Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (522944), страница 65
Текст из файла (страница 65)
ТИ5 чессог сап Ье идее( со дсис(у ргогпосег дессиепсед с)опес( 3псо (Ье МС5. (Р) ТЬе ргопсосег чессог (асЕ5 СЬе 5Ч40 епЬапсег, Ьи( соп(а(пд СЬе 5Н40 еаг(у ргоисо(ег. ТЬ(5 чесСог сап Ье идее) Со 5(ис(у епЬапсег дессиепсед с(пиес( (псо (Ье МС5. (Е) ТЬе сои(го( чессог спаса(пд (Ье 5Ч40 еаг1у рготосег апс( 5Н40 епЬапсег. ТЬ(5 чес(ог сап Ье идее) ад а род!С(не соп(го! ог ао а ге1егепсе и Ьеп согпраппц СЬе ас((н(С!ед о1 ргогиоСег апс( епЬапсег е1егпепии (Мог(!1(ес(, ил(Ь реггп!55!оп, 1гопс СЕОЬ)ТЕСН.) 1|суогтагсоп Рапей 17.В9 епегйу сгапвСег ЕВЙЕТЬ гейев оп сЬе иве оЕ а пашга1 Ь~о!иш1певсепс расЬ|чау со сгапвсег епегйу со 6РР ЕАпйегв ес а1.
2000!. 1п сЬЕв саве, е|йег сЬе епгуше 1иссуегаве Его|п сЬе веа ражу Кесдйа гепуагт!в ог йе РЬосоргосе!п аессиогсп Егоп| А, лссойа вегчев ав епегйу допог Ьу саса!у|дпй йе охЫасюп оЕ сое1епсегахше. Еисссегаве апд аециойп поппайу еппс Ыие ПВЫ; сЬегеуоге, а ссесессаЫе вЬ|й |и егпВяоп со|чагд а 1опйег счаче1епйсЬ сЬагассепвйс оЕ а Вгееп ог уейо|ч йиогевсепс ргосеш ассерсог пю!еси1е яйпа!в сЬас |Ье сгапв1ег оЕ епегйу Ьав оссиггед. С1еа|1у, |Ье ровяЬ|1|йев Еог ияп8 йиогевсепс сар со ргоЬе йе п|увсейев оЕ йе сей веегп со Ье 1ип|с1евв. ТЬе же оЕ пасша1 апд епйспеегед 6РР чапапсв Ьач|пй дсвсшсссче врессгас ргорегйев мой Еасййасе сЬе сгасЫпВ оЕ |папу ргосешв сЬгоиВЬ йе сей япш1|апеоы!у, ав |чей ав сЬе десесйоп оЕ сЬесг рЬувсо!ой!гас асйч|йев апд шсегассюпв. Еп е сей ппа81пй |и дече1оршй огйашяпв ь 1|Йе1у со геворге гпапу с!иевсюпв оЕ сей ш!Вгасюп дипп8 дече!оргпепс ап|1 дсЕЕегепссассоп.
Йевоогсеа Сог Едв!пе СЕР РигсЬег |пуоппасюп оп ые оЕ |Ы1д-суре апд пшсапс Еоппв оЕ 6|РР ав шаг1|егв Еог Пепе ехргевяоп ш а |чЫе чапе|у оЕ врес|ев сап Ье Еоипд ш |Ье п|апу геЫе|чв оЕ йе ргосе|п сЬаг Ьаче арреагед ш гесепс уеагв (е.В., р1еаве все ЕеЕЬП ес а!. 1997; Тяеп 1998; Наве!ой ес а1. 1999; !Есасча ес а1. 1999; ЬСау1ог 1999!. ТЬеве геЫе|чв аге оЫ18асогу геасйп8 Еог |Ьове спчевссйасогв |чЬо |чапс со ые 6РР ав а герогсег ш сЬе|г рагс|си!аг ехрейп|епса1 огйапйш ог сей суре. Ап ехсепяче гапйе оЕ ГРР чайапь Епасига1 ав |чей ав пшсап|1, час|о|в, ап|1 апс!Ьогйев В посч сошшегс!айу ачайаЫе.
СЕОЬСТЕСН Ьав регЬарв йе гповс сошргеЬепяче вес оЕчессогв; 6РР апйЬогйев аге ачайаЫе йоп| шапу согпрашев, |пс1исйпВ СЬеппсоп 1пс1., Рапчега, С!.ОЫТЕСН, апд А1ехЬ Согр. Рог |Ье СсеЬ 8!сев оЕ шапу оЕ сЬеве сошрашев ав |чей ав аддгеяея Еог ойег гевоигсев йас ргочЫе шуоппайоп ге!- ечапС Со вСигйев ияпй 6РР, р!саве вес ТаЫе 17-2. ТАВЕЕ 17-2 Йевоигсев ЙЕ5ОВКСЕ Соасмссчт5!1ягоамАгюм ЪЧеа а|ге ягиссше оЕ 6РР 16РР ЕЕ|В 61ев! Ьсср:йгвЬ.!пса.п!Ь.Воч!псЬ-сгпайе! С91Н 1ша8е Ноп|е Ра8е вчсчисСсааива.огЕР/содоп Содоп ива8е дасаЬаве сч|чсч.ВЕр.ссопсесЬ.сош СЕОХТЕСН сч|ч|ч.цЪссошЕаисойио Оиапсиш ВюсесЬпо!о8у 1пчйгоВеп Ейе ТесЬпо!о81ев РапСгега вч|чвчдпчссго8еп счсчсч.ПЕесесЬпо!о81ев,сош сгапвЕессюп геа8епь апд чессол 6РР апйЬосйев |чвч|ч.раиче га.согп мочсч2.шед.ип!Р8.1сссгпайе1аЬ |пЕоппасюп оп ияп8 6РР со впаду саг8ейп8 вейиепсевс адйсе оп писговсору гпапу иве!и! Пп1|в со с |шс1|-сапе чЫеов, ипа8ев, 6РР гевои геев 1ша8е Апа!уяв 1.аЪогасогу вчсчсчуа1е.шед.еди/орЬ|Ьа/сЬошссоо!в Мо1еси!аг Мойоп ЕаЬогасогу ВгооЫ|ачеп ЬСассопа! ЬаЬогасогу вчъчъч.рдЬ.Ьп!.ВочЕЬ|овчве Ь шсоппасюп оп д18!са! писго- всору апд вЬаге|чаге Сог ипа8е апа1уяв содоп ива8е Егециепссев Еог апу ог8апып; Воо|1 Еог орспп!х!п8 дея8п Еог ехргеяюп 6РР рг|к1ись вшсаЫе Еог шапу арр!касюпв| епЬапсед апд девсаЫ11аед 6РР чессогв, гесогп- Ь| пап| йиогевсепс ргосешв, 6РР апйЬосйев, 6РР вейиепсш8 рпгпегв 8оод Ппе оЕ аисойиогевсепс рго- сешв; шапу врессга1 ргорегйев 1шев оЕ6РР сопвсгиссв 17.90 СЬарсет 17: Апа!уяья о~Севе Ехртеяяоп и Си!ситес! Маиьта!ьап СеПя ЕР!ТОРЕ ТАСС1В!С Ер11оре Таее1щс Ап Очегч!еяч Еияоп ргосешя сопяяс о( сЬе апипо асЫ геяЫиея о( шсегея сача(епПу ассасЬе|1 ас сЬе|г атпшо ог сагЬоху! сеппшь со а яес о( сагпег яеьсиепсея.
ЪС|Ьеп |Ье сагпег яес(иепсея сопсаш а ыеьи1 ап6депьс с(есегпипапс, |Ье (ия(оп ргосеш В яаЫ со Ье саддеь( ьч1|Ь ап ерьсоре. ЕРПоре садд(пд 1я а роьчег66 сесЬпысие со сЬагассепге ргосе(ж о( 1псегеяс ъчпЬоис рип6сасюп. АпосЬег и|а!от аь(чаи|аде оГ ерПоре садд(пд В сЬас ьчеП-сЬагассепгес( ап|1 ЬьдЫу ярес|6с апПЬойея сап Ье ые|1 со ясис!у ргосешя оь" ииегеяс ьч1|Ьоис сЬе 1опд 1аЬопоы гоп|шея апс1 ипсегсаш6ея (от ргос!иссюп ап|1 сЬагассепгаПоп о( апПЬойея. ЕрПоре садд!пд Ьая Ьесотпе а гоисьпе ргасске ш сЬе уеаяся дассЬатотусея се|сипае апс( дсЬьгояасс!ьатотусея ротЬе (ВаЫег ес а1. 1998; Еопдбпе ес а1.
1998 !. А сад сап Ье 6ляеь( со сЬе сагЬоху1 сегпшшя о( а ргосеьп ас 1ся епс(одепоы 1осы ияпд ехВПпд РСК пьоь(и1ея ьч1|Ьоис с1ошпд апс! йягирбпд ьо епь(одепош ргоьиосег. 1п шапииа1ьап седя, й|я арргоасЬ (я пос геая(Ые ас сЬе ргеяеис 6пье. 1и шоя саяея, сЬе Вья(оп ртосеш В ехргеяяес( ипь(ег сЬе сопсго! о( а Ьесего!одопа ргопьосег (дедя апь( СЬегпоьТ 1995; СЬиЬес апь( Впггагд 1996; беогд(еч ес а!. 1996; НоябеЫ апс1 Еи 1998), ьчЬкЬ суркаду геяи!ся |и аЬпогтпа! ехргемюп о( |Ье депе о( |псегеяс. ТЬегеьоге, ер|- соре садд(пд саипос Ье ыей !ог ехашр!е, со ясиь(у геди1а6оп о( а сеП-сус1е-геди1асед депе. Опе амипьр6оп Ьеге В |Ьас аь(йсюп о( ап ерПоре сад ь(оея пос аКесс сЬе ьипс6оп, шсгаседи1ат стаи|- ротс, тпойбсаПоп, ог 1осасюп оь' сЬе сагдес ргосе|п. 5ечега1 ясийея Ьаче яиддеясеь( сЬас пьояс ргосешя сап ассерс а сад ас опе ьепшпы ог осЬег гедсопя ьчс|Ьоис яечеге !оя от йеьг 6|псиопя (Ргаяаь( апс( Соб 1989; Апапь( еь а1.
1993; Пояя-Масс!опа16 ес а!. 1997!. Ноъчечег, ъчЬесЬег сЬВ Ьо1й сгие пшяс Ье сеясеь! |чЬепечег рояяЫе. 1п уса|с, |чЬесе |Ье ехсачасюи о(сЬгоьиоютиа! депея |я а тоисше тпассег, и В ойеп роя|Ые со егаяе апу доиЬН иипьейасе!у Ьу сеясшд сЬе аЬ~16у о( сЬе ерПоре-садде|1 ргосеш со сопьр!ешепс а пиП аПе1е. 1п гпапииа!ьав сеПя, сЬеяе шаиегя шыс Ье са(сеп ов ГаПЬ, апс( апу геяи1о оЬ|ашес( яЬои!6 теша|и ореп со ь(иеясюп ип61 йеу Ьаче Ьеев соибьппес! Ъу о|Ьег тпеапя.
1п саяея ьчЬеге а лепя|Не ьипс6опа1 аяау В ачаП- аЫе (и Ысго, П 1я яоиьесппея ром|Ые со яупсЬеяге епоидЬ о(йе саддеь! ргосеш ьп сеП-6ее яуясепья со соп6пп сЬас ьс Ьая гесашеь( Влд асс|чпу. Ер!соре Таее1щь Ртас11са! Соия1|1ега11оия ТаЫе 17-3 ргеяепо а яапьр!е о( йе ерьсорея сЬас Ьаче Ьееп ияес( (ог саддшд. Весаияе шоя о( йеяе ерПорея аге ь(епчеь( !тоги а Ьогшопе ог ап опсодеие, йеге В а 6ппе Ьис япаП сЬапсе о(1шшипо1од(са! стоя-теасПоп ьч(|Ь сеПи1аг гпасепа1. 1п шоя саяея, а япд1е спопос1опа1 ап6Ьо|1у ярес|6с (ог йе ерПоре сап Ье же|1 сот иипшпояаьп|пд, иипшпоЫос6пд, иипшпоргесьриасюп, апь( иипшпорипбсасюп.
ТЬе питпЪег оычеП-сЬагассепгед ер(сорея В дгочбпд гарЫ1у, апь( тпапу сопииегс|а! сопьрапьея поьч яеП 1оо йаь сопсаьп йе тпасепа1я апс! ьпяспьссюпя со сопяп|сс ап|1 сеяс ерПоре-садде|1 Вляоп ргосеьж о( чапоы яогпс Но|течет, Ье(оге с(есЫшд со ые ап ерпоре-садддпд ясгаседу, ьс В Ьеяс со ьчог(с оис |Ье соя| о( сЬе песеяяагу геадепся. ТЬ(я В еярес|аду иирогсапс 1( йе доа1 В со ые сЬе ерПоре ьог 1агде-яса1е ай|шсу рип6сасюп о( сЬе (ия(оп ргосеш. доите оь" |Ье сотпрашея сЬагде яисЬ оисгадеоы рпсея Кот иьопос!опа1 авПЬойея сЬас сЬе опдошд соя| о( сЬе яуясетп с(шс1|!у Ьесопьея ргоЫЬ|сьче ьог |папу !аЬогасопея. Аво|Ьег ииропапс сопяЫега6оп ы со с(есеппше ьчЬесЬег йе яе!ессес( ерпоре Ьая Ъееп ые6 ш йе 1|сегасше Сот а ригрояе япи1аг со сЬас оЕ ьо 1исепс(ес! арр1касюи, Ечеп |ЬоидЬ ерПоре саддшд тпау чагу (гош ршьеш со ргосе|п, йе (асс йас япи1аг арргоасЬея Ьаче Ьееп ехр1о(сес( ьч(|Ь а раг6си!аг сад ьпсгеаяея |Ье П!|еПЬооь( о( ьо яиссея апь! тпау ргочЫе яо|ие Ыеая ап|1 яотпе с(есаде6 ш(отшасюп оп Ьоьч со и|В|ге й|я ерПоре, ьчЬьсЬ |иау пос ехВс ш тпояс депега1 ргососоря 1с В чету ьтиропапс со сЬоояе а сад ьчЬояе содпасе апПЬо|1у М11 вос стоя-геасс ч6|Ь а ргосеш |п сЬе Ьояс седя илес( сот ехргеяяоп о( сЬе ер(соре-саддес( ргосеш апь( со сЬоояе а саддшд ясе оп йе сагдес ргосеш сЬас ьч61 пос шсегьеге чбсЬ сЬе (ипссюп о( апу сородепк яеь!иепсея (е.д., ЬуйорЬоЬ(с ядпа! яеь(иепсея1 ог сга(6сЫпд ядпа!я (е.д., пис1еаг сгаиярогс ядпа!я ог епс(ор1аяш(с ге6си1шп гесепсюп яеь!иепсея!.
'ьььЬепечег роы|Ые, Ьо|чечег, сЬе ерпоре сада яЬои!д Ье аьЫед со йе апьшо ог йе сагЬоху1 се|- пипия оь" |Ье сагдес ргосеьп, ьчЬеге |Ьеу аге пьояс П(се!у со Ъе ассеяяЫе со апПЪобу апс! 1еаяс П(се!у со шсег(ете ьч1|Ь сЬе Влпссьоп о( |Ье сагдес ргосеьп. 'ьС|Ьеп ап ерьсоре сад (я ые6 (ог ипишпорипбсасюп, и 1я Ьеяс со сЬоояе а сад сЬас и|ау Ье гепьоче|1 (тороп сЬе сагдес ртосйп, Кегпоча! (я яотпесипея песемагу со геясоге ргосеш ьипс6оп, со ьпсгеаяе яо!иЬ|!ьсу, Енуоттаттоп РанеЬ 17.9! ог со с1есгеаье ап68ешсйу.
А1йоиВЬ яксеы Ь пос Внатапсеес1, гетпоча! тпау Ье ассошр!ьЬес1 Ьу шсогрогабп8 а ргосеаяе с1еачайе ясе ш сЬе рерс!де Пп)сет Ьенчееп сЬе ерйоре са8 апс( сЬе сагйес ргосеш (Еог йесайя, р!еаяе яее сЬе шсгойкйоп со СЬарсег ! 5). Ноъчечег, епгугпа6с гетпоча1 Ь ойеп шей!стен! (Ьесаияе сЬе с1еачайе ясе ь шассеяяЫе) апй яошеснпея т(еясгисс!че (Ьесаияе сЬе с!еачтпй ргосеаье ь пос аЬьо1исе1у ярестйс ог Ьесасье оЕ сопсаннпаиоп ъч!сЬ попьрес!йс ргосеаяея) ()ъ)айа! апд ТЬвйетеп 1987; Ру(ъея ес а1. 1988). Ер((оре Тааущс Арр!(еа((опя 5!псе сЬе тпсгос1иссюп оЕ ерйоре са88!п8 Ьу Мипго апй Ре!Ьатп (1984), и Ьая Ьееп изей со асЫгем яечега1 ехрепшепса1 ргоЫешя, !пс!ий!п8 сЬе с)есесс!оп, 1оса!ггасюп, апй рипйса6оп оЕ ехргеыед ргосе!пя.
ТЬе ргосеш оЕ шсегеяс сап Ье с1есессес1 ъч!сЬ !шшипо1оВ!са! геайепь йгессес1 айатпяс сЬе ерноре апс1 рипйес1 Ъу айшну сЬгошосойгарЬу тп сЬе аЬяепсе оЕ а Еипс6опа! аяау (Ие16 ес а1. 1988). 1п адйс!оп, Ьесаияе сЬе са88ет) ргосетп сап Ье т(!йегепс!асей ипатпЬ!Вионя!у Егош ге!асей сейи1аг ргосетпя (Рачь апд Р!п)с 1990), ть яге апй 1осасюп сап Ье аясетса!пей Ьу ъчеьсегп Ыоссшй апт) нпншпойиогеясепсе (Мипго апд Ре1Ьатп 1986, 1987; бей ес а1. 1988; Ре!Ьаш ес а!. 1988; Въчапяоп ес а1. 1991), йя рассегп оЕ ЬюяупсЬеяя апс) роя!- стань!а6опа1 птоййсасюп сап Ье Еойоъчей Ьу ри!яе-!аЬе!тпй апд ннншпортес!Ртсайоп, апс( ть шсегасйопя ъч!сЬ осЬег ргосешя сап Ье ргоЬес( Ьу сонппшпоргестрна6оп (Ко!ос(г!е) апд 'тоип8 1989; Вт!шпсо ес а!. 1990).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
