преаналитический этап микробиологических исследований (830993), страница 4
Текст из файла (страница 4)
Время — не больше 2 часов;2. Температурный режим оптимальный для микроорганизмов;3. Отсутствие контаминации другими микроорганизмами;4.Использованиеспециальных герметично закрытых флаконов,заполненном инертным газом, в который проба вносится путем прокола крышкииглой шприца или в одноразовом шприце, из которого удален воздух, и кончиккоторого закрыт либо стерильной резиновой пробкой, либо иглой, с надетым нанее штатным защитным колпачком.Все образцы должны иметь четкую маркировку, обеспечивающие ихбезошибочную идентификацию.4.4.2 С использованием транспортных систем, содержащих питательнуюсреду1.
Время — 24-48-72 часа, в зависимости от транспортной системы;2. Температурный режим оптимальный для микроорганизмов;3. Отсутствие контаминации другими микроорганизмами;4.Отсутствие необходимости создавать специальные условия дляанаэробов.Все образцы должны иметь четкую маркировку, обеспечивающие ихбезошибочную идентификацию.4.5 Правила биологической безопасности на преаналитическом этапемикробиологического исследованияК работе по взятию и транспортировке биологического материала допускаетсятолько медицинский персонал, прошедший специальный инструктаж по техникеработы и мерам безопасности. При взятии биологического материала должныиспользоваться средства защиты: медицинские халаты, шапочки, сменная обувь,резиновые (латексные, виниловые) перчатки, а при необходимости –дополнительно марлевые маски (респираторы),очки, клеенчатые фартуки.Работать с исследуемым материалом следует в резиновых (латексных,виниловых) перчатках, все повреждения кожи на руках должны быть закрытылейкопластырем или напальчником.
Следует избегать уколов и порезов. Вслучае загрязнения кожных покровов кровью или другими биологическимижидкостями следует немедленно обработать их в течение 2 мин. тампоном,обильно смоченным 70% спиртом, вымыть под проточной водой с мылом ивытереть индивидуальным тампоном. При загрязнении перчаток кровью ихпротирают тампоном, смоченным 3% раствором хлорамина, 6% растворомперекиси водорода.
При подозрении на попадание крови на слизистые оболочки,ихнемедленно обрабатывают струей воды, 1% раствором протаргола; рот игорло прополаскивают 70% спиртом или 1% раствором борной кислоты или0,05% раствором перманганата калия. Для транспортировки образцов следуетиспользовать преимущественно пластиковую одноразовую тару, герметичнозакрытую пластмассовыми, резиновыми пробками или завинчивающимисякрышками. Запрещается использовать стеклянную посуду со сколами,трещинами и т.п. При транспортировке сосудов, закрытых целлюлозными(ватными) пробками, следует исключить их увлажнение.
Транспортировкабиоматериала осуществляется в специальных закрытых переносках (укладках),желательно – термостатированных, выдерживающих дезинфекцию (см. рис. 31).Сопроводительная документация помещается в предназначенный для неекарман переноски (укладки), а в случае его отсутствия – кладется в переноску вотдельном полиэтиленовом пакете. При хранении биологического материала вхолодильнике каждый образец упаковывается в отдельный полиэтиленовый пакет.
Для этой цели выделяется отдельный холодильник, хранение в которомпищевых продуктов и лекарственных препаратов не допустимо.5. ПРАВИЛА СБОРА И ТРАНСПОРТИРОВКИ ОТДЕЛЬНЫХ ВИДОВПАТОГЕННОГО БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА5.1 КРОВЬПри бактериологическом исследовании крови на стерильность существует двесерьезные проблемы, влияющие на качество проведения самого исследования. Иэти проблемы возникают как раз на преаналитическом этапе.1. Отбор контингента пациентов для проведения исследованиями.Бактериологический посев крови, в последнее время, является частоназначаемым исследованием, хотя перечень показаний для него крайнеограничен.Показания к проведению исследования: клиническая картина сепсиса;лихорадочные состояния неустановленной этиологии; пневмонии; подозрениена инфекционные заболевания: брюшной тиф и паратифы, сальмонеллезы,бруцеллез, возвратный тиф, лептоспирозы, малярия, эпидемический менингит,пневмококковые инфекции, пищевые токсикоинфекции (при наличиилихорадки), стафилококковые и стрептококковые инфекции, сибирская язва,туляремия, чума.Все перечисленные показания связаны с тяжелым лихорадочным синдромом,возникающим из-за циркуляции микроорганизмов в крови и относятся ктяжелым состояниям, характерным для пациентов реанимационных отделений иотделений интенсивной терапии.
Но, к сожалению, очень часто врачи назначаютбактериологическое исследование крови на стерильностьамбулаторнымпациентам, которые не имеют показаний к проведению этого исследования и имне следует назначать данный диагностический тест!2. Несоблюдение правил забора крови. Анализ результатов исследования кровина стерильность свидетельствует о том, что практически в 70% случаеввыделяются микроорганизмы, живущие на поверхности кожных покровов, чтосвидетельствует о контаминации, возникшей в результате не соблюдениятребований при заборе.В связи с этим, для успеха данного вида исследования и для уверенности вполученных результатах, клиницисты должны грамотно отбирать пациентов иследить за соблюдением правил по сбору и транспортировки крови .Пробы для определения наличия в крови биологических агентов получаютвенепункцией периферических вен (чаще вены локтевого сгиба), артерий или изпятки у новорожденных.Сбор пробы из постоянного внутривенного или внутриартериального катетеровдопускается только в случаях подозрения на наличие катетер-ассоциированнойинфекции или отсутствия возможности ее получения венепункцией.Необходимое оснащение:-Вакуумные системы для взятия венозной кровиВ случае их отсутствия-Шприцы одноразовые 20граммовые (для детей 10граммовые)с иглами для венопункции.-Флаконы с питательными средами: среда для аэробов и факультативныханаэробов + среда для облигатных анаэрбов (например, двойная среда + средаСКС) или универсальная среда для аэробов и анаэробов.
Предпочтительноиспользовать промышленно произведенные среды, разрешенные к применениюв России. При использовании изготовленной в лаборатории среды СКС вкачестве индикатора анаэробиоза в нее добавляют резазурин, который краснеетв присутствии кислорода. В случае покраснения более 20% верхней частистолбика среду регенерируют прогреванием в течение 20 минут в кипящейводяной бане.
Регенерацию можно провести лишь однократно. При отсутствиирезазурина среду регенерируют перед посевом в обязательном порядке.Оптимальным средством отбора пробы венозной крови являются вакуумныедвухфазные флаконы для автоматического посева крови.-70о этиловый спирт.-2% или 5% настойка йода.-Венозный жгут.-Резиновые (латексные, виниловые) перчатки.-Спиртовка (только при использовании флаконов со средами, изготовленными влаборатории).Взятие исследуемого материала:Сбор проб крови для посева производят 2 человека у постели больного или впроцедурной.Для получения пробы необходимо выполнить следующее:1. Участок кожи над выбранным для пункции сосудом продезинфицировать:обработать кожу тампоном, смоченным 700 этиловым спиртом, затем другимтампоном, смоченным 1-2% раствором йода или другим дезинфектантом,разрешенным к применению для этих целей в установленном порядке;2.
Подождать, пока высохнет обработанный участок. Не допускается пальпироватьсосуд после обработки кожи перед введением иглы;3. Параллельно с дезинфекцией участка кожи для пунктирования обработать пробкифлаконов 700 этиловым спиртом (раствор йода не допускается использовать дляобработки пробок при работе с бутылочками для автоматических анализаторов);Количество независимо отбираемых проб крови и время их взятия определяетсялечащим врачом (табл. 1). Как правило, должны исследоваться не менее 2–3проб крови, каждая из которых взята путем отдельной венопункции. Этонеобходимо для дифференциации истинной бактериемии от случайнойконтаминации крови при венепункции.
Вероятность загрязнения вследствиеслучайного прокола сальной или потовой железы составляет 3%.Таблица 1Рекомендуемое число отбираемых пробКлиническое состояние КоличествопробПримечаниеОстрый сепсис2из двух сосудов или двух участковкровеносного сосуда перед началомантибактериальной терапииЛихорадка неясногогенеза4сначала 2 пробы из разныхкровеносных сосудовзатем через 24–36 часа еще 2 пробыИнфекции слихорадочнымсиндромом6Первые сутки: из 2-х сосудов передначалом а/б терапии первые 1-2 часаподъема температуры 3 пробы синтервалом 15 мин.Вторые сутки: повторитьУ больных, получающих антибактериальные препараты, пробы необходимособирать непосредственно перед введением (приемом) следующей дозыпрепарата.
При наличии лихорадки оптимальным является взятие крови на фонеповышения температуры тела (но не на пике температуры!).Сразу после взятия кровь засевают на питательные среды. Соотношение крови исреды должно быть 1/10–1/60 для устранения бактерицидного действия кровипутем ее разведения.Техника посева зависит от вида используемых питательных сред.Среды лабораторного приготовления, расфасованных во флаконы сцеллюлозными (ватными) пробками:1. Снять иглу со шприца;2. Над пламенем спиртовки открыть флакон;3. Внести половину крови из шприца во флакон;4.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
