Методы общей бактериологии (том 1) (947292), страница 49
Текст из файла (страница 49)
На 1 л среды добавляют 4 мг СоС(» 6Н40. На 1 л среды добавляют по 100 мг Ь-цвстнна н Ь.триптофана. На 1 л среды добавляют 500 мг Ь.алаинна, 400 мг Ь-аргинина, 750 мг Ь-асцарагяиовой кислоты, 200 мг Ь-цветение, 760 мг Ь.глутамнвавой 1сислаты, 200 йг глнцииа, 500 мг Ь-гистндина, 200 мг РЬ-нзолейцннв, 200 мг Ь-лейцина, 600 мг Ь-лнзяиа, 150 мг ОЬ-метвонвна, 200 мг ОЬ.фенилаланина. 600 мг Ь-паолина, 400 мг ОЬ-серииа, 200 мг ОЬ-треониив. 200 мг Ь-триптофана, 100 мг Ь-тярозина н 300 мг Ь.валина. *На 1 л средм добавляют по 200 мг каждой нз следующих аминокислот; Ь-трнптофзиа, Ь-цистенна, ОЬ-треоиииа, О РЬ-метнонвна, РЬ.валява, ОЬ-лейцияа, РЬ-нзолейцииа. ОЬ-лизина, ОЬ-феннлаланина, Ь-тнразнна, 1:пролина, глицииа, ОЬ-аленина, О- ргинина.
ОЬ-серина, Ь-глутампновой кислоты н )..аспарагиновой кислоты. На 1 л среды добавляют по 0,2 г каждой из следующвх аминокислот: ОЬ-аргинниа, РЬ-валина, Ь-глутамяяовой кислоты, ОЬ-сернна, ОЬ-гистидииа, ОЬ-изолейцвиа, ОЬ-лейцнна, Ь-тирозива, ОЬ-метнанина, ОЬ-трпптофана в ОЬ-фенилаланииа. и Замена гидролиаата казеина восемнадцатью амянокислотами ие влияет на иит наивность и скорость роста.
е Исключение нз среды гидроливата казеяна не влияет ва рост. Это доказывает, что соли аммония могут служить единственным источником азота. Ю На 1 л среды добавляют по 6 мг адеиина, гуаиина, ура. Продолжеяяе табл. 7.(! цила и ксантниа. Гуанян нли ксаятин удовлетворяют потреб- ности бактерий в пуринах. Для некоторых штвммов доста- точна добавять адеянн. " На 1 л среды добавляют по 5 мг гуанниа, адеиияа, ура- цила и ксаитина.
У На 1 л среды добавляют по 5 мг ксантнна, гуаиина, аденииа, тимина и урацила, з На 1 л среды добавляют 100 мкг биотииа, 10 мкг фолие. вой кислоты, 2 мг никотиновой кислоты, 1 мг паитотената кальдия, 2 мг соляиокнслого пиридоксииа, 1 мг рибофлази. ва и 1 мг соляиокислого тиамина. Пантотенат, иикотняовая кислота и бнотии, необходимы лля роста всех штаммов или значительно стимулируют его. аа На 1 л среды добавляют 5 мг пиридоксаля, 1 мг ни- котиновой кислоты, 1 мг пантотената кальция, 1 мг рибо. флавииа. ! мг тнамниа.
1 мкг витамина В,т, 10 мкг бнотииа, 5 мкг л-амияобевзойной кислоты и 1О миг фолиезой кислоты. аз На 1 л среды добавляют 10 мкг бвотнна. Потребност и биотнне можно удовлетворить за счет биоцвтниа нли де- тиобиотина, а также 1000.кратного избытка таяна 60 илв олеата натрия. сс На 1 л среды добавляют 5 мг никотиновой кислоты, 1 мг пантотевата кальция, 1 мг пирилоксияа, 100 мкг биотнна я 0.01 мг лейковорнна. Некоторым штампам Рещососсиз не- обходимы мевалоиовая кислота и рибофлавии. бб На 1 л среды добавляют 2 мг тнамнна.НС(, 2 мг панто- тената кальция, 2 мг рибофлавина, 2 мг янкотинамвда, 1 мг пиридоксамнва 2НС1, 1 мг пярндаксаля.НС(. (мг пнрндоксн- иа НС1, 0,1 мг л-амйнобензойиой кислоты, 0,05 мг биотииа, 0,05 мг фолиевой кислоты и 0,005 мг кобаламвна.
ее На 1 л среды добавлиют 2 мг никотиновой кислоты н 0,5 мг биатнна. Таблица 7.12. Состав синтетических (С) и полусинтетнческих (В) сред ай 54 — 66 для бактерий, перечисленных в табл. 7.1 Комлоневты 55С6 57СЛ басе 59СТ 5»Са 65С 66С 61С" 62С Глюкозам (г) Ацетат натрия (г) ХН»С1 (г) 1О 25 1О 10 ЗО 10,4 2,0 10 !О 20 1О 10 5,0 10 6,0 З,О 0,5 1,0 ИааНРО» 2Н»0 (г) Ц КтНРО» (г) 3,3 1,75 0,6 8,7 5,0 3,0 0,5 8,3 0,5 1,6 0,5 1,0 0,5 1,0 0,6 З,О 8,7 1,5 0,5 0,5 1,0 0,0! 0,01 1,0 0,001 0,01 0,01 0,01 З,О 20 10 40 1и 40 1,0 1О 10 13 1О 0,2 0,5 0,2 0,7 0,2 0,2 0,5 0,5 0,02 0,02 0,2 0,2 0,3 0,3 0,3 0,01 10 10 1О 10 2,5 1,0 10 10 1О 10 10 10 КНвРО» (г) )т!6С! (г) КС! (г) МпС!в 4НгО (мг) МКБО».7НаО (г) СаС!в 2НаО (г) Ре50» 7НвО (мг) Количество 1в единицах, указанных в колонке 1) иа ! л среды 10 1,67 от 16,7 16,7 о 0,01 К Продолжение табл.
782 Количество ( в единицах. Указанных в колонке 1) яа 1 л среды Компоненты айв) ОЯС ООС ас" Дан Дад Да' Дат Микроэлементы Аминокислоты Даш дааб Да' Да' Дах Даз Ддаа Дап 6 0ее Кислотный гидро- лизат казенка !Г) Даай Да)' Дави з. О 4 дйзз Да)' Да)) Даты Пурииы и ииримидитз ны Витамины Даз' Да)г Даоо Д Рп 7,! 6,8— — 7,0 Дарг Дапп Да"в Дашш 6,8 7,8 Да" Дахх Дари 6,0 О и 7,0 7 6 7,0 7,0— — 7,4 рН 7,0 7,4 6,5 а урожай клеток на синтетической н комплексной средах одинаков, но в первом случае количества образуемого зн.
теротоксина в 7 раз виже, чем во втором. Для роста в аназробных условиях необходимо добавлять к среде пурнны н урацнл нли ацетат (1О мм) нлн пируват. Ацетат можно заменить мевалонатом, взяв его в 1О раз меньше, чем ацетата. 0 Глюкозу автоклавнруют с другнмн компонентами среды. В присутствии фолнновой кислоты (цитроворнна) зта среда поддерживает хороший рост некоторых штаммов Рв) ососсиз с Глюкозу звтоклавнруют с другнмн компонентамн среды. На 1 л среды добавляют 20 г цнтрата натрия. 7 Глюкозу автоклавнруют вместе с другими компонентами среды.
На ! л среды добавляют 0,01 г олеиновой кислоты, г таина ЗО (детокснкант оленнавой кислоты) и 20 мг фер. меитатмвного гидролнзата «азенна. Этот гндропизат можно частично заменить 1О мг глутамина, который отдельно стерилизуют фильтрованием. й Глюкозу автоклавируют вместе с другими компонентами среды. На 1 л среды добавляют 000 мг ь.аскорбиновой кислоты, ЗОО мг ь-глутамнна (отдельно стернлнзуют фильтрованием) и 1 мг спермина НС).
'Глюкозу автоклавируют вместе с другими комоанентамн добавляют 0,1 г Е-аппаратика. Добавление к 1 л среды 0,1 г ацетата аммония н 1 г НаНСО» улучшает рост. з ' Для Васьйиз сггеиз и В. Ьгешз необходимы некоторые кислоты, перечмсленные в среде 56С. но витамины для внх ие требуются. В. а!ое» нуждаются в аминокислотах и тяами. ие, В. с»гси)алз н В. сааба!алз — в аминокислотах и обычно тнамнне н биотине, В. зрлаелсиз — в аминокислотах, тнамнне и бнотяне. В. Раз!еигб — в аминокислотах, тнамнне, бво. тане, никотиновой кислоте в аммония (1% НН»С)). Опти" мальный Рост В. Рпз!еигб наблюдается при РН 6,5 и тем.
пературе 26'С. В. ап!Лгасш чашке растет на среде с ами. нокнслотамн. Для некоторых штаммов нужен тиамян, их рост стимулируется аденознном в (нлн) адениловай кислотой. Большинство видов этого рода являются аэробиыми, однако некоторые штаммм, например В. сегена, могут также раста в анаэробиых условиях. Васц1нз зиЫВ!з, В.
Всйеш/опп!з и В. л»еба!ег!иш ие нуждаются в витаминах. В. Рилб)ш и В. Ро1угпкха в качест- Е ве источника азота используют соли НН»е) аии нуждаются также в бнотнне. В. »пасегалз Растут на среде 69С прн добавленив в нее биотвиа в тнамнва. 2 В качестве восстанавливающих агентов к среде добавляют меркаптоацетат (0,05%) н цнстенн (0.025%1. для быстрого и равномерного роста необходима СО». Некоторые штаммы С!оз!г!Удит Ьа!ицлнт растут на синтетической среде только после добавления фермевтатнвнога гидролизата казеннэ (5 г/л) нли заменяющих его факторов: НаНСО» (200 мг/л), дрожжевого экстракта (5 г/л) нлн оксалацетата (5 г/л). Клетки С. Ра аЬо/ибпнт (тип А и В) и С. зрогокелез хорошо растут на среде 60С, однако прн этом титр тансина в 7 раз ниже, чем прн росте на бульоне из экстракта сердца н мозга.
Ь На 1 л среды добавляют 5 г тноглнколата натрия На среде 61С клетки растут хуже, чем на бульоне из экстракта Серпца н мозга. ! На 1 л срелы добавляют 0,15 г ннтрилотрнуксусной кислоты н 0,01 г На»5 9Н,О. Нужное значение РН среды устанавливают с помощью гриса. среды. На 1 л среды добавляют 500 мг аскорбиновой ннслоты, 1,67 г ацетата калия н 1О мл раствора твин-олеата, содержащего 2 г таина 40, 20 мг олеета натрия и воду до 20 мл.
л» Еслв яет специальных указаний, глюкозу тернлизуют отдельно автаклавнрованнем, а затем добавляют ее с со. блюдением правил асептики к стерильному растмзру других компонентов. Стернлязуют отдельно фильтрованием. о Вместо КзНРО» используют (НН»)зНРО». На 1 л среды добавляют 2 мг молвбдата аммония. На 1 л среды добавляют 5 мг ЕпБО» 7Н»О 4,6 мг СпбОмбН»О, 9 мг СоС)ь 6 мг СаС)з 2Н»О. 14 мг На»В»Оп 1ОН»О н 2,5 мг (НН»)зМоО». г На 1 л среды добавляют 0,114 мг Н»ВО», 0,31 мг СпбО ЬН О, 2,6 Ре(НН )(БО ) 6Н О, 0,01 мг Со5Ое7Н»О, 0,12 мг Мп5О< Н»О, 0,07 мг (НН»)»Мо»Ом 4Н»О н 1,б мг Еп5О УН»О.
3 На 1 л среды добавляют по 25 мг глициие, валина, лейдина, треоиниа, феннлаланниа, тирозниа, цистеииа, метвонииа, пролниа, аргинина, гнстидмна и триптофана. На 1 л среды добавляют Зу) мг ОБ.а.аленина, 242 мг Е-еРгннина.НС), 400 мг БгаспаРагина, 100 мг аспаРагииовай кислоты, 50 мг Бщнстенна, 500 мг глутаминовой кислоты, 100 мг глнцнна, 62 мг Е-гнстнднна.НС!, 250 мг ОЕ.нзолейцииа. 2В) мг ОБ-лейкина. 250 мг Б(лизина НС), 100 мг ОЕ-метионнна, 100 мг ОБСфеннлалаинна, 100 мг Е-проявив. 50 мг ОБ-гарина, 200 мг ОБ-треоинна, 40 мг ОЕ-трнптофана, 100 мг Е-тирознна в 250 мг ОЕ-валина.
На 1 л среды добавляют 100 мг Е-зсцарагннэ, 400 мг Б-цветение, 50 мг Б-трнптофана н 200 мг глнцниа. Продолжение табл. 7.12 На 1 л среды добавляют по О,! г Ь.аланниа, Ь.аргннива, Ь-аспарагввоаой кислоты, Ь.аспарагинз, Ь-оксипролнна, Ь-язолейцниа, Ь-лейцниа, Ь-лизина.НС1, Ь.метвоняна, Ь.иорлейцииа, Ь-фенилалзвняа. Ь-пропана, Ь-сервиз, Ь-треоиина. Ь.трнптофане, Ь.тврозвиа, Ь-валина, в также 0,03 г Ь-цвстеива ЙС1, 0,05 г Ь.-станина, 0,5 г 1:глутамивовой квслоты. 0,2 г глицвиа, 0,2 г !.-гистядииа.НС1 и 0,02 г Ьгглутамииа Ястерилнзуют отдельно фильтрованием!. Ш На ! л среды добавляют 80 мг РЬ-алаивна, 100 мг РЬ-аспарагиноеой кислоты, 160 мг Ь-аргниина, 500 мг Ь-глутвмянозой кислоты. 80 мг глицниа, !60 мг Ь-гистидива, !ОО мг Ь-лейцииа, !60 мг РЬ-метнаввва, 200 иг РЬ-фенилаланина, 60 мг РЬ-сорина, 200 мг РЬ-триптофана, 140 мг Ь.тирозниа, 260 мг Ь-цнстениа в 320 мг РЬ-валява.