Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (522944), страница 170
Текст из файла (страница 170)
ТЬе йя6ийшяЫий Ееашге Ь |Ье н оЕ 4 6(ЕЕегеис ехсйасюи 1аяегя аи|1 10 епияяои й1сегя, ргочЫшй ыел члй йе йех|Ь|1|су оЕ шаиу д(йегеис йногеясеис с(уея (еиияпои ярессга Ьепчееи 500 ни|С 700 и|и) Еог сагир!е 1аЬе1- шй. ТЬся сесар репшся июге сЬаи пчо йЕЕегеис!у 1аЬе1ей яаи|р!ея со Ье няей Еог ргоЬ!ий еасЬ |икгоаггау. Сеиега1 5саиший, 1ис. чичсч.йяйншои!ся.сош/рго|(нсгя сга|ие/Йаса|ЬЬЬсаиаггау/ яа5000.Ь|ш 5саиАггау 5000 6еиеТАС 1000 няея а ССР саи|ега аий а Ь|8Ыу яеия6че г)егесгог сараЫе оЕ йесесс(ий нр со Еоиг йногорЬогея рег ехрегииеис.
!с а!ю Ьая аи ансошасей яа|ир1е Ьо1дег, чгссЬ ргочЬюия Еог 1оайий аий ясаиший 24 я1Ыея ас оие сине. 6еиоиис 5о1ниоия счячсч.йеиошссяо1н6оия.сош/ ргойнсся/Ъю/(шй.Ь|ш СеиеТАС 1000 ТЬе НР СеиеАггау 5саииег Ь а Ь(8Ь-ге|о!нсюи (3-Ссш) ясаииег с(ея(йией со геай Айушесг|их 6еиеСЬ~Р ргоЬе аггауя. Нечйегг-Рас(сагй чиич.айушесгп.сош/ргойкся/ шя аггауЬсий НР СеиеАггау 5саииег ТЬе 5согш яуяеш Мо!есн1аг Руиаиися сччнч.шс(уи.сош/аггауя/йеи.Ь|ш ТЬЬ яуясеш согиЬ|иея РЬоярЬопшайег аисогайойгарЬу сесЬио1ойу чнй ьчо иоигайоасс|че йиогеясеис-1аЬейий сесЬикснея: йгесс йногеясеисе аий сЬеиийногеясеисе.
ТЬе 5сопп яуясеш |саня ясогайе РЬоярЬог ясгееия р1ня йногеясеис йеЬ аид сЬеиййногеясеис Ыося ш а 35 х 43-сш ясаиший агеа аи|1 Ь |Ьы сче11- яшсес( Еог ясаиишй шешЬгаие аггауя. ТЬ|я яуясеш Ь а ясаиишй 1аяег соиЕоса1 ипай(ий ерсйногеясеисе иисгокоре чай а 10-р|п ге|о!нсюи. СМ5 418 Аггау 6еиеск Мкгояуясеии 5саииег чиччсайушесгиссош 5сапЕогй С/шчегя!су А1Ьегс Е(иясе(п Со!!ейе оЕ Мейсспе ЫНСК! Со!6 5рбпй НагЬог ЕаЬогасогу Со! )есйоп оЕ ргососо!я Т16К ргососоЬ чччч.сшйш.ясаиЕогйедн/РЬ|осчп/ ккклецнеисе.аесош.уи.ейи/Ь|о|пйиисгоаггау/ргососо!.Ьсш1 чичсч.пЬйг!.и!Ь.йоч/Р!К/ЕСС/15К/НТМЕ/ргососо!.Ьсш) чичсч.пис!еня.сяЫ.огй/чн51ег/ чиччсргососо!-оп! (не.
иес/шо1Ыо/РЫА/6 па гикгоаггау Ыги чичсч.с!йг.огй/сйЫш!сгоаггау А10.12 АрреидЕх 10: Т1ИА Аттау ТесЬпо1очу 1(па~е Апа!уыил ТЬе оЬ!есдче оЕ ппсгоаггау пиалке апа!уях Ь (о ех(гас( ЬуЪпйга(юп яапа(а Еготп еасЬ ргоЪе. Яцпа1а аге гпеаапгед аа аЬао!и(е |п(епядеа Еог а Ьдчеп гагае( (еахеп((а11у 1ог аггауа ЬуЪпд|гес| со а япа1е ьагпр1е) ог аа та(юг оЕ (тчо ргоЬеа хч((Ь д(ЕЕегеп( Лпогеасеп( 1аЬе! я гергеаеп(шц (хо зерага|с (геа(гпеп(а го Ье согпрагег| чл(Ь опе ргоЪе ах ап |п(егпа! соп(го1. ТЬе гадо оЕ (хчо яапа!а ргочЫек ге1адче геъропзе га(юх га(Ьег йап ап еяппа(е оЕ ап аЬю1п(е яапа!.
А (урка1 со1ог нпаВе Ь зЬохчп |п Буше А10-2. Опсе ппадеь аге оЪ|атпед 1п д|р((гед Еопп, йеу аге юЬ)ес(ег1 го Ешйег апа1уае5 пяпа а чапе(у оЕ юЕ(хате ргоцгагпя ТЬеке ргоВгапга ргочЫе а гпоге асспга(е с(пап((Егса((оп оЕ йе |п(епягу гадо. Упдеягед Ееа(аггея оЕ (Ье да(а юсЬ аа ппечеп хро(я дпа( оп (Ье а|Ыея апд попаресгВс ЬуЬпд(га((опа аге Е(адцед аа (падег!иа(е апд аге по( сопядегед Еог Епг|Ьег апа1уяя Вас)сВгоппд Е(иогеьсепсе, ьпсЬ аа ап(о()погеьсепсе оЕ |Ье хо| Ы юррогг ог попьресйс Ь|пд(пВ оЕ аагпр!е (о йе аггау, сап а! ю Ье юЪ(гас|ед Егогп (Ье й(епя(у оЕ а Ееа(пге.
ЯпЪаег(пеп(1у, йе шеап, Е!С(1ЙЕ А10-2 Ехргеха!ои РаИегпк |и а Ногиап сВХА Аггау (Еготи се!!а !идвсед хч!(ЫЬе Ьшиап (втиог ко геххог РТЕ(х(, го(е|и ( гояие ЬохрЬа(аде, аид |еигди Ьопю!оц) А рог(юи о( а Ьитиаи с0('(А аггау ЬуЬгЫтгег| тМй а гед Е(мог-(аеаед ехреигиеи(а| ргоЬе аид а агееи Е|иог(аааед ге(егеисе (ии(идисед) ртоЬе. ТЬе тиеаюгед |и(еиядеа (гоги йе (ио Виогеасеи! герог(ета Ьаче Ьееи (аЬе-со|отег! гед аид агееи аид очедаЫ.
че!!ою яапа!а (гед р(оа агееи) ~ид(са(е говаЬ!у ес(иа! атиови(а о( Ьоиид с0!'(А роги еасЬ аатир|е аид йете(оге Ьаче ег(иа! (и(еиядеа |и йе тед аид агееи сЬаиие|я ароь сои(а(и(иа гих(чА ргеьеи( а( а Ь(аЬег |ече! |и оие ог |Ье ойег ьатир|е ьЬоъч вр аь ргедоги|- иаиду гед ог атееи, ((гиаае ргоис|ег! Ьу ч(че(г Мрда| аид М(сЬае! ЧЧ(а(ег, СоЫ Брг(иц НагЬог (аЬога(огу.) 1тацтцапг/Апа!уз/к о/" г/се Апау А10.13 тейап, апс( ксапг!агъ) с)еч!ас!оп оЕ рлхе1 !псепк!с!ек !и еасЬ Ееасиге (з с)есегпппеъ! апъ( зиЬ!ессеъ) со ЕигсЬег г(есацег) апа1уяз. ТЬе Еоцоъч!пц ипаце апа1уяз ргоцгатк аге сопипоп)у изей ° СепеР!х Рго ь а ргоцгалп Сог зсапшпц апг! апа1усцпц писгоаггау з!Ыез изшц СЬе Сепер)х 4000 3саппег. 1с сап а1зо Ье изе6 со апа!ухе ипацез асс!исгег( ъчПЬ осЬег зсаппегя Сеперсх Рго аисогпаскацу аПцпк йе Ыос)ск оЕ Ееасиге шйсасогз оп ап ппаце апс) аПцпз Ееасиге шйсасогз ъчиЬлп сЬе Ыос1ск ъч!сЬ Ееасигез оп йе ипаце.
1с (з Еицу !псецгасеъ) ъчПЬ йе ъъгеЬ ш зисЬ а ъчау йас сЬе депе пагпез ог йе!г ассезк!оп пшпЬегз сап Ъе Пп)сег! со апу дасаЬазе. 1с сап Ье ригсЬазег( йгесс1у 6опь Ахоп (ъчъчъч.ахоп.сот). ° 5саиА!ухе, а ргоцгагп япи1аг со Сеперлх Рго, ъчаз ъ!ече1орег! Ъу МкЬае! Е!зеп ас ЦсапЕогс) Уп!чегз!су апг) !к сгее1у ачацаЫе Егогп Ьсср://сапа.ксапЕогс(.ег(и/койъчаге/. ОсЬег ипаце апа1уз!к ргоцгатк 1пс1иь!е Аггауь/!яоп (Егот 1тац)пц ВезеагсЬ 1псл Ьсср://!тац!пц.ЬгосЬл.са/ргос)исск/); с(еАггау (Егопл !ъ)НСИ: ъчъчъч.пЬцг!.и!Ь.цоч/Ел1ВЛ.СС/ 15К/НТМЬ); 1таСепе (Егогп В!оТл!ксонегу: Ьсср://ъчъчъч.Ьюйзсочегу.сот/ргойкск/1таСепе/ ипацепе.йт1); Т1СП ЯросЕлпг1ег (Ьогп Т1СВл ъчъчъч.с!цг.огц/зой)аЫ); МкгоАггау Яи!се (Егогп Ясапа1ус!ск: ъчъчъч.зсапа1ус!сз.сот/коз/ргог)исс/Ьсз/т!сгоаггау.Ьст1); СепБхр!оге (6огп АРРПеь! МасЬя ълчъч.аррцес1-пъасЬк.согп/це/це.Ьспь); Сепесласа АС (Сгопл ВакеЬ ъчъчъч.цепеъ(аса.сот/ ргоъ(-ехр.ЬСт1); РагСе1с Рго 2000 (Егогп Рагге!с 1псл ъчъчъч.рагге)с.сот/); апг( ЯроСЕлге.пег (Погп Цросулге: ъчъчи.зросулге.сот).
е Сопк!с!ега(!опк !и РегЕогпс!пц а М!сгоаггау Ехрег!гпеп( Весаике писгоапау ехрегипепсз аге т!шасипгег( апг( оЕ а ЫцЬ-йгоицЬрш пашге, сЬеу аге кепя6че со Ьой ехсегпа1 апг! шсегпа! Писсиа6опк, сог ехагпр!е, ъЬлг!пц децчегу оЕ йе сагцес О!ъ(Аз опто йе зиЬзсгасе апг! диппц ЬуЪпйгас!оп. Арргохипасе1у 7 — 8% оЕ сЬе чапа6оп ш йе ъ(аса !з екс!тасеъ) со Ье ъ!ие со Ьас1сцгоипс1 по!зе. 1с ь сЬеге(оге нпрега6че со ЕоПоъч ргорег ачегац!пц апд поппа1)хасюп ргоседигек, Ьой со пип!т(хе йезе чапаЫез апд со епзиге сЬас йе ехсгассеъ) г(аса аге гецаЫе апс1 теашпцбл!.
1с сз а1зо ппрогсапс со посе йас, аз оЕ сЬ!з ъчпс)пц, сЬеге аге по ц1оЬ- аПу ассерсес) ги(ез ог ксапг(агг(з Еог рег(огпипц сопсгоПе6 ппсгоаггау ехрепгпепся Ригйегпюге, йе р1асЕоппз аз ъчеП аз йе тейог(к Еог с(аса ехсгас6оп апъ! апа1уяз аге зиЬ!есс со цгеас чапаЪл1- Пу. ТЬе Еоцоъч!пц аге цепега1 гесопипепс1а6опз Еог рег(опшпц ехрептепск оп Ьогпетас(е аггауз апъ( зЬсш16 Ъе изег! ак циЫе1спез оп1у. ° Яер1каге еасЬ ехреглтепс ои ты11!Р1е аггауз. Ачегац!пц сЬе поппа1ыес( гасюз Еог йе кате сопсго1к со сотрепзасе Еог аггау-со-аггау чапасюп. ° Рег!опт ехрептепгз из!иц со1ог гечегза! го ассоипгуот чапае/оик т г!уе тсогрогаг/оп.
ТЬе ригрозе оЕ гечегяпц йе 1аЪе! Еог йе съчо гер!ссасез !к со геъ(исе чапаЬл16у ш яцпа1з йас сап оссиг с1ие со г!1ЕЕегепс!а1 шсогрогабоп оЕ Пиогексепс 1аЬе!з Ьу гечегзе сгапзспрсазе ог ойег аззосласес1 сесЬшса1 чапаЬл!Пу. Ра1зе роя6че гези1сз сап Ье зиЪзсапиацу гесЬлсег( ияпц сЫк зсгасецу. ° Иапг!от!хе г!ле аг!л1гекз оЕ аггауег! ЕлХАз оп гЬе кигуасе о1 Иве зиЬкгтасе со сопсго! Еог чапа6оп !п ЬуЬгЫсхасюп йас тау оссиг ас с!!ЕЕегепс 1осасюпк оп йе аггау.
° 1ис!ил/е а !агце питЬет оЕ сои!го!з оп ечегу аггау со чеп(у сЬе киссезз оЕ сЬе ргоЬе купсЬеяз, 1аЬецпц, апс) ЬуЪг!6!гас!оп. Боте гесопипепс1ес1 сопсго!з !пс1иг!е: Рор/иц/кр!/с/иц КХА сопело!к, ъчЬеге тлъ!4Аз зупйеяхес1 Егогп сРХА с1опек Ьу ис чссго сгапзсприоп аге аъЫег( со еасЬ !аЬеПпц геассюп. 1Пеацу, йеке тВ!ъ)Аз аге г(епчег( Егот цепек йас аге пос Ьоспо1оцоик со сЬе огцап!кт ипг(ег зсиъ(у (е.ц., попЬогпо1оцоиз р!апс тВ!ъ)Ак аге изед оп йе Ьипъап ехргеззюп аггау).
ТЬе соцпасе цепез Еог сЬезе гпВ!ъ)Аз А10.14 Арреийх 10: Р21А Апау Темпо!оеу аге гергеаепсетс оп сЬе аггау. ТЬеае сопсго)а аге иаеуи) Еог Песеппшшц чапас!опа ш 61ЕЕегепба1 1аЬе!шВ оЕ аатпр1ея Еог ааааушП сЬе аст!пПепсу оЕ сЬе ЬуЬпйгасюп, апт) Еог са1- !ЬгасспВ йе гас!оа Еог сотпрапюпа атпопи ехрегнпепь, 1исеиясу хеПех с1оиеы, чтЬеге с!опеа Еготп йе отдан!яп ипбег яибу сЬас гергеаепс Ь!ПЬ, шетс!иш, апс! 1оъч ехргеяюп ате гергеаепсет! оп йе аггау. ТЬеае аге сьери1 Еог еас!псас1пц лепят!ч!су оЕ т)есессюп апс1 шеааиппц гйаиче аасига6оп апс1 асаппспи еЕЕесся В!ос)тсио соигго1х Моя аггау ЬуЪпйгасюп ехрегнпепь гет)шге сЬе атЫ!с!оп оЕ со!6 РХА (е.и., Ьшпап С,11 Р)ч)А апс1 ро1уат1епу1к асЫ Сот Ьшпап сР!ч)А ехргеыюп аггауа) со Ыос1с попарес)Пс аппеаПпд шс!ийпц ЬуЬгЫггасюп т1ие со гересгбче е1ешепся 1пс!гьтоп оЕ Ьшпап С,11 РЫА ог о1фо(ЙА) ароса оп Ьишап ехргеаа!оп аггауа аЬои!6 Ьаче Псс1е ог по ЬуЬпйга6оп яцпаНЕ терестс!че е!ешепь Ьаче Ъееп юссеыЕиПу Ыос1сет1.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
