Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (522944), страница 172
Текст из файла (страница 172)
)ъ)ехд |Ье со|а1 Р$ $А апд рго|е)п соп|епс ог" а сеП )а сгиб-1$п)ъе6 $п чгчо, ап6 а сЬго|пабп иппшпоргес)рпа|юп (СЫР) ехрегипеп| ияпд ап6Ьо|1у арес|Кс |о а сгапаспрбоп гасгог )а реггогшей ТЬе РЬ)А со|пропеп| ог" йе иппшпоргес)риа|е (Р)ъ)А — рго|е)п — апПЬо|$у со|пр1ех) ь 1аЬе)е6 ъчПЬ Пиогеасепс Пуез Ьу РСК апд ЬуЬг)6)хе6 |о йе аггау. А роябче ьрог оп |Ье аггау )а 1Псе1у |о Ье йе |агде| ог |Ье рго|е)п.
ТЬ)ь арргоасЬ В геаяЫе $ог огдап)апы ъчЬоее соп|р1е|е депопис аеъ)иепсе )е )споъчп. Ме|Ьоба |о апа!ухе депогпе-ъчЫе ргосе)п-Р)ъ)А )пгегасг)опт ш уеая аге Ье)пд Пече1оре6 Ъу !уег ап|1 Вгоъчп а| Ягапгогс1 $/п)чегягу. Ра)пд а гпоге депе|а) арргоасЬ, гЬе СЬигсЬ !аЪогагогу $М|р://агер.гпейЬагчагд.еби/дшс/) Ьаз депегаге6 ассауве ог а!пд1е-ьггапбес1 Р)ъ)А о1$допис1ео|Ыеь $аП роьяЫе зе|$иепсе согпЬ~паг!опа) саггу|пд а сопвгапг веъ)иепсе гед)оп а| опе епй ТЬе япд1е-ягапбе6 аггаув аге сопчегге6 |о а ПоиЫе-аггапбе6 аггау Ьу аппеа1шд апд епау|па|каду ехсепсдпд а согпр!е|пеп|агу ргипег.
Етегцзпц ТегЬио!оцзез А за 9 Аггауа сопсасппзц аП роаяЫе регшиса6опь оЕ а ясе ас еасЬ роя6оп зчП1 Еасц!сазе ехр1огасюп оЕ сЬе арессгшп оЕ аез)пепсе-аресзЕзс ргосе!п-Ьзпгцпц ясеа ш цепогпея Вагсоде С!з!р 1п ап еЕЕогс со ааяцп а 6зпс6оп со ечегу цепе !и йе уеаас цепогпе, а поче! ЬсцЬ-сЬгопцЬрпс гпесЬод са побег с)ече1орпзепс ас ЦсапЕогзс С/псчегясу. ТЬе рго)есс за ПеаспЪе6 оп сЬе Ч'еЪ Цзсе Ьсср://аегспепсе-зчзчзч.асапЕогс1.ес)п/цгопр/уеаас з)е1е6оп рго)есс/г)е!есзопаЗ.Ьсш!. А ПЬгагу оЕ уеаас асгашя ЬагЪоппц а Пе1е6оп зп еасЬ цепе, са цепегасей ЕасЬ оЕ сЬе зсе1е6опа !а саццед зч!сЬ а ипкспе 20-шег ЕзЪСА аес)пепсе йас асса аа а ию!есп!аг Ьагсоз1е Еог спз)счЫ- иа1 де1есюпя ТЬе ипхспге оЕ аП якЬ сац асгазпа сЬеп ацозча Еог йе апа!уяа оЕ йе еп6ге цепогпе зч)СЬ СЬе зпашрп1а6оп оЕ а япц!е аашр!е.
ЕЗппззц цгозчй ппдег а чапегу оЕ сопгПСюпя йе 1оаа оЕ а сац спсцсасеа сЬе 1оаа оЕ а соггеаропгцпц бе1есюп Егоиз сЬе рорп1абоп. ТЬе сопсепсга6ои оЕ еасЬ сац са ссесепгппег1 Ьу РСК агпрППса6оп оЕ йе ипхспге ап6 ЬуЪп6!хасюп со а сЬзр йас соптазы сац сошр!егпепса ас дейпе6 роя6опя ТЬия РЬепосуреа оЕ зпсцчЫпа1 асгазпа сап Ье апа1ухезс зи рагаце1. ТЬ!ь арргоасЬ Ьаа ргоьресса Еог пае !и ойег огцап!апм аа зчеП. В!ое!ес$госз!с С!з1рь А пшпЪег оЕ согпраисеа аге Еоспяпц оп сгеа6пц шссгосЬ!Ра пяпц ппсгое1ессгопкя Ъ)апоцеп- сЬ!Ра (зчзчзч.иапоцеп.сош/) сопсасп ргоЪеа сЬас сап Ье е1ессгкаПу асси асе6 спбзчзЫпацу. А аашр1е са арр1зе6 со сЬе сЬзр, ап6 сЬе арос !а е1есспсацу ас6часей зчЬзсЬ ацозча сЬе аагпр1е со Ье сопсепсгасе6 апс) Ъоппд еЕВсзепс1у.
ТЬе сЬзр са йеп зчааЬед ап6 апойег аашр1е арр1зей ТЬпя пш!- 6Р1ех ЬуЪпбсхас!опа сап Ье регЕоппе6 со сЬе ааше сЬзр. ТЬ!а сесЬпо1оцу Ьаа росепба1 аррПса6опа сп а пшпЬег оЕ ойег апа1уаея шс1пгцпц ап6цеп-ап6Ъос1у, епхуше-апЪасгасе, сец-гесерсог, ап6 сеП аерагасюп сесЬпсгспея ОгсЬЫ Вюсошрпсег (Рппсесоп, Щ зчзчзч.огсЬЫ.сош) са Пеяцпшц а ппсгойшсцса сЬзр йас Ьаа ргес!ае сои!го! очег сЬе Позч оЕ ргосеаа сЬеш!са)а ап6 сезпрегаспге шсецга6оп. ТЬза сЬзр за пае6 Еог асгеепзпц БХРя ВосЬ оЕ сЬеье сесЬпо1оцзеа Ьаче зшр!кассопа !и Пгпц асгеепзпц ап6 сПпка1 сцацпоаися ЯЗММАКУ Ргогп ргочзс)спц десаце6 рго61еа оЕ йе 61йегеп6а1 ехргеьяоп оЕ 1ПегаПу сЬопаапс)ь оЕ цепей со ехр1оз6пц ргосезп шзсгоаггауа со Ъш16 а геаопгсе оЕ ргосеш !псегассюпя сЬе аррПса6опа оЕ аггау сесЬпо1оцу аге П)се!у со ргос)псе ап ехр1ояоп оЕ зпЕоппа6оп оп зпапу Ъю1оцсса1 Егопся ТЬе Ппа1 сЬацепце, Ъеуопд йе ешегц!пц сесЬпо1оцзса1 дече1ортепся шау зчеП 1зе зп дече!орйц ейес6че паапа Еог асоппц, аЬаппц, апз) апа!ухшц сЬе спЕоппа6оп.
Аррепйх 11 Вю~п1оппа6сь |ЛаЧ1т! МОПП1, Нпгчегагту отАгггопа, Гас|оп )ш1у Сп|1ЖЬуг сот|| 5рггпе нагьог |аьогяогу ТАВЕЕ А!1-1: В101ХГОКМАТ1С5 5ОГТ1А|АКЕ ТАВЕЕ А!1-2: ОАТАВА5Е 51М!ЕАК!Тт' 5ЕАКСН 5ОГТЪЧАКЕ ТАВ1Е 11-3: В!01!ЧГОКМАТ!С5 ОАТАВА5Е5 А!1.3 А11.18 А11.22 ТЬе Го11очч)пВ таЪ!ев ргеаепт ччЫе1у пает! аоутччаге Гог апа!ух)пВ Ет)5)А, К)5)А, апт) рготеш ае|рлепсея аа |че11 ав т!атаЪавеа апт) суреа оГ аеагсЬеа |Ьат сап Ье регуогшет! Гог РХА, КХА, апт! рготеш ягпс|пге ап|1 6лпстюп. ТЬе огВапгаатюп Гог ТаЫе А11-1 Ь опт!шее) Ъе1очч: ° 0ХА 5е|1пепсе 5пЪ|п)аяоп 5ет)пепсе А)1цпгпепта (Ра)глч)ве апт! Мп!ВР1е) 5сог)пВ Матт)сел Мог|Та ап|1 Раттегпа Оепея Ехопя ап|1 1птгопа Рготпо|етя Тгапасг)ртюп-Гас!от-Ъ)пт!!пав 51|ел О|Ьег Кем!аготу 5)теа ° КХА 5есопт!агу 5тгпстпге КХА-арес)Гу)пВ бепея Мог|Та ° Рготеш 5ес)пеисе А11цпшепт Мот|ТВ Раттегпя апт! Рго61еа Алл.л Весапае оу йе ечег-сЬап51па палите оГ аоутччаге апт! Хог1Й 'лттЫе ЪЧеЪ ятея Ь 15 тчогтЬ |Ье еГГогт то сопял1| йе ге!ечапт '|ЧеЪ ог РТР ятеа Тот тоге шуоппаВоп апе! йе 1атеат чегаюпв оГ аоуттчаге апе! т!асаЪааеа.!п тпокт шктапсея а 11сепае ь пеет!ет) |Т йе ргоВгапь ог т)атаЪакеь аге пает! 1ог соиипегс|а1 рпгроаея аее еасЬ я|е Гог Епгйег шуоппаВоп.
Сопппегс)а! ргоцгапы Ьаче пот Ьееп шс!пт!ет) |п тЬ)а апгчеу. Рог пюге шуогшатюп оп тЬеае оргия геуег то |Ье15теЪ 5!тел оГ |Ье ге1ечапт сотпрашея А11.2 Аррепг//х 11: В/о/иЕогтог/сг )и агЫйюп го гЬе аресгйс а!геа Еог хойер аге апг) дагаЬаьея )Ьеге аге аечега1 "цагетчау" чЧеЪ раВеа Ейаг ойег ассеаа го шапу оЕ )Ье а)геа!пав !и гЬе гаЫея аь тче)1 аа со аг)йг!опа) ягея ТЬе Ео11огбпц ЮеЬ рацеа оЕЕег а аоо6 згагг!пВ р1асе Еог гиапу аеагсЬея Ха6опа) Сеп)ег Еог Вю)есЬпо)оВу 1пЕогша)!оп )ХСВ1) ЪЧеЬ Яге: Ьггр://м гчъч.псЬ!.и! ш.п)Ь.аоч ТЬЬ яге оЕЕега а гчЫе гапае оЕ г)агаЬааеа апд аеагсЬев ч)а ччеЪ-Ьааег) !пгегасг)че Еоппя )пс1ий )па СепВап)с, РиЬМей ВЬАВТ, Вепопге Ь)о)оау гевоигсеа апг) дагаЬааея сапсег геаоигсеа ап6 багаЪааея апс) шапу о)Ьег геаоигсея ТЬеае геаоигсеа аге !пгеВгагед Ьу Епггег, а аеагсЬ апг) гегпеча1 ьуьгеш гЬас а1ао !пс1ибеа сгоаягеЕегепсе6 )пЕогшаг)оп. ВиЬш)аяоп го )Ье СепВап)с с)агаЪаве сап Ье гпаое Ьеге.
Вау1ог Со))еВе оЕ Мейсгпе ВеагсЬ ЬаипсЬег 'чЧеЬ Яге: Ьггр://ччгчгч.ЬВас.Ьсшлшс.ейи/ВеагсЬЬаипсЬег 'ччеЪ-Ъаьег) шгегасг)че Еогпь апс) 1)пБ аге ргочЫе6 Еог гпапу гуреа оЕ аеагсЬея )пс!и6)па пис1ек асЫ, ргогеш аег)иепсе апг) раиегп, арес)еа-арес)йс ргоге)п, аег)иепсе а)!Впшепгя аепе Ееашгез, апг) ргоге)п аесопг)агу аггисгиге, ав гче!1 аз Еог гиапу аег)иепсе ш)116ея ТЬе ВапВег Сепгге ЪЧеЬ Яге: Ьггр;//иичгч.аапцег.ас.и)г чЧеЬ-Ъааег) шгегасбче Еогшь апс) 1)п)са аге ргоч)бег) го а и!Ае гапае оЕ г)агаЬаьеа апо аойъаге и616!ея !пс)и6!пц гЬе шаиу аепогпе ьег)иепс!па рго)есгя ЕВ1-Еигореап В!о!пЕогшаГ!сз 1пвГ!Ги)е, ВМВЬ Ои)аГабоп ЪЧеЪ Яге: Ьггр://гчгчлч.еЬ!.ас.и)г Ч'еЪ-Ъааег) шгегас6че Еогша ап6 1!п)са го дагаЬааеа апг) аойгчаге и616)еа аге а)чеп.
ВиЬпйяопа го ЕМВЬ Раса Ь)Ъгаг)еа сап Ье шаде Ьеге. ЕхРАВу Мо1еси1аг Вю1оВу Бегчег-Ехрегг Ргоге!и Апа!уяа Вуа)еш, Яч!аа 1пв)йиге оЕ Вю!пЕоппа6са 'чггеЬ Яге: Ьггр://и гчгч.ехраву.сЬ ТЬЬ ргосе)п-прес)Егс яге ргочЫеа а и Ые гапке о! 1)п)са го г)асаЬаае апг) аойыаге и61йу гегоисеа Еог апа)уа)а оЕ ргоге)п ягисшге апг) Еипсг!оп. Рог пюге ехгепяче шЕоппагюп оп гЬе шагЬешабса1 апг) ага!)агка) ипбегр)пп!пу оЕ Ью!пЕогшаг)са аойгчаге, аа гче)! аа шеуйой Еог г)агаЬаае аеагсЫпа апг) апа)уяз оЕ РХА, КЬ)А, апг) ргоге)п аес)иепсе, р)еаае атее Моипг (2001). и СС О 0" ОС М 00 Я с.а с й О". О О а .,0 Е о 0 4 о — .О Е ж О О 0 .О а3 .с д Е с — Е с 00 с са Е 3 3 а.— д ~-. Е Ос„ с с .Я с.
0-0 ЕО .М С 0 с Е 000 а. о О о с а. с д Е с„с Сс М с Ж с О Е с .м с с о с Е с 0 о с с о .а О 1 д 'а Е И й ш с Е ::.$ О Од О Р ух о ~. < Д СХ .М с .а с О о 'а < 0 < с о .о с Е о ай с о а < с С О О й О Е с с с О' О с :с а. 00 с о о ) о "О д 0 .а Е < Оо < .с Е о Е а. 'О Е < 0 0 й а д о о с Е ст - 3 Е ОО б о д. 0 'Е й .О 00 с Е й 00 О' ' с о О саа осо с д д с о сд О, й Е О с Ч с с Е= Е а. О.
О с о Е а й о О а „. О с О д с ос О Е с 0 й й О О с -Е а Е од а о .О :ю .с Е с о й' о Е '= д о с З с о О с 0 о 0 о О С о Е о .О й с Са .О 0 о ') 0 с а Е с сй Оао — Е с -'О.а д с й йО д о 6 .а 'О с й с ай О Е 0 0 од с с 00 Д д Е а 'я о о й 00 о о О. с а 'Е й О' о Л О .с о .с о с Е.Е о с о о Е'1 Ы О.о .0 00 с 'а.- О о 0 о д-8 у ~ о 0 00 < с с о Е с с о о О о о О О 0 0 с о с с О а с О о 0 с Е 'О с о О -' с "Е с С,"0 О' ~ д Е'Е Е с 'О ' с с с Е С О о 4 С 0 сс Е о О. с 'Е 00 о 'О и О о с Е й О' с О' 'Е .а й д СС О Ед О О д й сс Е с с сс Д " '3 о В о .а Е с о" 3 'Е ж д с й О с ° с й о Сй'Я М й .а О" а:Оь .О й са сО О,„ с а .Х са <Е й, 03 .К с л с с о -О О о Е О й о 0 О о с о с с с й й а о а 0 "ОХ и % 00 О Е О Г М О 1О Е с .О с о "О О с д 'О с о о .М а .с с Е О о 00 .с с Е с д Г ~ Е с .с дс с М с а 0 .с с Е с с з Е О.
-О с 'Е О' И ) о 00 .с с Е с ОЕ с й О О с '0 ,с о .й О д СО 00 'О й 'О с ' 0 О Ю .а о. > а сЛ Ф ОС о сл а й Е о с о 00 а.' х Е О Е Е 00 О 0 о— 0 0 < О с й д с М с Е Е ,Л 0 с с о 0 'О Е о- й .с с а 'Е й О 0 с О 01 ь 'О О 0 О 0 а 0 ~ с . ОС О Е 00 о с. < 0 О < у % О О < ЫО ОО 0. с Са .ь Д М а ,00 О 00 О .с О Е О Е ь й О О 'ь ь Е О О О ь Е ь Е 00 Е ,00 ь ь ь ,й Е О с Е ,СО О с О О ~Л ТаБ1е А11-1 В1о1а10оста11л Во1100ате А11.3 с с сд 'Я о Е о й о 00 00 .й' с Е с д с ЕЕ -О дд .0 Е о СО О с < 1 00 А11.4 Арревйх 11: В1о1й1оппа11сь с О О. О' о "о с а о Е о аа .О с 'О о Б о Ел аа Е с с о Е о О е о Е"" с О Е а 3 а ю .