Методы общей бактериологии (том 1) (947292), страница 46
Текст из файла (страница 46)
КНа ! л среды добавляют следующие компоненты: 1О г сахаровы, 1,5 г ацетата калия и 0,5 г аскорбиновой кислоты. Среду используют для получения ка» посевного материала (ивокулита), так и биомассы. Добавив к среде 1,5 — 2гь агара, ее используют дли поддержания роста миирооргаыизмов, пересевая каждые 2 нед в столбики. Все компоненты автоклавируют вместе. Ь На 1 л среды добавляют также 1 г цнстениа. НС), 1 г растворимого очищенного крахмала, 1,5 мг НаМаОа2НзО, по 20 мг адениисульфата урацнла, ксантина и тимина, 100 мкг Сод и 1 мг олеиновой кислоты. На этой среде хороша растут штаммы АсКлашусеэ Шгаедй А.
Ьощз и некоторые виды Сагулееасгешпш, (.ас(оЬас(Дла Ы)Ыиз и Ьер)а(г(сща ЬпссаЬз Крахмал суспендируют в небалыпом количестве холод. иой воды, вносят суспензию в кипящую воду и ветен добав- лают остальные компоненты среды, кроме глюкозы, которую автоклавируют отдельно. Эта среда пригодна также для поддержании кулыуры. Для столбиков используют 0,7(ь-иый агар. Добавляют 30 г сакарозы. 7На 1 л среды добавляют также ! г кислого цитрата ам.
мания и !00 мкг 1еггенепз.фактора. э Для большинства сред рекоменхуетс» стерилизовать глюкозу отдельно от других компонентов среди (автоклавированием нли фильтрованием через соответствующие мембраииме филыры), а затем добавлять ее с соблюдением правил асептики. На 1 л среды добавляют 1 мг цнграта железа, На 1 л среды добавляют 100 мг 1-цистеина НС) и 50 мг Оь-трын!афана. На 1 л среди добавляют 0,5 г цистеина НСЕ о На 1 л среды добавляют 1 г гистидннэ.НС1 НзО. На 1 л среди добавляют ! мг ыикотнновой кислоты, 1 мг соляыакнслаго тиамина и 1 мкг биотииа.
На 1 л среды добавляют 0,5 мг рибофлавина, 1 мг тиамииа и 1 мг пантотеиата кальция. Не 1 л среди добавляют 16,5 миг салянокислого пиридаисамнна. з На 1 л среды добавляют! 2 мг тиамннв.НС), 1 мг пиридоксынэ НС), 0,5 мг пиридоксамина.2НСК 0,5 мг пирндаксали НС1, 2 мг паитотеиата кальция, 2 мг рибофлавииа, 1 мг никотиновой кислоты, 1 мг иикотинамида, 100 мкг л-аминобензойиой кислоты, 50 миг биотиыа и 50 мкг фолиевой кнслаты. Концентрат бульона из мозга я сердца, 37 г(л.
л Концентрат бульона нз мозга и сердца (18,5 г)л) (имеется в продаже) и гении (250 мкгул). Таблица 7.7. Состав комплексных (А) сред йй 64 — 75 для бактерий, перечисленных в табл. 7.1 Конноненты 66АЬ 76А 7(А 72АГ 65А 64А 74А 275А т 67А 7ЗА 10 2,0 — 10 10 ф 1,0 10 6,0 1О 1,0 1О 0,3 5,0 1,0 0,2 З,О 0,5 0,25 о ГЗ 1,0! 0,2 О,З 0,1 4,0 0,1 5,0 2,5 5,0 Да" 3,0 1,0 !,0 1,0 1,0 5,0 0,1-1,0 О,! 10 0,1 5,0 5,0 2,0 10 10 Да! 7,8 1,0— 2,0 Да) Да" 7,6 — 7,8 7,0 — 7,2 6,5 — 7,0 7,4 — 7,5 7,0 6,8 7,3 7,4 ?,0 Глюкозак (г) Гликерии (г) (Хна)зЗОз (Г) ХазнРОз (г) Кнзроз (Г) Кзнроз (г) МаЗО ?Н О (г) ХаС1 (г) Го СаС!з 2Нзо (г) еозт РеЗОз 7Нго (мг) Аминокислоты Мясной экстракт (г) Дрожжевой экстракт (г) Кислотный гидролизат казеина (казамииовые кислоты;г) Ферментативный гидролизат казеина (казитон; г) Нсптон (г) Триптои (Г) Спепиальные среды рН Количество (а еднннцах, указанных а колонке !) на ! л среды О ы 3 а Смешивают с 3 л лошадиной сыворотки, фильтруют и стернлизуют фильтрованием, 3 Добавляют растворимый крахмал (2%> и СаСО, (0,1%) Добавляют растворимый прахмал (0,1%), СаСОг (О.!%> н агар (1,6%).
и Вместо дистиллированной воды используют водопроводную. е На ! л среды добавляют 0,1 г НагБОь 0,5 г тиоглнколатз натрия, 3 г фитона (ВВС) и !7 г триптиказы (ВВЕ). Добавляют 0,2 г СаСОз на 1 л среды. Для большинства сред рекомендуется стерилизовать глюкозу отдельно от других компонентов средм (автоклавпрованпем или фильтрованием через соответствующие мембранные фильтры) и затеи добавлять ее с соблюдением правил г.э асептики. с'» й Добавляют 0,25 г йщистииа иа 1 л среды.
! Активный компонент дрожжевого экстракта был выделен и охарактеризован как один или кесколько пептидов е мол. массой-!000 (2011. 7На водяной бане готовят овсяную кашицу нз 25 — 65 г плющеного овса и 1 л водопроводной воды. Смесь фильтру. ют через марлю н, пока она еще не остыла, доводят ее объем до ! л. Затем добавляют 18 — 20 г агара и доводит рН до 7Д с помощью НаОН (232!. з Среда Хайфлика и Чэиока (77(; РРЕО-бульон (ОКсо)— дегядратироваиная среда, которая содеригит экстракт нз сердца крупного рогатого ската с пептоиом и НаС! (34 г)л): лошадиная сыворотка (200 мл); 25%-иый экстракт свежих пекарских дрожжей (100 мл); 1%-яый агар (предпочтительнее полумягкий). )Хелательиа влажная атмосфера. ! На 1 л среды добавляют; 21 г РР1.С-бульона (ОНсо).
70 г сорбнта, ! г фруктозы, !О г сахаровы и 200 мл лошадиной сыаапотйи. СОг (5%) в атмосфеРе Нз сгнмУлиРУет Рост бактерий нз твердых средах. !и Х 1 О 'и Я Таблица 7.8. Состав синтетических сред (С) 78 1 — 14 для бактерий, перечисленных в табл. 7.! Компоненты тсз зеС зЗС !ЗС ЗС ЗСз ЕС7 тС ЗС ВС! зСС з!С' зсо 2,0 1,0 1,0 1,0 0,2 2,0) 0,2 2,0 1,0 1,0 О, 5 в 0,08 1,0 — 2,0 0,25 0,5 1,0 0,53 0,07 съ О 0,5 Ц ХазНРО!.2НзО (г) КзНРО! (г) 0,04 5,24 1,74 ,08з 0,48 0,9 0,01 0,0 270 1,0 0,5 0,04 0,08а 2,77 0,33 1,0 1,0 0,6 1,!3 1,06 2,0 10 !О 0,33 0,5 0,7 0,03 0,005 2,0 5,0 100 0,5 0,075 0,2 0,2 0,05 0,05 0,1 22 0,0! 0,25 0,0! 8,0 1,0 0,094 0,05 0,5 0,005 2,6 0,2 О,!5 0,1 0,004 0,1 О,ЗЗ 0,2 Глюкоза/ (г) Глицерин (г) М!зС! (г) ИаХОз нли КХОз (г) КНзРО! (г) Трио.буфер (г) ХаС1 (г) КС1 (г) МпС1з 4НзО (мг) МиБО!.7НзО (г) СаС!, 2Н,О (г) Количество !а единицах, указаниях в колонке з! ва ! л среды 3,5 )5 0,5 0,5 2,0 Г050ь 7НэО (мг) Микроэлементы Аминокислоты Витамины Твин 60 (мг) Твин 80 (мг) Двл дйо Дпл Дап Дам Да" 7,0 6,8 6,5— — 7,6 7,3 6,5— — 7,5 рН а Дополнительнме компоневты: 0,2 г вблочиой кислоты Я и 0,005 г ЭЛТА, РН 6,3.
Растворы, содержащяе 1,5 г ХаНСОз ГО И 1 Г Хаз3 ОНзО, СтЕРИЛИЭУЮт фнЛЬтРОзапнЕМ ОтДЕЛЬПО. 5 Отдельно фяльтроваянем стерилиэуют растворы, содерасащве 20 ! ХанСОэ н 1 г Хаев ОНзО, и ДобавлЯют их к стеркльной среде. с Лобавляют и другим компонентам среды 0,2 г ЭДТА и простериливованные фильтрованием растворы, содержащие 12,76 г ХазСОз н 0,1 г Ха,б 9Нзо.
д Добавляют 0,025 г ЭЛТА, а также 2 — 6 г яблочной ккслоты в качестве источника углерода. е Урожай клеток увеличиваетсв нри добавлении иа ! л сРеДы 0,5 г аЦетата натРиЯ, 2 г ХаНСОз, 42 г СаЬОз в 0,001 г ЭДТА. у Для Мех((анх Лого(аеас глюкозу как источник углерода можно заменить галактазой илн сахаровой (1 г(л), а хлористмй аммоний в качестве источника азота — гйутаматом натрия или ХаХОэ (1О г)л).
На 1 л среды добавляют 0,1 г глицерофосфата натрия. 20 Дв" Дв' )01 Дн" Дв' двээ дау двх дааа Дах Щ) Ч 7,4— — 7,6 7,0 6,3— — 6,6 б — 7 7,0 6,0— — 7,5 7 9 7,2— 7,8 ю О Рз М ф Уч ы о Е Источниками азота служат глутамат натрия (0,5 г/л) и аспарагияовая кислота (0,5 г)л). е 1 л среды содержат 20 мл беавитаминиого минеральяого основного раствора Хатиера, В мпкификации Коэиваэир в др. (35] этот раствор содержит следующие компоненты: 1О г нитрилотриуксусной кислоты (растворенной н иейтралиэоваииой с помощью КОН); 14,45 г Мибоз 7НэО, 3,33 г Сао)э.2нзо.
9,25 мг [Хне)зМогоэч 24НзО, 99 мг Рсэоч 7Н*О, 50 МЛ СМЕСИ МЕтаЛЛОВ № 44 (СМ. Кяжв) И Дн. стпллнрованиую воду — до ! л, вН доводят до 6,6-6,3. Смесь металлов № 44 содержит в 106 мл 250 мг ЭЛТА, 1,095 мг ХпЬОм7НэО, 500 мг РеЬО,.7Н,О, 154 мг МпэО, Н,О, 39,2 мг СИВО, ЬН,О, 24,В МГ СО(ХО,), ЬН,О Н 157 МГ Хаги,сг !ОН,О. Чтобы предотвратить выпадение осадка, слепует добавить несколько капель 6 и. Н,ЬО„ 1 На 1 л среды добавляют 0,5 г аспарагина и 0,01 г ЭДТА.
Для болыпииства этих сред глюкозу стерилнзуээт отдельно (обычно автоклавкроваиием) н затем с соблюдением правил асептики добавляют ее к стерильным растворам других компонентов з Автоклавируют отдельно н затем с соблюдением правил асептики добавляют к другим компонентам. Стерилизуют филырованием отдельно. На 1 Л СРЕЛМ ПОбазЛЯЮт; 0,1 МГ ЕПЗОмТН,О; 0,5 МГ НаВОз' 0,2 мг СоСН ЗНзО: 0,01 мг СвС(з 2НзО' 0,02 мг Х~С>» 6НаО; 0,05 мг НааМооз 224О.
На 1 л сРеДы Добавлают: 0,1 мг Епйоч ТНтО: 0,1 мг НзВОз! 0,05 мг СаС!т.бНаО и 0,005 мг СпОз 2НзО. на 1 л среды добавляютг 2,4 мг зпзо, тн,о; 26 мг НзВОз! 0,4 мг СпС1кбНаО н 7,5 мг НазМооч 2НзО. Р На 1 л среды добавляют 0,05 мг ЗпЗОмТНзО' 0.05 мг НзВОз', 0,005 мг СоС(кбНзО: 0,025 мкг СпС(з 2НзО и 0.005 мг На,моо ЗН О. ьз "На 1 л среды добавляют 1 мл смеси следующих микро. злемеитов: растворимых солей В, Ре и Мп (по 0,5 мг/л) и Со, Сн, Мо и Еп (по 0,01 мг/л).
На 1 л сРеды ДобавлЯют: 0,1 мг Зпбоч ТНтО, 0,1 мг НзВОь 0.1 мг СпС1г2НтО, 0,05 мг НагМаОк2НгО. На 1 л сРеДы ДобавлЯют: 6 мг (ННотре(ЗОВг в 4 мг С а С Оз. Необкодимы аминокислоты (г/л): фенилалаиин (1); лейии (1); изолейцнн (0,5); валин (О,1> и метиании (0,05>. Доавляют также аминокислоты, стимулирующие рост бактерий (г/я>: глицни (0,05); пролин (0,5); аспарагии (0,44); алании (1,0); лизин (0,25>, треонии (0,1) и трпптафан (1,0). Независимо от способности стимулировать рост бактерий к среде добавляют (г/л) гистидни (0,05>, аргиини (О,1) и серии (0,11. Продолженно табл. 7.8 и Источником азота служат (в концентрации 1 г/л) лейцин, пролив, аспарагин, алании, триптофан, аргииии, аспарагиновая кислота и цистин.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
