Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (522944), страница 171
Текст из файла (страница 171)
Вас)тогоиит1 ЬуЬпт1сгагтои соитгоЬ. 1с Ь оЕсеп иаеЕи1 со !пс1ит)е Ыап1с аа1с ароь апт! арота оЕ РХА Егош апойег отдана ччЬоае шВ)ч)А ь поС гергеаепте6 !п йе ааттср1е. ТЬеае сопсго!а Псче ап еас!шаге оЕ сЬе попарестйс сошропепс оЕ йе ЬуЪпйгасюп антс аге гьеЕи! Еог аиЬсгассши Ьас)сВгоип6 Егош Ееасиге ча1иея Соисатсиайои соисго1я Р)ч)А хашр!еа йас аге пав пш!6р!е 6тпеа Еог рппсшц астап шау Ъесотпе сопсапнпасет1 счссЬ Ъассепа ог уеазс. Тоса1 иепошк РЫА ог сРХА с1опет оЕ сопнпоп сопсапнпапь ысЬ аа Е. соВ апс) уеаас аге гергеаепсед ш йе аггау со шошсог Еог арипось ЬуЬпйга6опя сРХА зуигЬех!х аит1 Ет)тЕА 1аЬе1 т)иа1!ту соигго1.
НуЪпйгаиоп тпсепясу ь оЕсеп йссасе6 Ьу йе яге оЕ йе 1аЪе1етс аашр1е. ТЬ)а чапаЫе сап Ье пюп!согес1 чч!сЬ арргорпасе т)иа1- Пу сопСго! е1етпепгя рог ехашр!е, РЬСА ЕгаПшептя епсошрааашд 100 — 200 Ър 61ет) асгогь ап епбге иене, сап Ье ароие6 оп аггауя ЕаЬе!е6 сРХА ртоЪеа оЕ Ь!иЬ 1псецпсу ичП ЬуЬпйге еЕПс)епс!у со аП арося счЬегеаа сРЫАа оЕ 1егаег т)иаПсу тчП1 цепегасе ргорогиопасе1у ччеа)сег а)арпа!а ъч)сЬ Егаишепса сЬас шар со сЬе 5' ептс оЕ йе иепе. ° Соитго! оу оеотесгтс агфасся ТЬе иае оЕ асапт)аг6 ПоасшП сочегаПра Еог Р)ч)А аггау ЬуЬпйгабоп аошес!шеа геы1ь !п ипечеп дЬспЬшюп оЕ йе ргоЬе РХА оп сЬе аггау, ччЫсЬ сотпргопнаеа йе ЬуЪпйга6оп.
ТЬЬ ясиа6оп оссига Ъесасье йе ЬуЬг!с!!гас!оп чо1шпе ипдег а сочегаПр Ь яиаП, ъчЬ!сЬ геаи!ь тп 1пейк!епс пшт)пд оЕ сЬе ЬуЪгЫгга6оп ПиЫ антс гепегасюп оЕ 1осаПгетс сетпрегасиге итайепся ТЬе сошргопнае Ь шап!Ееас Ъу деошесг!са! с1ьсог6опа сп йе !шаде тсие со чапас)опа !п ЬуЬпйга6оп ас йЕЕегепс 1осас!опт счссЬ!и йе аггау. Опе ччау со стгсшпчепс сЬ!а чапаЫе Ь со сье ссьсотп-шас!е гасает)-едПе сочегаПрз (аЬо геЕеггес1 со аа "ПЕсета"; ачаПаЫе Етош счтчтч.епезс!.сош/).
ТЬеае сочегаПра ргочЫе верагас!оп апс) еноте ечеп йарегаа1 оЕ ЬуЬпйгасюп ю1ис!оп Ьесчгееп йе аггау ап6 йе сочегаПр. АпосЬег ю1ис!оп )а со сье!атлет ЬуЪпйгабоп чо!шпез чч!сЬ)п арестаПу ссеягпе6 ЬуЬпйгасюп сЬатпЬегя ТЬезе епюге еЕЕтс!епс шнбпц оЕ сЬе ЬуЬпйга6оп ИиЫ, юЬ)сЬ Ьппу тпоге ргоЪе тпо!еси1ех тпсо сопсасс тч)сЬ йе соцпасе сагаес сп сЬе аггау, йгь шсгеаяпц йе пшпЬег оЕ ргойкссче ечепь. НуЬпйгасюп сЬашЬега аге ачат1аЫе Егош ВсЫекЬег ег ВсЬиеП (жхчч.я ипйят!е1) апт! СЕОХТЕСН (тчтчтч.с1опсесЬ.сош). М1СКОАККАтт РАТА М1М)ч)С, АЫА1ЛтЫЬ, А~ЧР МАЫАСЕМЕХТ Весасье пнсгоаггау апа!уась Ь а Ь!ВЬ-сЬгоиаЬрис сесЬпо1оцу, йе атпоипс оЕ т1аса Ье)пг иепегасет1 ь ехрапйпа ас а сгешептсогь гасе.
ТЬе ЬапйспП ап6 апа1уаеа оЕ сЬеае дата сЬеге)оге гет)шге е1аЬогасе ПасаЬааея т!негу соо!я ап6 Паса-чьиа1ггабоп юЕсччаге. А ЬпеЕ деаспрссоп оЕ юше оЕ сЬеае тсасаЬааеа апт1 апа1уяа аоЕстчаге ЕоПочтя ° АпоГ)тег МтсгоАттау РатаЬттзе. АМАР ь а йат 61е, МеЬ-6ггчеп с)атаЬазе зузтегп ъчпиеп еп6ге1у !п РЕИ. ап6 )ачазспрт, апг1 )птепс)ед (ог гье ъч)!Ь писгоаггау т!ага. АМАР зиррогтз Ъой ВсапА!ухе апс1 Сеперит ппапе апа1уяз зо(тъчаге. РигтЬег пш16чапате зтатьбса1 апа!узез аге рег(огшед оп тЬе ча!иез оЬта!пе6 (гош тЬе дата апа1уяз ргопгаш Ьу из!пп М!)се Е!зеп'з С1изтег апа!уяз апс1 Тгее%еъч; Ьой аге !гее1у ача!1аЫе тгогп ъчъчъч.гапа5таптогйес)и/зо(тъчаге/. АМАР, бече!оре6 Ьу а пгоир от" ехрепепсес1 зсгеп6зь ог)п!па1!у (гош астап(огт) Т/п)чегз!ту, ь йе оп1у (гее с1атаЪазе (ачаг!аЫе тгош ъчъчъч.писгоаггауз.огВг) апг) ргоч!с)ез а ге!таЫе апа!уяз апг! с!ага зтогаВе соо! (ог )пчезт!Ватогз ъчптЬ 1611е ог по ехрепепсе ш Ьапс)!)пв епогтпогь атпоипь о( писгоаггау бата.
° Кето!чег (Лизетта 1пр)таттат)сз). Кезо!чег ь а сошргеЬепз1че зтогаце, ч!зиа1)хат)оп, апт) апа1уяз тоо1 (ог 1щЬ-чо1шпе Вепе ехргезяоп дата оЬта)пег) ияпц сР)ь)А ппсгоаггауз, о1!Вопис1еот)6е аггауз, апт1 ойег тесЬпо1оВ)ез. 1т ь штег!асет1 ъч)тЬ а роъчегЕи! 6тзсочегу тоо1 тот ратЬъчау !птеггопатюп, (ипс6опа) пепе азз!цпшепт, апс1 согпроипс1 апа!уз!з, Ми16-ехрегипепт апа1узез аге розяЫе тЬгоипЬ согге1а6оп р!огя с1изтег тгеез, апд ВЕАВТ-1!)се зеагсЬез йат сап Ъе сопг)истес) ъчЬЬ!и йе с1атаЬазе. ТЬгз (еатиге епаЫез йе гьег то регтогш гап)сес) ытп!1апту зеагсЬез асгоя еп6ге баса зета сои!а!и!пц тепз о( тЬогьапбз о( депе ехргеяюп ргоВ!ез. Моте 1п(отша!)оп аЪоит Кезо1чег ь ача!1аЫе ат ъчъчъч.г!!.сош/ргос)зегч/гезо!чег/шг!ех.Ыш. ° Сетте$рппд (Я!!соте беиет)сз) ь а роъчегйг1 апа!уяз апс1 чьиаВхатюп зо(тъчаге зште ачат1аЫе (ог пепошк ехргезяоп ехрепшепь. 11 !з сараЫе от" Ьапб!!пп апс1 апа1ут!пд епогшоиз с1ата зеь (гош апу огдапып.
С!тьтеппц, райъчау с1етеппшабоп, геди!асогу зег!иепсе де!ест!оп, Е!Веппю6е апа1уяз, ап6 а чапе!у о( с)ага ч)зиа1!гат!оп тоо1з аге рппсгра1 (еатигез о( Сепе5рг!пп, А сору от а (гее с1егпотьтгатюп чегяоп апс1 зоттъчаге (ог ригсЬазе аге аъа!1аЫе ат ъчипч.з!репе!!сз.сош. ° !РйаЬ МтсгоАг~ау Битхеуот Мтзстптоз)т (Ясаптт!ут)сз) ь ппапе апа1уяз зо(тъчаге сараЫе о( рег(огш!пц Ьаяс гоитшез (ог ехтгаст!пц апг) ч!зиа!12!пп шкгоаггау с1ата аепегатес1 тготп ч!гтиа1- 1у апу зсапп)пВ г)ечке. Ог!В!па!!у 6ече)оре6 Ьу гезеагсЬегз ат йе !ча6опа! !пз61Ше (ог Ншпап Сепоше КезеагсЬ ()ъ)НСИ), тЫз зо(тъчаге ь поъч а сошр!ете1у зиррогте6 ргос1ист ачаг1аЫе (топь 5сапа!у6сз 1пс. (ъчъчъч.зсапа!ут!сз.сош/зоз/ргос)ист/Ьтз/тп!сгоаггау.Ьтш1).
А Р)ъ)А писгоаггау датаЬазе сап Ье 1гп1сес1 то а гетегепсе с1атаЪазе, тот ехашр1е, йе 1)п!Сепе т!асаЬазе, то а1!оъч ассея то !п(отша!!оп аЬоит раг6си1аг пепез. ЕасЫ)п)Степе ептгу соггезропбз то а япВ1е Ьшпап ог гос1епт депе апс1 ргоч)с!ез а т!!тест 11п)с то СепВап1с цепе ап6 ЕВТ ептпез, то 5гзг155-РКРТ ептпез, апс) то!пега!иге ептпез тЬгоиуЬ РиЬМес1. Вечега1 дгоирз Ьаче Ъерш то аяешЫе сошргеЬепяче!у сига!ее) пепе батаЬазез (ог шапипа1з. 5исЬ т)атаЪазез ъч!11 (асг1Ьате гар)с) ге!Неча) о( )п(отша!!оп сопсегп)пВ йпстюпа1 ап6 ЪтосЬеписа1 ратЬъчауз. Вогпе от' йе г!атаЬазез ипбег стече!оршеп! аге: Ьттр://ппгппцепогпе.аг).)рЛгепх/ гчпъг.т!Вг.огп/тг!Ь/тВЕзЬгтп! Куото Епсус1оресВа о/ Сепез апг1 Сепогпез !КЕСС) 1.осы Рп1г ъч!т 5РАГ! 5!цпа!!пц рзгЬгчау ГгагаЬазе Сепесагг!з ВКГГЕ ЕСАГг 5гап/огь! Вепогпе гезопгсез ГтатаЬазе о/ ггапзсг!Ьег! зег!пепсез 5оптЬ А!псап теат!опа! Вюгп!оггпат!сз 5ТАСК ВатаЬазе ТВ К Сепе !пг)1сез Мгсгоагтау Рата МЫЫК, Апа!уз/з, апг( МапаКетепт А10.15 ппгззъпсЬЬп!т.п!Ь.поч/ЕоспзЕ!и!г/ гч!т.гпсз.ап1.аоч/ЪЧ1Т2/ ггппч.цгг.!гупзЬп-п.ас.)р/зраг)/ Ьтгр;//Ъю!п/оггпагкз.ъге!тгпапп.зс.!1/сагг!з/ ъгзчгг.цепогпе.аг!.)р/Ьг!ге о!4/ ппчгг.г!аг.огц/г!осз/т!Ег-зсг!ргз/ехаг! зспрьЛо!е герогпзр! Ьггр://цепогпе-зллг4.зпап/огг).ег$п/с51-Ыгз/5М1)/зопгсе/зопгсе5еагсЬ ппггч.сЬ~!.пропп.едпЛЭОТ5 чпгпч.запЬ1.ас.та.тъЬазез.Ьтгп! А10.18 Аррепадх 10: Р)ъ/А Аггау Тес/|по/оду п|арр)пд аПоъча |Ье епбге депогпе |о Ъе апа1уге6 )п опе егер ъчпЬош 1аЪопоие 1осияЬу-1осиь депо|ур|пд.
Мкгоаггау-Ьазе|1 депе6с Пп1|аде гпарр)пд ъч)П Ъе иве)и1 |и гпарр)пд депеш йас ип|1егПе со|пр1ех депе6с |гапа ш уеааг ап6 |п йе 6!ьгг!Ъи6оп ог" шею|к гесошЪ|пабоп ечепгь асгоаа йе еп6ге депогпе. Рагаде1 ъчог)с В сдгес|е6 а| абарг)пд йе СМЯ ше|Ьодо1оду |о йе Ьшпап депо|пе.
1п а Пешопягагюп ог" |Ье геаяЪ$!$|у ог" |Ь|а сесЬпнр|е, а депе $ог сопдеш|а) Ьурег)паи!)пеш)а Ьаа Ъееп |парре6 Ъу |Ье СЬеипд 1аЪ. Рго$е1п М1сгоаггауь Аа а со|пр!е|пеп|агу арргоасЬ со депе ехргезяоп ргоКПпд оп сР!чА шкгоаггауя ш)сгоаггауа ог" зрес16с ап6Ьоедев аге Ье)пд Пече1оре6 |о гпеааиге |Ье аЪипъ)апсе ог" |Ьоиьапба ог" гПКегепс ргоге)пь )п аагпр1ез Ко|и сеПя ог |и Ью1од)са! йи)сЬ, аисЬ аь ьегшп ог иппе. Ргеас|!часе6 аиггасеь аге иае6 гог йе соча!еп| иппюЬ|1!аа6оп ог" ап6Ьоедея Ргоге)пе !го|и ехрегипеп|а! ап6 гегегепсе аагпр!еа аге сПКегепбаду 1аЬе1е6 ъч$|Ь Пиогеасепг буев ап6 ЬуЪг!6!хе<1 |о йе аггау. Еча!иаг)оп ог |Ье чаг)оиа арр1)саг)опт ог рго|е)п |п)сгоаггауе ш Пегесг)пд ап6 сдадпояпд 6)аеас $а побег ъчау.
Весаиае |Ь)ы арр1ка|юп ъчои16 пос Ье геа|пс|е|1 |о апбдеп-апПЬо|1у ауа|етя рго|е|п писгоаггаув еЬои16 ргочЫе а депега! ге|юигсе гог Ь)дЬ-гЬгоидЬриг ьсгеепа ог депе ехргезяоп, гесергог-Пдап|$ )п|егасбопя ап|$ ргосеш-ргосе|п ш|егас|юпя!п)оппа|юп оп йе грече)ор|пепг о$ рго|еш аггауа $а ача$1аые ас ъчъчъчопо1депапрдЫе/-ргоге)пдгоир/1ие)с)пдега!риЬ.Ьгт!. Т188пе М1сгоаггауь ТЬ)ь аггау-Ьааеб Ь)дЬ-гЬгоидЬриг |есЬпн)ие гасП)гаъев депе ехргезяоп ап|1 сору-пшпЬег зигчеуь ог" чегу 1агде пи|пЪегь ог" $$аеие ересипепя Рог еха|пр!е, аа |папу аь 1000 суПпдпса! г!ааие Ь)оряев ггот $педчЫиа! пппога сап Ье 6$яг)Ьигед $п а япд!е |шпог г)аеие писгоаггау. Яесг!опа ог" |Ье писгоаггау ргочЫе |агдеп гог рагаПе1 )п я|и Пегесг)оп ог' Р)ъ)А, К)ъ)А, ап6 рго|е)п |агдеь $п еасЬ прес!|пеп оп йе аггау, апд сопьеси6че аесг)опт адоъч |Ье гарЫ апа1уяь ог" Ьипбгеба ог гпо!еси1аг |паг)сегя $п йе ьа|пе аес ог ьресипепя Т)ааие ш)сгоаггауя ъчеге с)ече1оре6 )п йе ОП$- Р.
Кадюп)еш)1аЬога|огу а| йе )ъ)аг)опа! Ншпап Сепо|пе КеаеагсЬ $пя)гиге $ьъчъчлЬдг)л)Ь. доч/Р1К/СОВ/ТМА/аЪоисЬггп1). А тасЬ~пе |о |па)се г)ааие ш)сгоаггауь 1а ачадаЫе $гот ВеесЬег 1пяги|пепп $ъчъчъч.ЬеесЬег)паггшпепгясотп). $ )ье о1 Аггауь Фо Ое1есФ О)ъ)А-РгоФе1п 1п$егасбопь ТЬе росеп6а! ог Р)ъ)А |п)сгоаггауь гог Ь)дЬ-гЬгоидЬри| зсгееп)пд ог Р)ъ)А-ргосе)п )псегасг)опе )а Ъе|пд ехр)оПе|1 |и ьечега! 1аЪога|опея Опе ог" |Ье гпа)ог $псегеага )а йе Пегесгюп ог'ггапасг)ргюпгассог-Ь)п6)пд а)геь ю |Ье депо|пе ип|1ег еПКегеп| РЬуяо1од!са1 сопгП6опя ТЬе депега1 арргоасЬ иаеа сопвггисгюп ог" ап аггау соп|а)п)пд Ьоб| |Ье )п|егдепк ап|$ |Ье со6$пд гед)оп ог йе депоп|е.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
