды бактерий, которые сосуществуют в естественных условиях. Накопление представляет собой основной этап процесса, который позволяет получить чистые культуры. Оио также дает возможность оценить различные воздействия факторов окружающей среды на смешанную микробную популяцию, благодаря которым может происходить отбор микроорганизмов, способных взаимодействовать со специфическими субстратами ~или расщеплять их) или способных хорошо расти а необычных условиях. Выделение чистой культуры данного микроорганизма будет успешным, если он присутствует в смешанной популяции в достаточно высокой пропорции, Микроорганизм легко выделить, если оп количественно преобладает в смешанной популяции. Разработанные методы накопления имеют целью добиться увеличения относительного количества данного организма благодаря созданию лучших условий для его роста и выживания по сравнению с другими или путем пространственного отделения его от других членов популяции.
К физическим методам, которые могут быть использованы в данном случае, следует отнести регуляцию роста температурой, тепловую обработку, ультразвуковую обработку и ультрафиолетовое облучение, приводящие к гибели или подавлению роста других организмов, присутствующих в популяции. Можно также использовать преимущества в некоторых физических свойствах изучаемого микроорганизма, таких, как его размеры и подвижность; это 277 члсть и. РОст позволяет в значительной мере отделить данный организм от других в популяции. В химических методах используют токсичные вещества, когорые убивают или подавляют рост оставшейся части популяции, не влияя на выделяемый микроорганизм.
Кроме того, эти вешества могут быть источниками питания, используемыми преимущественно отдельными бактериями в смешанной популяции. Биологические методы включают использование специфических хозяев для выделяемою организма, а также преимуществ некоторых патогенных свойств микроорганизма (например, его инвазивность), которыми не обладают другие представители популяции.
Во многих случаях для получения максимального эффекта накопления сочетают физические, химические и биологические методы Как правило, накопительные культуры получают в закрытых системах, т. е. микроорганизмы выращивают в обычных периодических (стационарных) условиях в колбах или пробирках, где концентрация питательных веществ и продуктов метаболизма постоянно изменяется в процессе их роста. Для получения накопительных культур используются также открытые системы. Например, с помощью хемостата можно обеспечить постоянство окружающей среды для бактерий, непрерывно подавая питательные вещества в концентрации, лимитирующей рост, и удаляя продукты метаболизма.
Изменяя скорость разбавления среды в хемостате, можно контролировать концентрацию питательных веществ, лимитирующих рост. В свою очередь это может избирательно влиять на скорость роста различных организмов в смешанной бактериальной культуре, в результате чего один нли другой организм смешанной популяции начинает количественно преобладать. Из накопительных культур бактерии обычно выделяют путем их пространственного отделения от других форм на твердой среде, где они растут в виде колоний.
Для микроорганизмов, не растуших на твердых средах, можно использовать метод предельного разведения, последовательно перенося клетки в отдельные пробирки с жидкой средой. Поскольку обычные методы выделения не дают абсолютной гарантии чистоты получаемых культур, некоторые исследователи применяют более 278 а получение нАкОпительных и чистых культуР сложные приемы, с помощью которых отдельную бактериальную клетку выделяют из смешанной популяции, используя для получения клона микроскопический контроль.
В этой главе мы приведем специфические примеры огромного многообразия и нередко изощренности методов накопления, используемых в бактериологии, Во многих случаях для получения накопительной культуры определенной бактерии используют несколько различных подходов. Основное внимание в этой главе будет уделено практическим аспектам получения накопительных культур и выделения бактерий, однако в конце главы приведены ссылки на общие обзоры 11 — 4], в которых можно найти подробную информацию об используемых при этом принципах.