Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (522944), страница 66
Текст из файла (страница 66)
Ейпайу, ъчп Ь сйе доче!оршепс о( яепястче шаь яресстогпесту Еог рерсЫе яет)иенс!п8, ер!соре са88!п8 Ьаъ Ъееп сьед тпсгеаяп81у Еог рипйса6оп оЕ ргосетп сопср1ехея апд Ыеп6йса6оп оЕ согпропепь !п сЬе ргосетп сотнр!ехея (Ойгуг1со ес а1. 1998; Ясао ес а1. ! 999). А1сЬоиВЬ тс ь пос рояяЫе со ргочЫе а сонтргеЬепяче!Ьс оЕ сЬе ге!ечапс 1негасте, Ье!оъч аге яогпе гесепс пса)ог арр)кайогь оЕ ертсоре са88!п8. ° бене ехртеяюн антЕ !осайгайон. Ер!соре са88!п8 Ьая Ьееп изет) со ягоду Вене ехргеъяоп тп чапом огйашяня ия!п8 ъчеяегп Ыосстпй. 1Е Ь Ь сПЕЕтси1с со с1есесс сЬе ехртеяяоп оЕ а 6ляоп ргосетп ияп8 а яп81е ерноре, с(ие со а 1оъч ехргеяяоп 1ече! апс) шясаЬт1тсу оЕ сЬе ргосеш, яепяйчну сап Ье !псгеаяей Ьу ас)йпй ннл!стр!е ертсорея (Е4а)са)!ша апс1 Уаойа 1997). Опсе а 6ляоп ргосетп ь ехргемес), ня 1оса1тгасюп сап Ъе йесессей Ьу нпншпойиогезсепсе.
ТЫя сесЬп!ъ)ие Ь чету ияеЕи1 со ясийу 1оса! тга6огь оЕ ЬоЕоппя оЕ а Вене Еанн! у сЬас йаге ЬтВЫу яйшйсапс яет)пенсе Ыепстсу, ъчЬеге ярестйс апстЬойея со ййегепс ьоЕоппя аге аЬчауя ййки1с со Вепегасе (ВсЬетег ес а1. 1995; Тоуоса ес а1. 1998). Ерноре са886п8 сап а1яо Ье гьет1 Еог нтаррш8 те8!опя оЕ а рюсетп йас ате геяропяЫе Еог сагйейп8 сЬе ргосеш со ярестйс 1осасюпя (Хи ет а1. 1998). ° Ентет.асйоня. Ву ияп8 со!шншпоргес!Риасюп апй т!есес6оп Ьу ъчеяегп Ыос6п8, ерноре са88)п8 Ьая Ьееп ъьес( ъчЫе!у со ясийу ргосеш-ргосеш !псегасиопя ш чйто апд ш чгчо (СЬ!ппа!уап ес а!. 1995; Няи ес а1. 1996) (Еог с)есайь, р1еаье зее СЬарсег 18, РгососоЬ 2, 3, апт) 4).
1п саяея ъчЬеге по ап6Ьойея аге ачат1аЫе Еог ейЬег оЕ сЬе съчо росеп6айу тпсегас6п8 ргосетпь, ййегепс лайз тпау Ъе ассасйес( со еасЬ оЕ сЬе съчо ргосе!пя. ТЬе ап6Ьос(у сЬас гесойшгея опе ерйоре ь сЬеп чье Еог нппшпоргестртсайоп, ъчЬегеая сЬе ап6Ьос(у айашяс йе осЬег ертсоре Ь мед !ог с(етесйоп оЕ сЬе тшншпоргес!р!сасес( ргосешя. 1п сЫя саяе, и Ь а1ъчауя ъчье со рег(оггп йе гестргоса1 сонппшпоргестрйасюп ехрептпепс со йесепп!пе ъчЬесЬег сЬе тпсегассюп ь ярестйс. Моточег, Ь ь ннропапс со гесойптге сЬас Ьесаше сант)Ыасе ргосетпя Ыеп6йет1 Ьу нпнплпоргестрйасюп птау пос шсегасс с1несс!у ъч!сЬ сЬе Ьан ргосетп, тс Ь айч!яаЫе со ые осЬег тпеапя со сопйпп ъчЛесЬег а йгесс тпсегассюп ехЬся.
° Рнтфсаг!он ауртогет сотр(ехея. 1п плану саьеь, а Ью1о86са) 6лпсйоп Ь сагт!ет) оис Ьу а ргосеш сотр(ех !пясеат) оЕ а яп81е ргосеш. ТЬегеЕоге, й Ь еьеп6а1 со Ыеп6Еу апс( ршт(у ай оЕ сЬе согпропепся оЕ а ргосетп сонср)ех. 1п огйаптяпя яисЬ ая уеая ъчЬеге Пепе!к арртоасЬея ехьс со !йенс!Еу ай о( йе сотпропепь регсопптп8 йе яаше 6лпсстоп, й ь я6П песеяагу со рипуу ргосеш сошр!ехея со ясис1у сЬесг ЬюсЬетшса! Еипсс!опя, Ерйоре са88!тъ8 Ьая рточ!бед а ъчау со рип(у ргосетп сотпр!ехея Ьу нппшпоа(йптсу сЬготпасойгарЬу апд нппшпоргестрнасюп (СЬтап8 апъ! Поет)ет 1993; ОВгуг1со ес а1.
1998; Ятао ес а1. !999). Еъ)оьч йас йе сотпр!есе Вепогпк яет)иепсея оЕ яечега! огйапЬгпя аге ачат!аЫе (е.8., сЬе уеаяс 5. сетеийае, С. е(е8аня, апс1 Ртояорйт!а), апъ) ъчтй йе яйшйсапс гет)исс(оп тп сЬе апюипся оЕ шасепа!я гет)и!гей Еог рерсЫе яеъ)непс!п8 Ьу пъаь ярессгошесгу (Ри)сап ес а1. 1998; Ниапй ес а!. 2000), йе ияе оЕ нпнплпоргестр)сайоп со Ыепс!Еу сотпропепь ш ргосеш сотпр1ехея тя П)ъе!у со Ьесонсе опе ог сЬе гпа)ог сесЬп!т)иея ш ргосеотнкя. С13ореее 17: Апп1у31ь о1' бепе Ехртеее1оп 1п СО13итес1 Мотта!1ап Се1Ь 17.92 к-о д ОО с Со ОС" Н о.с н .
Оо Сс О, \ 3 -со О О' О, „,; С-„мО О' О СО м О =-" С,. «О о 0 .С 3 С н Оса О<о о СО м 00 О 3 -' 'О о о Я ОО О о д О 33, О с о С'3 С,с Сс 33 Нс О 00 О о с М со Оо н к н О а оо асс о О' о 00 с нс 33 О .с Е со с 0 с Д 33 О О о н .с о .д с 3 со 3' СО с О 330 О Е н а О О О "О о О 0 03 Е О с ОЕ д о с с о с .с с 3 33 н О 3 н о Х О О ,с 33 и а о 30 Е < о о Х О О.
о ОС о о О. Е й Д са и М Дс О. н Е о„ Я оо с,с о ОЯО о с 'н о О. < с о о ЕО < о О О с с с с> 3' ) с д. > ' с 33 д 3.3 с н с д Я с о Х а с .о д м ОО с ' ОО ОО Ф а. о ыс СО с сы СО О о о Е о 00 о с н о о д о о с оо о О СО Д 33 О с о О д о н -Яо с ДЕ >в С Я О н д "Е н н 6 3 с кк а с с ) Я- о а „>- о -О н 'д ак с „с н 6 а — о о О 33 с>д > Я ос Я Е о -6 с о а н н о с Я -О к 'с д а д„о 0 О О с -с О к.с Е о н со и о.о \с ка .с о о 3 н с о .~ 0 С О Я 'Я О.
о о а с О О а > ~ о о нн Х кХ н О а "о и с > Дск о О с С' О З с м О 3 с 0 ОО н с О ) с сц О Е с> 0 Ос сс Б а .О сд 'д Я н о 3 О О, С с к О О Н -О," О н о -сЕ С О ~д.с с о '„ 33 н О -О О.- О ан а о О н д к ок [ а н О О О. н с Я 3 Я 'с ОО 3 'д н > н й.д о. О О. с с 3 д с Сс л-. о д О н .с о д н .с 3 о сс о О. о ч о с но а Д С3 С.О о н н О„ ) о о о сЕ 3 О Е с 0 > н о 3 а= ~к 3 ОО 3 Я , .с н с > Р ) д 'д с .с н ооЯ н с д ~- 'н о с .о о д о ад ОО и 3 б с, о с 3 со с О О с 'О О О Я а о — .О с О„с о а с.о 'О.
33 3 о сс д 00 о с о н — о .О,д с о о О н 3 о с «\ 3 Е с о Я Я 3 'Н оо О \ с. ".Е— д ОО а со о аЕ с н 3 3 0 д .'д н 'й .3 'Е о с > — Е 3 3 .Е о 'Ос 'С 00 о с -'о о О 0 н с Я с Я о Я 'Е Л а сс с > ) О с о с н сд 3 -с оа ~'О д о м < м О Хм с .с к ос с 'н м О СО О О, Е Я н К с Ос О о О ;с ) 1 Д - >' о О" сс сд о с 33 Е с "О о н -О с 'с , Р н К ф3 н СО Л о з О. с О, о к к с с со Я о 3 Е с о о О, ') с ОЕ О, О,— 33 и о :а 'а .О сок Я с ) сс о 4 н 3 о с Е с Е о с я с о а а 0 о Е Е О, о .с а с >е Д О Д ое Д Д ДО, д с д аа о с Д ,Я о,е о с 4 с асс Е Е О ° к с 'О.- „с'З н Е $ н 'н с о 'оа с на о .с Я 00 с о — сЕ н сд СОО н о н а О ,с 'д о а.д ао с' 73 Х о о О.Я оо'Е ,'с 'О С, 3 кХ Е Д н н о о Е н».
О О .с о о с.к Осс >. с Я„д с о— ООН д а 0300 Оо с.ск 00 С 'Я й а ОХ а о о 3 н .Сс О :3 сд Е .д .с 'й д с -О 00 О О К 00 с с- 3 с -д н 0 н с с ') — о '" .О с 0 Е. о кн О. с "30 сс с 3 О.' о н аа Х о 33 с .с 1п1еетаесоп Рппе!с 17.93 о » \ Б ЯХ О »О О 'о о сс о. » с .с О Е ° о » о 0 с с )с о с О » 0 с а сР » о с Е с с м а М Б сс Х о .о » с с Е с Е Е » с с сс » ) Х ) о 0 о »О 'о Х Х о О од о В с Е сс о о » и М О .а Е )и Х,» о 0 ~а сс ' а Ес> )с )' ) о Х Х Х Х Х Х Х О о о. о 'Х О.
о о. Х .а с па О" » ) а о а ' -а о с о а с ) »О 'а4 с н »О с о о 0 ) Х » с о о .а о' о О м О Х а »» )с » » о Х оЕо с а Еаа » ,е а а о а)ас аЕЕ ао" >ЕЕ „о с а '» с »й с о- ) Е ~ о ) .о о м о О .а » с» Е » с оо а с о О 0 Е о ос а а » с. а с с. о о ), .о с ао -Е ) ' а 'о о »с а )о 'е »й а о Ь с о а»Е с» о ) 'с м )» о с о с, ) о р 0 .о а » о.
с' о са 0 "о о.а ° е О..с -сс)0 с са са" а ) ) » а сс ,» 0 » а со 'о ц Еь и о .Е 'сс оп а, аа „о а,с ааааа осам ° '% 0 0 с С о с ,.а со м 0 — О с \ Е'-о) о — ).о о )- )аасс »Ео о с сс с ') с» Е о 'О. о. Е с )с .0 а) о ) 'о О ) м о а, с » о .с о < 'с й Е а се "о с < Б )' а Оо ао а Х Е Е о .Е а оХ -а с ) а » ) сс о »с о с' Е 0 Ъ м а с) а .а Д Е о о и о»с 'с о Е )— 'о ооо 0 а ) а' а 'с ) » »д аЗ 0 0 ) ) ) О 'о с, с с а с»о с о о ъ с с с о ~~па с ~ Е~с с- асс 8 'о с Х с 0 о а а Е о с а о м са м сс се С » )С 0 с 'Е моо амс сс а о м' а са Е = с сс — о Е с -;с Е а )с) о а Ес) с ,а о й 0.
С С о сс а . о ). ис ас сс о сс »Е сс ср ь а 0 а с „Об, о, а м~ с о о .с »й с 'с» а о о 0 ) с о 'о о. с аа а ДВ и Е 'с „ »О оо О » 1794 СЬарсег 17: Аиа!уяз о)'Сгеие Ехргезз!оп ги Си1сигег! Матта11аи Се!!з СНЕОКАМРНЕЫ1СОЕ АСЕТЧЕТКАй)БЕЕКАБЕ Асс!у!-соепхугпе:сЫогапсрЬешсо! асесу1сгапзсегазе (асесу)-СоА:САТ; ЕС 2.3.1.28) Ьаз Ьесоше и4г)е!у изей аз а герогсег гпо!еси1е Сог сЬе !ис)!гесс аьау оГ сгапзспрЕопа! ге8и1асогу е1егпепь 1п сгапзсессес) шаисша1сап се!1з. ТЬе епхугпе соча1епс1у пюс)1Еез сЫогашрЬешсо! Ьу сгапзгегг!п8 ап асесу! 8гоир сгош асесу!- СоА со сЬе рппсагу Ьус)соху! геяс!ие (С3) ос с!с!огагпрЬешсо! (р1еазе зее Ес8иге 17-14). ТЬе ргос)исс о! йЬ геасьоп, 3-асесу) сЫогашрЬешсо!, ипс)ег8оез а попепхуспаск геапап8егпепс сп счЬ)сЬ сЬе асесу! 8гоир ь сгапзгеггес! со сЬе С1 геяс!ие, сопп)и8 1-асесу! сЫогашрЬешсо1.