Методы общей бактериологии (том 1) (947292), страница 17
Текст из файла (страница 17)
Бактерии, находящиеся на фильтре, люминесцируют зеленым светом; при этом можно наблюдать отдельные морфологические типы. Другой, занимающий много времени способ пропагандирует Хенрици. Он рекомендует подвешивать пред- чхсть ь мОРФОлОГия метные или покровные стекла в исследуемой воде на несколько часов или дней, а затем окрашивать и микро- скопировать нх. В этом случае происходит отбор микроорганизмов, обладающих свойством прикрепляться к поверхностям, характерным для многих обитателей пресных и соленых вод. 3.4.5.
Почвенные бактерии Известны неселективные методы прямого микроскопического изучения почвенных бактерий 13, 11). В качестве миниатюрных предметных стекол используют специальные стеклянные капилляры разной ширины с прямоугольным сечением (Саг1зоп ВС1еп(11(с 1пс., Ма((езоп, П. 60443). Существуют капилляры, у которых одна стенка очень тонкая (0,17 мм). Устройство для взятия проб, так называемый пелоскоп, состоит из набора четырех или пяти пучков прямоугольных в сечении капилляров длиной 1 — 2 см, по пять капилляров в пучке. Пелоскоп заполнен стерильной дистиллированной водой н прикреплен к держателю (с маркированной миллиметровой шкалой) посредством резиновой полоски. Его вертикально опускают в исследуемый образец почвы. По истечении определенного срока пелоскоп извлекают и исследуют под микроскопом, чтобы увидеть «мпкробные ландшафты» в капиллярах.
Рекомендуется тщательно отмыть пелоскоп водой и удалить из держателя захваченные клетки. Каждый капилляр снаружи протирают дочиста бумагой для линз и затем просматривают тонкой стенкой вверх. При помощи специальных методик капилляры можно превратить в вечные препараты [11). Другой простой способ, позволяющий произвести отбор (конечно же, неполный) почвенных микроорганизмов для микроскопического изучения, заключается в следующем. Пробу почвы помещают на дно часового стекла или маленькой чашки.
При помощи пастеровской пипетки снизу к ней добавляют воду до тех пор, пока над пробой не появится водная поверхность. На эту поверхность кладут покровные стекла или электронно-микроскопические сетки, к которым прикрепляются микроорганизмы, находящиеся в поверхностной пленке. а методы идвитиеиклции в сввтовои микроскопии 3.5. ЛИТЕРАТУРА 3.5.1. Общая литература 1. Ногг!ь 7, Н., К!бааля Р. 97.
(ей), Ме!Ьойв 1п т$сгоыо1ойу, чо1. 5А, Асайеппс Ргевз, 1пс., Хетт Уогй, 1973. Материал, представленный в первой части этого тома, особенно полезен как дополнение к тому, что излагалось в данной главе. В частности, укажем следующие главы: 1. М(сговсору апй писготе1гу, Ьу Ь. В. $,$иезпе1, р.
1 — 103. 11. 5!а(шпй Ьас1ег!а, Ьу д. К. Хогг!в апй Н. 5иа(п, р. 105 — 144. П!. ТесЬп(йиев 1пчо1ч)пй ориса! Ьпй!Иеп1пй айеп1в, Ьу А. М. Ра1оп апй 5. М. йопев, р. 135 — 144. 1Ч. Мои!Иу, Ьу Т. 1!по апг$ М. Епото1о, р. 145 — 163. 2. Рагй С., Балуя М. Т. Кеавеп(з, Ма(пз, апй пивсенапеоив 1ез1 ргосейигез, р. 930 — 950. 1и Е.
Н. 1.еппеие, Е. Н. Зраи!й)пв, апй 3. Р. Тгиап! (ей.), Мапиа1 о1 снп(са1 т!сгоЫо!ойу, 2пй ей. Атепь сап 5ос)е1у 1ог М1сгоЫо)ойу, )ЧазЫпй(оп, Р, С., 1974. Приведены некоторые дополнительные методики н соответствующая библиография по меднпннской микробиологии.
3.5.2. Специальная литература 3. Аггь!оояйауа Т. К ТЬе иье о1 сари!агу !есЬпгйиез !и есо!ой!са! в1игИев 1п т)сгоогвап)ьтз, р. 47 — 52. !п Т. Иоззтчад (ей.), Мойегп те(Ьойв !п !Ье в1ийу о1 писгоЫа! есо!ойу. 5чгей(вЬ Ха1юпа! Зс$епсе Кевеагсй Соипсй, 5!ос)гйо!т (1973). 4. Вагйо1отеш !. ОГ. Чаг1аЫев 1пииепс1пй гевиив, апй !Ье ргес!зе йеппгиоп о1 в(ерв !и Огат в1а(п)п8 ав а теапз о1 з(апйагй)я(пв гйе гезинз оЫа!пей. 51ь1п Тесйпо!., 37, $39 — !55 (1962). 5.
СаьМа !.. !п1егча! звавший рЬо(от!сгойгарйу о! т(сгоЫа1 сеП рори!аиопз, Арр1. МгсгоЬю1., 23, 190 — 193 (1972) 6. Неипсйьеа А Вас$епа1 виг!асе 1гапя!осаноп: а вигчеу апй с1аввИ$- са$1оп, Вас!ег)о1. Кеч., 36, 478 — 503 (!972), 7. НоЬМе !. Е., Ра!еу !$. !., 7аярег В. Ь$зе о1 Хис!еороге ИИег 1ог соип!$пй Ьас1епа Ъу Пиогезсепсе т1сгозсору, Арр!. Епщгоп, МгсгоЫо!., 33, 1225 — 1228 (1977). 8.
МасЯае Т. Н., МсСагйу Н. Р. ТЬе 1во!а1юп апй сйагас1ег!хаиоп о1 ОИй!пв то!И!1у ти1ап!з о1 Мухососсая хан!лая. Сап. 3. М!сгоЫо!., 22, 1282 — 1292 (1976). 9. Маьоп Р. !., Роше!зоп Р. М. Хис!еаг й!ч!в!оп аз оЬьегчей 1п 1Хе Ьас1епа Ьу а пем (есйп!Оие, 3. Вас1епо1., 71, 474 — 479 (1956). 10. Но!!ег Е. С., Ригйат Н. Н. Беа1ей аегоЫс вййе сините 1ог рЬо1о. т(сгоагарйу, Арр!.
М1сгоыоЬ, 16, 439 — 440 (1968). 11. Рег(!Уеи В. К, Сабе Р. Я. Сар(Пагу те!Ьойв о1 $пчез1$на11пв т(его-огаап!зтв, ОПчег апй Воуй, Ей!пьигв, 1969. 12. $(пылом С. Е Могрйо1ову о1 Ьас1епа! врогев, 1Ье)г йече!ортеп1 апй 'аегт!па!1оп, р. 207 — 248.
1и: 1. С. Савва!ив апй К. У. 51ап1ег (ей.), ТЬе Ьас1ег!а, чо!. 1, Асайепис Ргезз, 1пс., Хечг Уог1г ($960). 13, Тгагт! А Р. Вге!! 5Г. А., Твотаь %'. Р1иогеьсепсе писговсору о1 1иЬегс1е ЬасПП з(а(пей ич(Ь аигагп1пе апй гйойапипе. Непгу Рогй Нозрна( Мей. Вии., 1О, 287 — 296 (1962]. 14. )ге!а С. Я., %'уьь О. 1тргочей Ыа!п 1ог гивианхаиоп о1 Ахо!обае!ег епсуз1теп1, !. Вас1ег!о1., 87, 476 — 477 (1964) . Глава 4 ЭЛЕКТРОННАЯ МИКРОСКОПИЯ Р.
Коул, Т. Попкин Исследователь, собирающийся работать на электронном микроскопе и никогда не сталкивавшийся с ним ранее, должен перенять опыт от специалистов, работая вместе с ними, причем желательно на такой же модели, на которой он планирует проводить эксперименты. Предварительно он должен запастись руководствами и справочниками и, возможно, пройти подготовку на специальных курсах. Методы электронной микроскопии, предлагаемые нами в данной главе, предназначены для тех, кто имеет доступ к микроскопу и должен проводить бактериологические исследования. Исследователи могут почерпнуть для себя много полезного, не только занимаясь на курсах, но и осваивая необходимые манипуляции с помощью квалифицированного оператора, а также привлекая необходимые сведения, изложенные в руководствах и литературе по общим вопросам 11 — 141.
Мы не будем здесь дублировать все эти источники инструкций, так как для каждого микроскопа существуют собственные правила работы. В отличие от светового микроскопа, в отношении которого предполагается, что каждый, кто на нем работает, способен использовать его наилучшим образом, электронный микроскоп — специализированный прибор, который настраивается и обслуживается специалистами. Это связано с расходами на запасные части и производством ремонтных работ, осуществляемых по контракту с обслуживающим предприятием-изготовителем. Для того чтобы оправдать капитальные вложения и затраты, связанные с организационными трудностями, в большинстве случаев на одном электронном микроскопе работает много людей. Часто к электронным микроскопам прилагаются устройства для производства срезов, получения реплик методами напыления сколов и травления замороженных образцов и, возможно, для других видов К ЭЛЕКТРОННАЯ МИКРОСКОПИЯ микроскопии, в том числе — сканирующей электронной микроскопии.
Те, кто отвечает за бесперебойную работу микроскопов, устанавливают правила и нормы обращения с ними, обеспечивающие сохранность оборудования и непрерывность работы, и строго следят за соблюдением этих правил. Работающему с микроскопом следует с вниманием и заботой отнестись к прибору (некоторые его части устроены очень тонко, и имеет большое значение, какие ручки крутят при его настройке), а также к тому, кто будет работать после него («золотое правило»). Работающий на электронном микроскопе должен быть также предельно честным в отношении действий, которые он предпринимает (или не предпринимает), чтобы можно было быстро преодолеть затруднения, возникающие при эксплуатации и устранении неполадок.
Необходимо придерживаться следующих правил. 1. На любом приборе и при выполнении любой манипуляции вас должны контролировать не только для того, чтобы вы лучше его освоили, но и для того, чтобы вы сами и отвечающий за микроскоп оператор знали слабые места в вашей подготовке. 2. Если микроскоп не работает, ведет себя странно или требует приложения необычных для нормальной работы усилий, остановите эксперимент на безопасной стадии, обдумайте все и обратитесь за помощью к специалистам.
3. Не поддавайтесь соблазну произвести самостоятельный ремонт, лучше честно признаться в совершенных ошибках и обратиться за помощью к специалистам. 4. Ведите записи, даже если на данном электронном микроскопе не заведен такой порядок, обязательно отмечайте время своей работы и регистрируйте все случаи отклонения от нормы. 5. Делайте собственные записи последовательных процедур и имейте их с собой во время работы. Используйте контрольный список, который должен включать, например, следующие пункты. Положения ручек и выключателей при включении и налаживании прибора (а также при выключении) Пусковые манипуляции Требования по готовности прибора к работе Процедуры по настройке, выполняемые повседневно 91 ЧАСТЬ Ь МОРФОЛОГИЯ Центрировка диафрагмы объективной линзы Настройка конденсора Компенсация астигматизма Действия по переходу на широкопольное сканирование Рабочие операции и обращение с фотокамерой Предупредительные сигналы и реакция на них Действия по ликвидации аварийной обстановки и обеспечению безопасности Действия по выключению прибора с последующим приведением его в исходное состояние.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
