Методы общей бактериологии (том 1) (947292), страница 38
Текст из файла (страница 38)
Запрещается работать в камере с открытым пламенем. Лучше установить в ней электрический нагреватель, например типа Вас1!с!пега1ог фирмы Ьс!еп(!1!с Р го б ц с1 5. 4. Рекомеидуется установить в камере фильтр для газовых смесей типа фильтра, используемого для безмикробных камер (31апбагб Ва1е1у Еоп!ртеп! Со., Ра1аНпе, 11!.). Это поможет избежать загрязнения. 5. Следует часто менять палладиевый катализатор. Обычно это делают один или два раза в педелю. Вышедший из строя из-за токсического действия Н,5 или высокой влажиости катализатор можно регенерировать нагреваиием при !60 'С в течение 2 ч. Сразу после регенерации катализатор помещают в камеру и периодически проверяют его активность в струе Нр. .при этом катализатор должен быстро иагреваться. (Предупреждение: никогда не подставляйте под струю Н~ горячий катализатор, так как ои может воспламениться.) 6.
Поскольку Нг5 иеобратимо выводит из строя катализатор, стараются по возможности выращивать 193 чАсть и. Рост культуры, образующие Н,8, в закрытых емкостях и открывать их вне камеры. Для удаления НЬ8 из атмосферы камеры в ней устанавливают поднос с активированиым углем (8 — 12 меш), нанесенным на слой марли и помещают его под палладиевым катализатором. Такая обработка в течение 30 мин уменьшает уровень НЬВ в камере со 100 до! мкл7л !201.
7. В камеру, где присутствуег индикатор относительной влажности, ставят болыпой поднос с силикагелем. Когда влажность превысит 50А7ю силикагель необходимо заменить. Его регенерируют нагреванием до 160'С в течение 1 ч. 8. Для уменьшения испарения агаровые чашки хранят в полиэтиленовых мешках, а среду — в пузырьках или бутылях с завинчивающимися крышками.
9. В аназробной камере поддерживают постоянное давление. Обычные пластмассы пропускают небольшое количество газа; более того, газ проходит даже через поликарбонатпые пластмассы и резину. Если камера используется часто, то концентрация Нт в ней остается относительно высокой в результате открывания вентиля для продувания газа. Для поддержания достаточно постоянного давления необходимо добавлять смесь газов два раза в месяц. Снижение давления довольно быстро происходит в эластичных пластмассовых камерах. 10. Постоянно следят за утечкой газа. Слишком быстрое падение давления и сохранение высокой влажности свидетельствуют об утечке. На это указывает и то, что такие индикаторы ЕЬ, как ресазурин и феносафранин, начинают переходить в окрашенную окисленную форму.
Чаще всего утечка происходит через резиновые перчатки. Это можно проверить, поместив в камеру большой стакан с водой и погрузив в него каждую перчатку. Если надутая перчатка не теряет своей формы, это означает, что сколько-нибудь заметной потери газа не происходит. Если утечка в пластмассе происходит через швы, то ее практически невозможно обнаружить визуальным осмотром. Для обнаружения утечки полезен электронный детектор утечки (Соу ЕаЬога1огу Ргодцс(з, 1пс.) . 1!.
Среду, приготовленную стандартным способом вне камеры, необходимо сразу же после охлаждения по- 194 б. БИОФИЗИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ местить в камеру. Если не обеспечена строгая герметичность сосудов, горячая среда может испаряться из пробирок и флаконов из-за наличия вакуума в шлюзе. 12. Перед использованием приготовленную стандартным способом среду выдерживают в камере в течение 1 — 2 дней или до восстановления индикатора Е(г.
За день до работы стеклянную и пластмассовую посуду помешают в атмосферу инертного газа. 13. Предварительно восстановленную среду, приготовленную методом Хангейта, можно использовать сразу же после ее помещения в камеру. Она может оказаться необходимой для некоторых Организмов, например метанобразующих бактерий. 14. После стерилизации следят за тем, чтобы горлышки пробирок и флаконов с культурой оставались чистыми, так как их нельзя обжигать на открытом пламени в камере, 6.7.
ЛИТЕРАТУРА 6.7.1. Общая литература 1. Вгогеа В. Е. Аегапоп !п 1Ье виЬшегяеб спнпге о1 ш(его-огяап)вгпз, р. 127 — 174. 1п: 3. й. Иоггм апд О. %. и!ЬЬопв (ед.), Мейобв !п ш!сгоЫо1ояу, чо1. 2, Асабеш(с Ргевв, 1пс., Ие~ч Уог)г, 1970. 2. Вайа Е. Р„ОгхубоаЖ А. К. рН апд асиЬЬаве еяш!!Ьпа, р. 19— 58. !п: С. 1.опн, К.
д. Кйя апб %. М. аресту (едв.), В(осьегп!з!в' Ьапбьоой, О. Чап Иов(гапд Со., !пс., Иечг Уогй, 1961. Отличный обзор по рН, буферам, ионной силе н буферной емкости. Приведены обширные таблицы по составам буферов, константам диссоцнации слабых кислот и оснований, а также рН-индикаторам. 3. Оотоп О. Ргерага1юп о1 Ънпегв 1ог пзе 1п епхуше з(пб(ев, Ме!Ьобв Епхушо!., 1, 138 — 146 (1955). Содержит таблицы различных буферных систем. 4. Нгтеатап М, 1., Меавпгегпеп! о1 6!вяз!чеб охуяеп. (СЬеппса! апа1ужз, чо1, 49), допп %1!еу апб Бонз, 1пс., Иетч уогк, 1978. 5 НоЫетап Е.
К, Сато Е. Р., Мооге 67. Е. С. АпаегоЬе !аЬога1огу гпапна!, 4й ей, %гя(п(а Ро!у1ес1~п(с !пзьпн(е апд 6(я(е Оп!четв((у, В!асйвЬпгя, 1977. Отличное описание н иллюстрации анвзробных методов. 6. Ниада1е Е. Е. А го!1 йЬе ше(Ьод 1ог снн(чапан о1 Мпс1 апаегоЬез, р. 117 — 132, !п: 3. й. Иогпв апб В.%. КЧЬЬопв (едз.), Ме!Ьобв 1п ш!сгоЫо!оку, чо1. ЗВ, Асадегп(с Ргезв, !пс., Иетч Уогй, 1969, Хорошее описание метода Хангейта.
7. Засов Н.-Е. Вебох ро1еп1!а!, р. 92 — 123. 1п: 3. )1. Иогпз апб О. %. РОЬЬопв (ебз.), Ме(ьобз 1п ппсгоыо!оку, чо1. 2, Асабеш(с Ргезя, !пс., Иечг Уогй, 1970. Описано злектрометрическое измере. 195 ЧАСТЬ П. РОСТ ние окислительна-восстановительного потенциала и влияние иа него микроорганизмов. 8. Мигди1з В. Е, Н!ЗЛ-ргеззнге щ1сгоЫа1 рьуз!о!опу, Адщ МкгоЬ. РЬуз!о1., 14, 159 — 241 (1976). Хороший обзор данных о влиянии высоких давлений на микроограннзмы н нх жизнедеятельность. 9. Мипго А. 7..
5. Меазпгешеп1 апс1 соп1го! о1 рН ча1пез, р. 39 — 89. 1п; д. й, ХогПз апб О. %. Р!ЬЬопз (едз.), Ме)йода 1п щ!сгоЫо!ояу, чо!. 2, Асаньею!с Ргезз, 1пс., Хетт УогК !970. Содержит несколько полезйых таблиц по приготовлению буферов с различной нонной силой. 10, йнг! 5 7. РПпс)р!ез о1 ш)сгоЬе апд се!! спн)чабан, ЛоЬп %11еу апд Бонз, 1пс., Хечг УогК 1975, (Имеется перевод: Парт С. Дж. Основы культивирования микроорганизмов н клеток.
— Мс Мир, 1978.) Содержит главы, посвященные потребностям микроорганизмов в кислороде, способам его подачи, а также влиянию температуры, концентрации ионов водорода и активности воды. 11. Рг!ог В, А. Меазпгегпеп( о( ма1ег венчику 1п !аодз: а гещеч, 3. Рооб Рго1ес(, 42, 668 — 674 (1979). Обзор и оцениа методов измерения активности воды. !2. 5сон )Р В %а!ег ге1апопз о1 !ооб зройаяе ш!сгоогкап!зшз, Абч. Говд йев., 3, 84 †1 (1957).
Основные представления об активности воды, ее отношении к осмоляльности, методах контроля а и ее влиянии на бактерии. 13 5инег )г, В, Снгоп Р. М, Г1пейо(г(5. М. %адзмогйй апаегоЬ!с Ьас1епо!ойу шапна1, Згд еб., С тг. МояЬу 1.о., ВЬ 1лп!з,!980. Отличное переработанное практическое руководство, предназначенное главным образом для клинических лабораторий. В полезном приложении содержится список возможных ошибок прн работе с анаэробамн. 14. Тголег У А., СБПзпал Х. Н. В.
%а1ег асач!1у апд 1оод, Асабеппс Ргеяз, 1пс., Хетт Уог1г, !978. Отличная, авторитетная н хорошо написанная новая монография с главами, посвященными основным концепциям, методам, ферментативным реакциям, росту н выживанию микроорганизмов. 15. Ягапл В. 1. С., Соопеу С. 1, Рета!я А 1., Винил! Р., Нишрйгеу А, Е., (хг!!р М. В. Реппеп1а11оп апб епхуше 1есьпо!ояу, р. !57 — 193, Зойп %1!еу апд Зопз, 1пс., Хетч Уогй, 1979. Освещены принципы и методы измерения переноса кислорода.
16 йуеаз1 В, С. (еК). Напбьоой о1 сЬеш!з(гу апб рЬуз!сз, 571Ь еб., р. О-133 — О-137; О-!47 — О-152, СйС Ргезз, С!ече!апб, ОЫо, !976. Таблицы буферов, рН-стандартных буферов прн различных температурах, кислотно-основных ннднкаторон н консгант днссоциации кислот и оснований. 17, йуо!1е г(. 5. М!сгоЬ!а! 1оггпа1юп о1 ше(Ьапе, Абч. М(сгоЬ. РЬуЫо!., 6, 107 — 146 (1971). Иллюстрированное описание метода Хангейта. 6.7.2. Специальная литература 18 Аганйа А., Рге(ег В. Агп. Ю. С1!п. Хп(г., 25, 1329 — 1334 (1972). 19.
Агапйа А., 5уег( 5. А., Кеплер Е. В., Гге!ег !(. Арр1. М)сгоЫо!., ИЬ 568 †5 (1969). 196 Глава 7 БИОХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ' Б. Гирард, Э. Снелл Подобно другим организмам, все бактерии для своего роста нуждаются в экзогенных источниках энергии и доступных веществах, поставляющих углерод, азот, серу и неорганические ионы в такой форме, в которой оии могут быть использованы для синтеза клеточных компонентов. Однако отдельные виды бактерий сильно различаются по тому, какие вещества необходимы для их роста.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
