Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (522944), страница 166
Текст из файла (страница 166)
1п тасс, сЬе зепз!с!ч!су о( сЬепи1ипипезсепс т)есесс!оп о( ргосешз апг) пис1етс аск)з Ь ВепегаПу 1нпьей пос Ъу зропсапеоиз с)есау от АМРРР, Ъис Ьу сЬе ргезепсе от" стасе ашоипь ш Ьиттегз от" аПЫше РЬозрЬасазе о( Ьассепа1 ог!В!и (Вгопяетп ес а1. 1990). Епуогтас)оп Раве!3 А9А5 АЧОПЧ АЬ)О ВЕОТИЧ Вю6п Еисапвп Н, соевцчпе ря ЕЪК 244.3) В а |часег-ао!пЫе и|аппп |Ьас Ь~пй сч)сЬ Ь)8Ь аЕЕ|пссу со ачЫш ЕМ, = с|8,000), а сесгашепе, Ъаяс 81усоргосеш, аЬпп|$апс сп га|ч е88 ччЬ)се (Еог геиесч, р!еаае еее асеев 1975). Весавхе еаеЬ спЬпп)с оЕ а|дйп сап Ъшд опе Ъюсш гпо1ееп!е, 1 ш8 оЕ ачЫш сап Ь~пд -14.8 88 оЕ Ь|обп. ТЬе йыос|абоп сопасапс оЕ |Ье согпр!ех В -!.0 х 10-ге м, счЬ)еЬ соггеаропй со а Егее епег8у оЕ ааеос1асюп оЕ 21 )сеа1йпо1е.
Ъй|Ь апеЬ а 68Ьс атос)асюп, сЬе оЕЕ гасе ь ехсгеше1у а!осч ав|$ йе Ьа! Е-!!Ее оЕ сЬе сошр1ех ы 200 дауа ас рН 7,0 !бгееп ап|$ Тосве 1973). рог аИ ргае6са! рпгроаее, сЬегеЕоге, |Ье |псегаес1оп Ьепчееп ачЫ|п апд Ъюбп В евсеев!)а1!у ЕггечегяЫе. 1п а|Ы|6оп, йе ачЫш-Ью6п сошр!ех В геяяавс со сЬаосгор|с а8евь $3 м ВвапЫ)ве ЬудгосЫогЫе) апд со ехсгеп|ее оЕ рН ап|$ юпк есгеп8|Ь (Сгееп апд То|па 1972). ТЬе асгеп8|Ь оЕ сЬе спсегас6оп Ьес|чееп Ьюсш апд ачЫш ргочЫеа а Ь|$68)п8 ауасеш со Ьпп8 п|о1еев!еа |чвЬ по вашга1 аЕЕ)в!су сог опе апосЬег )псо с!осе сопсасс.
Вюбп сап Ье аяаеЬе|$ со а чапесу оЕ ргосе|па апд пвс1ек асЫВ оссеп |чЬЬош а!сепп8 сЬесг ргорег6ея 5)ш)1аг1у, ачЫш Еог есгерсачсйп, |ь поп81усоау!асед рго1|агуопе ег)псча!епс) сап Ье )оше|$ со герогсег епхугпеа |чЬоее ае6чссу сап Ье ваед со !осасе ассдгог |)вапсЬасе ачЫш-Ьсовп-саг8ес сов|р1ехея рог ехагпр!е, ш епху|пе впгпппоаыауя а Ьюбпу1асед апс|Ьо|1у Ъовп|1 со ап ппшоЬ$1ыед апс)8еп ог ргппагу ап6- Ъоду В оЕсеп аыауед Ъу ав епхуше, авеЬ ае ЬогаегайаЬ регохЫаае ог а!)са1ше рЬоарЬасаее, сЬас Ьае Ьееп совр! ег! со ач|йгг !уоггп8 ес а1.
1985; ргепгЬ ес а!. 1986). 1п а|ЫЬюп, |и пассе|с асЫ ЬуЬгсдсхас)ов, Ъ|о6пу1асед ргоЪеа сап Ъе десессед Ьу ачЫш-соп) в8асед едушее ог ВпогоеЬгов|ея Егегсчассчее о! Ь~ос|п аге пеед со Ъ|оппу!асе ргосеше, рерсЫея апд о|Ьег п|о1есп1еа ЕЕог геие|ч ап|$ геЕегепсеа, р!еаье еее Чг!1еЬе)с а|Ы Вауег 1990). ТЬе йаадчапса8е оЕ е88 счЫсе ачЫш 14 |Ье ге)ассче)у Ьс8Ь Ьас)|8гоппд оЕ поперес|Вс Ь|пйп8 саваед Ьу йе ргеаепсе оЕ о!|ВоааееЬагЫе Вгопря ТЬВ ргоЫеш сап Ье гедвеед Ьу вяп8 есгерсачЫ|п, а сесга|пегк пов8!усоау1асед 58,000-да1соп ргосе|п еесгесед Ьу 5|герготусег аийт' сЬас Ь)пда Ью6п |исЬ арргох|- гпасе!у йе саше аЕВпву ае е88-|чЫсе ачЫш. Еог гпоге шЕоппасюп ов Ьюсш, р!еаае еее сЬе шЕогшас|оп рапе! оп В)ОТПЧ |и СЬарсег 11.
МвсЬ псе!в! шЕоппасюп аЬопс ачЫш-Ью6п еЬев||ягу апд аийп-Ьюсш сесЬпсгсвеа В ача)1аЫе ш а ЬапдЬоо)с еп6- дед Аийп-В|ест СЬетЬсгуг А НапдЬолИ рвЪ!ЬЬед апд |ю!д Ьу Р|егсе. Ьявлу|а|ед ргоЬе ач|ял герог|ег ЕЕСС)$4Е А9-12 ТЬе Аийп-Всо6п Сош 1ех А9.46 Аррепйх 9: Ресес((оп оуа(сигам !ММЕ))Ь)ОСЕОВ!)Е))Ч-В!)Ч0!)Ь)С РВОТЕ!)ь)Б! РВОТЕ!)Ь)$ А, С, А)Ь)0 Е РТОЕе)п А ТАВЕЕ А9-У В1псВпд о1 Рго1е)п А апВ Рго(е1п С (о йе Ес Вее)оп о1 Мапппа11ап 1 |и и| и и о и! о Ь и 1 | и 8 РПОте|м С (ЬТЯЕРТОСОСС! Ое Сяоирв С Амо С) РПОтБм А (атпрнугососси5 Аияеия) 1ммимос|овипм Ншпап 1861 Ншпап 1862 Ншпап 1865 Ншпап 1864 Моше 1861 Моиае 1862а Мопае 1862Ь Моше 1863 Ка| 1861 Каг!862А Ка| 1862Ь Ва| 1862с КаЬЬг|!86 Вомпе!861 Воч!Пе !862 5Ьеер 186 5Ьеер 1862 боа| 1861 боа| 1862 Ногае 186(аЬ) Ногае 186(с) СЫс)геп Нашагег бшпеа Р(8 (е) Оа|а оп Ьшпап!86 !гоп| Рог|вгеп апд 5)аиаЫ ( |966), Кгопчав ( |978), ап6 МуЬге алд Кгопчав (1977, |980а); оп пюим Ьогп КгопчаП е| а1, (|970а), СЬа1оп е| а1, (|979), ап6 МуЬге апд Кгопчав (1980Ы; оп га| !гога Мебвуеа! е| а1.
(|978) апи Мяч|оп е| а1. ( ! 982); оп гаЬЬ|| (гоп| Кгопчав (1973), МуЬге ап6 Кгопчаи (1977), ап6 Рогавгеп ап|1 5|о|!шы (1967); оп Ьолпе Ьош с!ПП е| а1. (|970), МуЬге апд Кгопчав ( |981), апд КгопчаП е| а!. (1970Ь); оп очше, еишае, ап|1 сарппе Ьош КгопчаП е| а1. (|970Ь) ап6 5)ояшз! 4| а1. (1972). Оа|а оп о|Ьег ашша14 аге |го|и ЕПс)ипап е| а). (1982), В|огс)| ап6 Кгопчав (|984), А!|ага|гоп| е| а1. (|985), апд А)гега|гош апд В|агс1| ( |986), Рго!еш А, а се11 |ча!1 сошропеп! 01 5!ирЬу1ососсиа аигеи|, Ъ(пс(8 |о йе Ес ге8)оп о( иппшпо81оЬП1ша (!86) о( п|апу п|апипа!|ап арес|еа апг) йегеЬу Ье1ра |Ье ЬассеПшп еасаре йе иппшпе геаропае о( |Ье Ьоа| (Рог88геп апг) 5)о|)ша! 1966; (ог гечАеъ, р!еаае аее 1ап8опе 1982; Воу!е ап|1 Веь 1987; Воу1е 1990! Вопче! 1994) (р!еаае аее ТаЫе А9-7). ТЬе ш|егасооп о( рго|е(п А ю(!Ь йе Рс рог6оп ог 186 |по1еси!еа |)оеа по| Ыос)| |Ье аЬ~! Ву ог" !Ье апВЬос)у |о согпЪ|пе ш)!Ь (Ь аппВеп (ТПВше А9-13).
Рго|е|п А Ьаа Ьееп паег) ех|еп- 8)че1у (ог Ьо|Ь <)иа)1!а!)че апг) |р|апо|а||че апа)уе48 о( иппшпосЬеппса! геасВопа (богВп8 1978; Наг1оъч апг) Ъапе 1988,1999). .(п)огпгдг(оп Ропе!8 А9.47 рго|а|п 1. ю|а|п Ег го|с|о А 1|аъ п) Е1С()КЕ А9-ТЗ 1пппппо 1оЬо!1п Ке 1опа Несо п(аег( Ьу (Ье ГаЬ-Ь(пйпе Мо!есп1еа (Кег(гаччп, ък11Ь регп|1881оп, (гого Волке! 1994 1©Е(аек(ег Ьс(епсе].) ТАВЕЕ А9-8 В(пг(1п8 ог 1|п|попоВ!оЬо11па 1о Рго1е1п Е, Рго(е1п А, апг( Рго(е(п С Рвотим А РКОТЕ1М С РКОТЕ1М Е РЕОЕБм ЕА 1ммомосеовоим Ншпап 18С 18М 1ВА 1ВЕ 18ЕТ РаЬ Р(аЬ') 2 к 118М сЬа|па асрг Мопае 18С1 1862а !ВС2Ь 18СЗ 18М !ВА Ро!ус!опа1 Мопае Каг КаЬЬ!1 ЬЬеер боа1 Во|Апе Рогсше СЬгс1|еп 18УВ ВС Моспйед, ап1|Ь регппаюоп, (гогп О1.ОМТЕСН (попас!опгесЬ.сош!агсЬ1гег)П.981ЛРИргоге1пЬЫш1).
"Рго|е|п 1А соп|Ь|пеа |Ье гшпшпо81овп!ш-Ъгп|11пв г1ошаша ог рго|е|п А апг) рга|еш 1,. А9.48 Аррепйсх 9| Г)егеег!оп $узгетз ° Ссл)геп еоир1ей го а гай(оаег!че, епаутаг(е, ог((иогеьеепг гасг, ргосе|п А !ь ап ехсеПепс геа8епс со йесеес апй с)иапс(саге аппЪогПеь лч!|Ь Ь(8Ь ай|шсу сог сЬе ргосеш. Ргосеш А еЬеппеаПу еоир!ей со рагбе!еь оГ соПоЫа1 8о1й сап Ье ыей со 1оеасе 18бь Ьу е1еесгоп ппегоьеору. ° ргогет А гттоЬ(1(хей ои а ьо1(й ьиррон сап Ъе ыей со рипГу апВЬогПеь ап|1 со соПесс иппшпе еотр1ехеь, апс|8епь, ап|1 лчЬо1е сеПь (р1еаье ьее Р!8иге А9-14). ° (7з)п8 6675А !1)ге запйлч(е)с геейпиГиея, 73)л)А Яа8тепгь сап Ье ритс(лей апй йесеесей ияп8 рипбей ргосеш А ог еп8!пеегей 6ляоп ргосе|пь сопсаш!п8 ГЬе 18б-Ь|пгПп8 йоп|а|пь оГ ргосеш А йошашь (е.8., р1еаье зее НпйЫайЬ ес а1.
1987; РесегЬапь ес а1. 1987; 1'л|егьсие)с апй Саропе 1989; Гог геч!елч, р!еаье ьее 5|аЫ ес а!. 1993). СЬипепе рго|ешь еоп|ашш8 Пчо шйерепйеп| !|8апй-ЫпгПп8 йогпашь Ьаче а!ьо Ьееп ехр!огей аь айЬеяче иппшпо!оЕйса1 геа8епся Рог ехашр!е: ° Мо1ееи!еь 1аЬе!ей лч(г)г й)8оху8еи)и гпау Ье 1аЬе!ей лч!|Ь а 6|яоп ргосе!п сопса|шп8 ап 18б-Ь~пгПп8 йошаш оГ ргосеш А апй ап ап68еп-Ь|псПп8 ясе оГ ап ап6г68оху8епш ап6Ьойу. ТЬе 1аЬе1 п|ау |Ьеп Ье йесеесе|1 лч!|Ь апу апс!Ьойу |Пас Ь!пйь со ргосе!и А (Та! ес а1. 1990). ° Бггергич(йт-ргоге(п А е)с!тегаь гпау Ье ыей Гог шгПгеес 1аЬе1ш8 оГ апВЬогПеычПЬ епху|пеь (5апо апй Сап|ог 1991).
° Ргогет А-та!созе Ь!пй(п8 ргогет е)г(тесал шау Ье ыей аь Ь|Гипесюпа1 геа8епя Гог Ъ|пеПп8 апПЬой|еь со а ьо1Ы п|асПх (Хие ес а1. 1995). ° Ргоге|п А сап Ье ыей аь ап аубшсу са8 со рип(у Гыюп ргосе|пь ьуп|Ьеялес! ш рго- апй еи)сагуоссе сеПь (е.8., р!еаье ьее КоЬаса1|е ес а1. 1995; %1ыоп ес а1. 1985; Гог ге ие|чь, р1еаье ьее %1яоп апй АЬгаЬшьдп 1990; И~!еп апй Мо)сь 1990; С)Ыеп ес а1.
1992; 5саЫ ес а1. 1993). ТЬе я|пр1еьс ргосоео1 шчо1чеь рипГуш8 6ляоп ргосешь еопса|п|п8 ГЬе Ре-Ь~пеПп8 |1оша|пь оГ ргосеш А Ьу аубп1|у еЬго|пасо8гарЬу лч!|Ь ап !8б геяп (П~!еп ес а!. 1983; %1яоп ес а1. 1985). ТЬе Пепе Гог ргосе|п А ((3Ыеп ес а1. 1984) епсойеь а ргергосе!и оГ 509 апипо аеЫь сЬас сопыьсь о(а я8па1 ьел)иепсе, |чЫсЬ !ь ге|почей йипп8 ьесгеиоп: Г|че Ьопю1о8оия |пйерепйепс 18б-ЬшсПп8 йошашь, еасЬ оГ 58 апипо ае!йьс апй а гере66че сагЬоху-Сегпипа! апеЬог (геЕйоп Х), оГ 180 апипо ае!йь. СгуьсаПо8гарЬье апа1уяь оГ соегуьса!ь оГ а яп81е !8б-Ь!пеПп8 йогпа!и оГ ргосеш А Ьоип|1 со Ьишап Рс ьЬолчь сЬас сЬе !8б-Ь|пгПп8 йогпа|п еопсашь пчо а-Ье1кеь сЬас Гоггп ехсепяче ЬуйгорЬоЬ|с шсегассюпь гй|Ь сЬе ьесоп|1 апй |Ььгй сопьсапс ге8!опь оГ |Ье Ре йошаш (Ре!ьепЬоГег 1981). Ргосе(п С Ргосеш б |чаь 6|я !ли!асей 6огп ьсгерсоеосса! ьсга|пь Ье!оп8!п8 со Пгоирь С апй б (В)огс1| апй КгопчаП 1984). Ргосе|п б,!Йе ьсарЬу1ососса1 ргосе|п А, Ьаь а Ь|86 а(6шсу Гог сЬе Рс геЕйоп оГ |папипаПап апс|- Ъой(еь.
Носчечег, |Ье ссчо ргосе|пь аге с)и!се йсТГегепс |и ьсгиесиге апй Ьаче й!ГГегепс а(6п|6еь Гог апПЬой|еь (р!еаье ьее ТаЫе А9-8) (А)сегь|гош е| а!. 1985). Ъл|Ьегеаь рго|е|п А !ь псЬ ш а-Ье!кеь ап|1 Гоппь ЬуйгорЬоЬ!е шсегассюпь лч!|Ь пппшпо81оЪиПпь, ргосеш б Ьаь а 1аг8е еопсепс оГ (3-ьЬеес ьсгиесигеь (01яоп ес а1. 1987; бгопепЬогп ес а!. 1991).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
