Методы общей бактериологии (том 1) (947292), страница 48
Текст из файла (страница 48)
т)ВО,.УН О, 2п30 и НаМоО 2НгО, 0,5 мг Сино, ОНСО и 20 мг янтрнлозриухсусной кислоты. е На ! л среды добавляют по 1000 мг ОЬ-аленина, ОЬ-аспарагиновой кислоты и Ь.глутаминовой кислоты; па 200 мг ).-аргнинна НС! и Ь-лизина НС(НСО н по 100 мг Е-гистидяна, Олейцина, Е-изалейцина, Е-метионнна, Е-феннлаланина, С-пролнна. Е.треонина. Е-тиразива, Е.валийа, Ь-триптофаиа, С-цистекка. 1.серина н Е-слияние. Продолжение табл. 7. )О сс На 1 л среды добавляют 500 мг аспарагиновой кислоты, 1300 мг Ь-глутамнновой кислоты, 150 мг 1..аргиннне НС1, 25 мг глнцине, 50 мг С-серина, 90 мг ).-лейлина, 30 мг Е-ижглейцнна, 60 мг Е-валила, 70 мг тнровина, 100 мг Е-аленина, 50 мг (.-лизина НС!, 50 мг ).-пролива, ВО мг Е-трнптофана, 50 мг Е-треонина, 25 мг ).-феинлаланииа, 25 мг Е-аспареги. ка, 61,25 мг цистеина НС!.Н,О (стерилизуют отдельно фильтрованием), 36 мг цистина, 50 мг Е-глутамииа (стернлйзуют отдельно фнльтровавием1, 14,9 мг Ь-метноиниа, 46 мг глутатиона (восстановленного) в 16,5 мг гистндниа.
бл На 1 л среды добавляют 0,1 г Е-аргиинна НС1, 1О мг 5-цистеяна НС) Нзо, 160 мг глвцнна, 1,16 г глутамвиовой кислоты в 21 мг серяна. На 1 л среды добавляют 120 мг РЕ-триптофана, 5000 мг глугамата натрйя, 150 мг 1..тнрозина, 250 мг 1и.-феннлала. нина, 400 мг )..аргииина НС), 300 мг Е-гисткяина НС( Н,О, 200 мг глнцина, 400 мг ОС-валина, 2000 мг ОС-сервиз, 125 мг ОЬ-нзоеейцнна, 350 мг )..цистеина НС). На 1 л среды добавлнют 12,5 мг Вщистеина НС(, 50 нг ОС-триптафана, 20 мг ).-тирозина, 10 мг С-правика, 20 мг ОЕ-фенилзлаиииа н 10 мг ОС.гнстнднна.
Хотя кислотный гндролизат казеина кроме аминокислот содержит несколько минориЫх компонентов и, следовательно, Среда ие является «синтетической» в строгом смысле, ее обозначают буквой «С», так как казеии очищают адсорбцией на активировааиом угле Нагл А при двух различных «анцеитрациях ионов Не н в среду добавляют некоторые извести е свп аниме с кезеин и к чпонеиты. например полнамины я витамины. лл На 1 л среды добавияют по 1О мг гуаиииа, аденипа и урацила.
1! На 1 л среды добавляют 3,2 мг гипоисантина и 8 мг урецила, На 1 л среды добавляют по 1О мг гуанииа, урацнла н гааоксаитиип. щ Е О х щ Е Л щ гг х Е гя ф х ! О Н * На 1 л среды добавляют 0,1 г глнцвна, 0,1 г О1-впаянна, 0,15 г Ощвалина, 0,15 г РЬ.лейцнна, 0,1 г ОЕ-изолейцива. 0,2 г Ощаспарагнновой кислоты, 0,2 г ОЕ.глутаиииовой кислоты, 0,2 г Ь-пролива, 0,1 г ОРфенилаланияа, О,! г Ощтирозина, 0,04 г Раргйиина, 0,03 г РЬ-гистндина, 0,2 г Ощсерииа, 0.2 г Рщтреонииа, 0,2 г ОЕ-метиовина и 0,4 г йщистина. Первые 12 амивакислот растворяют в 0,033 М фосфатном буфере н стерилизуют автоклавироваинем; серии, треонин и метиоиин растворяют в воде и стерилизуют фильтрованием; О-кистин растворяют в НС! и стерилнзуют фильтрованием.
У Любая из следующих аминокислот в концентрации 0,62 или 0,36 М может служить источником углерода, азота вли энергии глутаьгииовая кислота, аспарагияовая кислота, се. рин, пролии, а-алании. аспарагии. глутамнн и треонии. Од. неко рост улучшается после добавления смеси аминокислот илн равного количества каэамияовых кислот. Источниками углерода могут служить также глюкоза, мальтоза н сахароза. эо 4 На 1 л среды добавляют 2,5 г Е-аспарагина.
аа На 1 л среды добавляют 37 мг ОС-аленина, 120 мг Ощаспарагиновой кислоты, 90 мг 1-аргянина НС!, 13 мг В-цисгеииа НС! (цистеин автоклавируют отдельно, н затем его добавляют с соблюдением правил асептики к стерильному раствору остальных иомпоневтов), 642 мг Ь-глутаминовой кислоты, 1О мг глицииз, 68 мг Ргистидина НС! ЙзО, 94 мг ОЕ изолейцииа, !00 мг ОС-лейцииа, 155 мг Рлизнна НС), 65 мг Рщметионина, 73 мг ОЬ-фенилалавииа, 175 мг ).-дуплина, !00 мг Ощсерииа, 70 мг Ощтреоиииа, 31 мг ОЬ.трвптофаиа, НО мг Отнрозииа и !60 мг ОЕ.ваяния. Вз на 1 л среды добавляют па 60 мг каждой из следую.
щих аминокислот. алаиина, аргииииа, аспарагияевой Квслеты. пистеина, глутамнновой кислоты, гляцииа, гветящща, изолейцииа, лейцииа, лизина, метионина, орнитнна, окснпролииа, феиилаланина, пролииа, серина, треонииа, трнптофаиа. тирозина н валина. Замена этих кислот гидроливатом Кавевна не изменяет скорость роста и его интенсивность. Ясла не добавлять эти аминокислоты в среду, то концентрацию Нн,с! следует увеличить до 2 г)л среды. яй Нз 1 л среды добавляют 30 мг гипоксантина в 2 мз. урацвла. П Нз 1 л среды добавляют 20 мг няазнта, 10 мкг фолне. вой кислоты, 1 мкг л-аминобензойиой кислоты, 100 мкг рибофлавниа, 1 мг пантотсната кальция, ! мкг бнотина, 100 икг солянокнслого твамииа, 500 мкг никотиновой кислоты, 500 мкг яикатинамида н 2 мг солянокислаго пнрвдакснна. тт На 1 л среды добавляют 9,5 мг пантотената кальция, 2,4 мг никогннамнда и 3,3 мг солянокислого тиамвва (все этн компоненты стерилизуют фильтрованием).
На 1 л среды добавляют 2,4 мг никотиновой кислоты. оо На ! л среды добавляют 50 мкг паитотеиата кальция. На 1 л среды добавляют 2 мг рибофлавииа, 2 мг паи. тотената кальция, 0,05 мг биотина, 2 мг никотиновой кислоты, 2 мг соляноквслого тиамииа, 0,02 мг витамяна Ви 0,05 мг ОС-липоевой кислоты, 2,0 мг пирндаксаля, 0,1 мг л.амииобензойиой кислоты и 0,05 мг фолиевой нислоты.
На 1 л среды добавляют 1 мкг онегина и 1 мг соля. иокислого тиамина. Пантотенат значительно стимулиРует рост. На 1 л среды добавляют 2 мг солянокнслого тяамииа, 2 мг иантотената «альция, 1,4 мг солявоквслого холина, 3,6 мг миаииозита в 0,7 мг биотвна. зз На 1 л среды добавляют по 1 мг солянокислого пвридоксаля н паитотеиата кальция, по 60 мкг солянокислого тнамниа, ииацниа н рибофлавииа, 10 мкг л-амниобенаойной кислоты, 2 мкг бвотииа н по 1 мкг фолиевой кислоты н вв. тамила Вм. 1! На 1 л среды добавляют во 2 мг солиноквсиого виридоксаля н соляновислого тнамина, по 200 мкг пантотенатз кальция и яиацвна, 50 мкг рвбофлавнна, по 1 мкг л.амннобензойной и фолиевой кислот и 10 мкг бнотииа. ии рН доводят до 6,6 с помощью твердого КзСОз. Таблица 7.1!. Состав сиитетических сред (С) Зй 41 — 53 дли бактерий, перечисленных в табл.
7.1 Коивоиеиты а)с атс!» гас! агс" 44С 46С 46С ас !О Ю Ю 20 20 1,6 2,0 0,4 2,0 0,5 0,8 0,52 О,З 1,0 0,5 1,0 0,6 ,с г) "» 2,5 3,48 4,0 0,016 4,0 ео КгНРО» (г) а КНвРО» (г) О, 002 0,28 2,0 2,7 З,О 0,9 О,!5 2,0 20 0,04 0,9 0,03 10 0,2 1,0 1О 0,01 0,2 0,066 0,05 8,0 0,16 0,0! О 4 О,! 0,15 0,25 0,5 0,2 2,0 0,25 0,02 0,0! 0,07 0,01 0,0 06 0,01 2,0 1О 8.0 30 !О 4,0 1О Да! Дал Дал Дал» Даы Дал Дао Даа Дас Глюкоза» (г) Ацетат натрия (г) ХН»С1 НагНРО».2НгО (г) НаС! (г) МпС1» 4НгО (мг) МЗЗО» 7НгО (г) СаС1, 2НгО (г) Ре50» 7НгО (мг) Микроэлементы Аминокислоты Количество !в единицах, указанных в колонке !) на 1 л сРеды 2,0" 5,0. Дню Днг Двх диЬЬ Днес Днап диз 7,0— — 7,2 7,5— — 8,0 7,5— — 8,0 7,0 рН 4,8— — 5,0 6,7 5,5 6,5 !в — 9,8 Кислотный гидролнвнт кнвеиив (г) Пурииы н пнримндниы Витамины Твин 60 (мл) 7,5 — 2,5— — 7,8 — 3,2 6,8 — 7,0— — 7,4 — 7,2 Длсс Днсн а Источником углерода служит СО, атмосферы.
Клетки снабжаются энергией благодаря окислению интрига в нитат. Кроме перечисленных солей 1 л среды содержит 2 г «ХОз н 0,5 г СаСОз. Вместо дистяллнрованной используют водопроводную или морскую воду. В пресной воде клетки ве растут, даже при добавления Ь 4 ХаС(; оптимальный рост наблюдается в среде, содержащей от 70 до 100% морской воды, 1 ны ХаХОз и перечяслевные неорганвческне соли. Источником углерода служит атмосферная СОь Среду периодически аэрируют воздухом, содержащим бзЛ СО». и Источником энергии, азота и углерода служит тиациаиат калин (0,2 г)л). 7щаЬаг(паз (Л(алагез ие растет на таких сложных средах, как среды, содержащие пятательный бульон, пелтон, дрожжевой экстракт нлн гидролязат казвина.
После стервлизацвн к среде добавляют с соблюдением пРавил асептики 200 — 400 мг Хаз5 9НэО, 166 мг ХаНСОз н 410 ыг ацетата натрия нлн 320 мг метйлового спирта (общий объем 1 л). На 1 л среды добавляют 2 г цитрата аммония. ЛНа 1 л среды добавляют 1 г глицерофосфата «авва н 0.5 г ЭДТА. В качестве источников углерода используются Е глутамат, пировниоградная кислота, ацетат и лактат, на наилучший рост наблюдается в нрнсутствнк смеси 5 г С-глутамяновой кислоты в 1О г ОЕ-ааххаха (иа 1 л среды). Л На 1 л среды добавляют 3 г целлобиозы, 20 ммоль аце. тата. 1 ммоль изовалерната н 1 ммоль иэобутнрата.
Отдельно в атмосфере Хг автоклавируют растворы, содержащие 0,5 г Хаэ5 9НзО я 4 г ХазСОз, и затем добавляют их к срщ де непосредственно перед лосевом. Для раста иа этой среде необходимо довольно балыков количество активного яиокулята. Для большинства этях сред глюкозу стернлизуют отдельно (обычяо автоклавироваиием) я добавляют с соблюдением правил асептики к стернльиаму раствору других компонентов. Л На 1 л среды добавляют 1 мг хелатнрованного желева, 30 мкг Хагмоо 2НзО; 0,6 мкг СоС(г.бНзО, 6 мкг Спвоз 5НгО н 30 мкг ВпвОз 7НгО. 1 На 1 л среды добавляют 1 мг хелатнроваяиого железа, 1ОО мкг Ха,Л1оог2Н,О, 2 мкг СоС(г БНгО, 100 мкг дпвоз 7НзО н 20 мкг Спвоз 6НтО.
На 1 л среды добавляют 1,56 г элементной серы, простерилизозаииой отдельно автокаавироввияем. " На 1 л среды добавляют 1 мг ХагмоОз.2НзО. аг О Х З Ж л О Х гп е Х е О Я о На 1 л среды добавляют 0,5 мкг Мо (в виде молибдата аммония) 10 мг 2п (в виде 2п5О,.7Н,О), 4 мг В (в виде НзВОз), 1 мг Сп (и виде СиаОе5НзО) и 1 мг Со (в виде Соаоз УНзО).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
