Методы общей бактериологии (том 1) (947292), страница 43
Текст из файла (страница 43)
7.1 Оптимальнви температура роста, 'С Источник дан- ных Х'лгП, Актиномнцеты н родственные нм бактерии: АслпоМ[Ма йсбо!от!сас Асйпотусез Ьоои' Асбпор!апез рМНрр1- пепзну Атогрбозрогапу!ит аигапВсо1ог' АтриуапеВа геди!ау!з Агасбл!а ргоруопуса"» АгббгоЬас!ег !егге- уелФ Вайепопета та!гиСбайуы Рн ВсгЫобас!егуит б!11- Нит' еяя СеВи!отопая [!аогуепае Согупебас!ег!ит Ьоо!зд ЛЛЛ Согупебас!ег!ит йрб!ег!аес Рас!у!озрогапушт аигал!!асит' Регта!орМ!из солуо!епжя' "" Вибас!еЫит забитгеитс, сгс Реос(егта!орб!!из обзсигиФ Кйазагоа ригригеа' 50 — 58 37 24 — 26 26 — 27 18 — 35 37 20 37 30 37 [196] [149] 37 [226] 37 [66] 37 [87[ 37 24 — 18 [!32] 27 [!38, 166) 25 Кигббса еор[йч М!стоб!яроги гояеа' МссгоеуоЬозрог!а ср легеа' М!сготопозрога оба!- сел' Мустера!уярога бгеосса!елас МусоЬас!епит рйе!' [60] [42] [!25[ [95] 26 24 — 26 28 — 37 [125] 28 — 45 [!55) 220 Групоа, род н виды Буквенно-цнбровой е ключ к среде ЗОА (табл.
7.4) 60А (табл. 7.6) 6!А (табл. 7.6) 61А (табл. 7.6) 61А (табл. 7,6) 60А (табл. 7,6) 62Л, 68С (табл. 7,6, 7.13) 6ЗЛ, 56С (табл. 7.6, 7.12) ЗОА (табл. 7А) 64А (табл. 7.7) ЗОА, 69С (табл. 7.4, 7.13) !2А, 70С (табл. 7.2, 7.13) ЗОЛ, 71С (табл. 7.4, 7.13) 65А (табл. 7,7) 12А (табл. 7.2) 66А (табл. 7,7) 61А, 72С (табл,7.6, 7.13) 32А (табл. 7.4) 67А (табл. 7.7) 69А, 73С (табл.7.7, 7.13) 68А (табл. 7.7) 69А, 73С (табл. 7.7, 7.13) 70Л, 74С (табл,7.7, 7ЛЗ) [41, !!6] [64, 89, 160! [37, 220] [42] [42, !84] [89, 160] [25, !73] [!02] [197] [73] ЧАСТЬ П. РОСТ Продолжение табл. 7.1 Овтямэльяав температура Роста, 'С Буквенно-цнфровод ключ к среде э Источник данных Труппа, род и вида!о Х!Х. Микоплаэмицэгэ Асйо!ар!пата (а(04(а!Рй*" ЕЯЯ Мусор!азпча туса(- п)еээ», ™ Зр!гор!азта сйг(ьж 7?геггдор!дзига пп(г(орй(1мш! (170, 171] (77, 200) 37 ЗЗА, 78В (табл.
7.4, 7.13) 7ЗА, 79В (табл,7.7, 7.13) 74А (табл. 7.7) ?ЗА (табл. 7.7) 33 — 37 32 69 (36] ]43, 201] а Бактерии сгруппированы согласно а-му изданию «Определители бактерий Берги». Ь Состав сред, обозначенных с помощью буквенна-цифрового ключа, приведен в табл. 7.2 — 7.12. Комплексные, нлн «еочнщениые, среды обозначены буквой А, полусннтетнческне — буквой В н синтетические — буквой С. с Анаэрабы.
Анаэробные условия создаются с помощью одного нз мего. дов, приведенных в гл. б. 3 Некоторым штэммам необкодим витамин В~г (2 мкг на ! л средм). е Для этих видов используют модифицированную среду 4(С (табл. 7.1!), заменяя в иеа интрнты на соли аммония; энергия постаиляется прн окислении МН» до МО» . Источником углерода является СОэ, содержащаяся в атмо. сфере.
Если вместо малага нсполщуются другие источники углерода (например, этанол или бутнрат), то может понадобиться Сот. и Рс талэсьгалиш и и. (ение растут также на среде 4с (О!ьэоп, таьиа, %ЬИщап, личное сообщение). Ни один из этих штаммов ие нуждается в биотиие. Нуждаются также в тиамине и никотиновой кислоте (! мг каждого витамина на ! л среди). На этой среде рвете~ также ж сарзи1а1а (чья потребность в витаминах удовлетворяется тольио за счет тнамина) н Л. Рп. 1иэ(г(э. Последняя наряду с биотином нуждается в и-аминобеэзоаиоа кислоте (О,! мг(л среды) ()РШ!шап, О!Ьзоп, ТаЬИа, личное сообщение).
1 Аэробы. Для стимуляции н инициации роста необходим экстракт нэ бактериальныь клеток. д 5. Ьуайла [100 можно выращивать на синтетической среде с гхюкозаа, лактозой нли сахарозоа в качестве источника углерода, нитратами нлн соля. мн аммония в качестве источника азота н в присутствии витамниоз В~ н Ви. Лучший рост достигается прн использовании в качестве источиниа зо а ор.
гзннческнх соединений, например глутамата нлн пептона 1 Вместо биотина необходим витамин В~» (40 мкг!л). Ко всем средам для С, Ло(оаос(егожгг необходимо добавлэть Мао! до кончентрацнн 27». Потребность С. Ыбжоижеэ в витаминах удовлетвариется рибофлавнноч 000 мкг/л). о Мнкроэ грофалы. Источником углерода служит СО, Перед разливам стернльного водного раствора агара, содержащего свежеосаждениос Геб, среду аэрируют с помощью СО» в течение 10 — 15 с Ре5 готовят.
смешивая в кипящей дистиллированной воде эквнмолярные «олнчесгва сульфата аммония и железа(11) и сульфида натрии. Осадок несколько рзз промывают стерильноа дястиллира- г. ВИОХИМИЦЕСКИЕ ФЛКТОРВ( Продолдкелие табл. 7.1 ванной водой, декаитируя ее. Реа можно вносить не в агар, а иа дно культуральной пробирки. Необходима СОз; рост стимулируется гумусом нли почвенным экстрактом, Потребности в витаминах: кроме бнотниа необходимы тнамин (5 мг)л) и витамин Вм (0,1 мг)л).
з Непатогенная форма внрулентнай Тгероаето ра(1(бп!л) внрулентную фор. му т. ра1ьпил! яе удалось культивировать гп ы(го. Наибольший урожай клеток получают при эабуфернванин среды 0,033 М Н-2-гндракснэтнлпиразнн-Хь2-этансульфановой кислотой (НЕРЕЗ), пиперазяибм )'-бнс (2.этанолсульфоновой кислотой) !Р!РЕБ) нлн Н-трио(гидроиснметнл)метил.2-амнкозтансульфоновой кислотой (ТВЗ) нлн периодическим до. бавлеиием НаНСОз. Попытки вырастить микроорганизм на полностью синтетической среде не узенчалнсь усаехом. Концентрацию дрожжевого экстракта можно уменьшить до 0,05%, но исключать его совсем нельзя. Потребности в витамннак (бнотнне, рнбофлавине и витамине Во), вероятно, болыие, чем было показано ранее, так как в используемой среле содержится 0,5%.ный дрожжевой экстракт-богатый источник витаминов.
(НЕРЕ5 и другие реактивы получены от Фирмы 5)йша нлн Са(Ыосйеп!.) и Известна также синтетическая среда, поддерживающая рост этого микРоопоганнзма в мнкРоаэРобных УсловиЯх (18). Для ЯлгоЬас1еггип! гиЬ( необходимы также пантотенат (100 мкг)л) и ни. котиновая кислота (100 мкг)л). А. 1ише(асгепз «прои!о растет беэ этих добавок на синтетической среде с НигС! и глюкозой. ш В дефщцитной по азоту среде эти микроорганизмы фиксируют молекулярный азот, для чего необходимы следы мочнбдата А.
сйгососеиш в качестве источника азота использует также аммиак, нитрат в аминокислоты. Крайне устойчив к изменению РН (растет в диапазоне РН от 4 до 19). КартоФельную кожуру (125 г) кипятят в смеси глицерина с водой до того момента, когда она станет мягкой. Смесь фильтруют через марлю. выдержнва!от до тех пор, пока прошедший рашвор не станет прозрачным и декантнруют его. Затем добавляют соль и доливают водой до 1 л, Добавляют 15 г агара и нагревают до его полного растворения.
Стернлнзуют в 250-мнллнтровых колбах; к каждым 250 мл основного агара добавляют с соблюдением правил асептики 50 мл дефибрииированиой овечьей крови и перемешивают. Для получения жидкой среды агар нс добавляют. х Эта среда поддерживает также умеренный или слабый рост штаммов В. зи(з и В. аэог(из. Для культивирования этик видов подходит бульон для бруцелл (127). аа К автоклавиразанной н охлажденной среде добавляют с соблюденном правил асептики 25 мл эритроцнтарной массы вз крови человека илн 50 ыл дефнбринированной кроличьей крови. ЬЬ Клетки растУт в зтмосфеРе, состоашей иа 40%а на метана н на 60% из воздуха; вторым известным источником углерода является метанол. сс Только 6 из 146 испытанных соединений служат источннкамн углерода. Это й-оксябутнрат, ацетзт, бутнрат, валсрат, пнруват н сукцинат.
бб Для роста требуется лишь несколько углеводов как источников углерода. Необкодимая аминокислота — мегианнн. ее Углеводы (в том числе глюкоза) не «спольэуюгся в качестве источника углерода; однако таким источником служат многие органические вещества (например, насыщенные днкарбонозые кислоты, глнколат и тестостерон). Рост некоторых штаммов стимулируется метноннном (0,02%) и глутамнновой кислотой (0,1%) (нли они нуждаются в ннх), другим «еобходнма ннкотннозая кислота (100 мкг/л) Потребность в биотине не обнаружена Все другие потребности в питательных веществах сходны с потребностями АйгоЬас(еВигп Ытоделез (46).
22 Рост зависит от повышенной влажности атмосферы (195, 199). Апенин, аденозин, рибофлавнн н Флавииадезннмононуклеотнд обладают выраженным ннгнбнрующнм действием. ЬЬ Иэ аминокислот необходим только метнонин, однако другие аминокислоты стимулируют рост. Потребность в метионнне удовлетворяется его О- нлн 223 ЧАСТЬ 11. РОСТ Продолжение табл. 7,1 Ь.изомеуами или частично витамином Вн.
Рост не полностью синтетической среде хуже, чем иа среде с дрожжевым экстрактом. и В питательный агар добавляют сахарову (5%). 7! Клетки растут на цнтратнай среде Козера, нагорая содержит те хсс компоненты, что н синтетическая среда. Среда Козерэ производится фирмой Р) (со. К пмтательиому бульону, используемому для приготовления жидкой сРеДы, ДобавлЯют 10еэ-нгю сывоРоткУ. Рост иа твеРДой сРеДе УлУчшаетсЯ пРи повышенной влажности. !! Аэроб, на некоторые штаммы растут и в анаэробных условиях. шш Аназрабные условия достигаются пропусканием аргоиа Выход бно массы н скорость рос~а на синтетической среде вдвое меиьюе, чем на комп. лексиой.
Добавление витаминов н других факторов ие способствует улучшению роста иа синтетической среде. " Основные культуры сохраняют на среде с агаром, содержащей 4ОЪ рубцовой жидкости, глюкозу, целлобиозу н крахмал. оо Синтетическая среда отличается ат вышеупомянутой тем, что в ией используют 0,02 М фосфатиый буфер и иные, чем В-глюкоза, источники углерода. Источниками углерода служат ацетат, бутнрат, спирты, аминокислоты, пентозные сахара, углеводороды н соединения ароматического ряд». Среда отличается от вышеупомянутой присутствием аминонислот (см. сноску ю в табл.
7.10). Лактат н сукцинат являютс» основиымн источниками углерода и энергии для В са(аггьаьэ. 44 В отношении потребностей питания М Лологгьоеле сущсстнуют самые различные данные. Известна много природных вариантов; «роме того, у этих бактерий легко возникают мутации. Цастыс пересевы в лабораторных уело. виях приводят к появлению менее требовательных к среде гптаммов, ко~орые отличаются генетически от исходных нзолятав (Ьзпжогб, личное сообщение!. гг Окисляет аммиак до интрига н фиксирует СОб не растет в морской воде. ээ Значительно ннгнбнруется большинством органических веществ в концентрациях 10-' М. И 5. асОУосаййажиз является факультативным автотрофом) он растет быстрее на среде, содержащей минеральные соединения н 0,)йрный дрожжевой экстракт, чем на среде, содержащей серу. ии Исследования проводились на слегка загрязненной культуре: попытки дальнейшей очистки не яредпрннимались нэ-за очень низкой скорости развития Ме!Ьалоэагс(ла.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
