Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (522944), страница 169
Текст из файла (страница 169)
Соттегс)а! а|гауз аге а1ю ача11аые 6от Нузес) (илчгч.Ьузег).сот) ап|! 6|гагацепе (|ч|ч|ч.з|га|а8епе.сот!цс!8епе.Ь|т). СЬо!се оЕ ап Аггау буьЕегп ТЬе сЬоке оЕ а РХА а||ау Еог а раг|ки1аг ехрептеп| геои!гез сопз!дега|)оп оЕ |Ье ехрепзе, г)ез!ге|1 |1епягу оЕ РХА оп йе аггау, герго|!ис)Ь111гу атопц сЬ)рз, апг! гуре оЕ РХА |о Ье птпо- Ь!1)хес) оп |Ье я|гЕасе. ТЬе 6гзг г!ес)з!оп |з зчЬегЬег йе сЬ!рз зЬои16 сопгаш птппоЬ~!|хе|1 сРХАз ог зЬогсег о1!цопис1еогЫе зе|!иепсез. сЕ|ХА загпр1ез п|из| Ъе зропе|1 оп|о |Ье сЬ)рз аз согпр1е|е пю1еси1ез, |чЬегеаз о118опис1еогЫез сап Ье еаЬег зри|ге|1 ог зупгЬеягег! оп |Ье зигЕасе оЕ а сЬ~р ъчЬЬ Ь18Ь 6|1е16у.
Апо|Ьег ппрог|апг |!ес!зюп !з ччЬегЬег |Ье изег зч111 та1|е |Ье аггауз ог ригсЬазе йе сЬ|рз. ТЬе а|Ь апгадез апг) с)!заг!чапгадез Еог еасЬ оЕ |Ьезе |зюез Еог еасЬ арргоасЬ аге ргезеп|е|1 ш ТаЫе А10-3. Онееесесе оЫ ЯСУсета о~ОНА Мйтоаееауе А10.9 Е О с .О с а 'О с О. Е о ад Д »ох о о о .Б 'О О О с О о с О ал Е < м с о с а Е о О. о О х Е Е Е Я о с )Е а Е о а С» 'О Е О.
о '-" — с О »-'й "О с а с оХ а с „О с Е И 1я. х 'С а Б а о .4 Бо :О»..с « .с О Е а о»й а ао о с лх с ° с Е О С с Е О о С» О ° с»Е Д »Д с'Оса а .а Б В о С О Е О с о с— а ай 'Е л .с »й О Е Е а Е »й с с с О Е о < а Ю а ад :е = с а а "Дл 'О с о О. с О о О. И Е "О с < х Д О а Е Е Е О О с с о с о О о.
л "а Х О О х О ю О 8 о Е Е '' Е Е л ) „, а .4 Е .с Е Е а м о „. ОБ Б-,8 Ь~ а О » О с й х $ Е~ Е о с .С й о с а .С 8 с .Б Е 0 „с Е В о Е с о с о Е В Е с8 с о о л а < й О Е о Х ОБ о х Я~ О» О х О О» 'О с с а— Е О Е Е с - с о с „о Д с о с а ). с < Д Е Е с о а О. х с с 4 7 Ех а.— а~ .о Д О с О о О. Х .о о лБ Е о "Е с с с с ,о „ Б О Б о о с й о с Д Г< х о » Ой » »с С О'О - ос а с О с » — о »й < о Е а с й с О. О О О Е о Й О С О о й х с 'О .й О ас х к о йй О Б'о хо а с а .с с "О '.с Е Е О с , С» ~.с Е- а о О с о О а с с о а О.
Я О ) й а ей Д ОС и С О» Д о с а с с а с с о С..О о ). О с с с а. Е ) о о с о с СЕ "с с й о с о а Б Е о Е О -О о с .с о Е О ОО. О О »й о с О »й 'с с о О .а О а- с .с с с о О Е о с й "О Д о Е аа О, О с О О 'й й Е сЯ„ .О Ч а а с с Е О 'й с с с сЕ;, О с< -' Е с о О с с с а ОВао С О Есх с о Б Е О .О .с О»с» О о с с о, Е О о Е .с со ох »й СО х .с а о Е 'Б о" с »й Е ло .О .а а. Е < 'О 'О а О с О .С О" Ы Е о с » с с о с с о Е оо Е о Е о с о с й о .С— хе д с о с Е сс .с < О с' 'Е с ° с ОЕ 8ОО - О "с с Е ..' О 'Щ Ео 0 о ) О с с Е а, Б.с д с о Е О л Ь.а<„ с „, ° а ДД»й ООД Х О с И а с Ех о О. Е О. о а .а с с 8 о Л ' хо Да Е Я Е а О Е Е с с а с < Е с Е»» с Е Е о а с со с а с »й о » с о .с Е »й о .с О а Е= Е с с— с» с» с с о а а < м о а о Б О а с й с - з О Х О о с Е— .
6. о с йй ай )- Е .С Е— О Бо и ах О хй о О=Я Б с 0 Ы С О С О .с а.Е с й с з е О О с О » "й о с с а »й а с О с О а )- оо о < .а х д о Х о с Е а »й с < с с о о с о »Е ) е о с с с с о » о' Ж.О с с »- Б - О ао а ~', О. »йр ДЕ Л О с .С ») , с Х» О» с Е Е О со с о. с Б ООЕ о .Б сй О Х С "О до 8 $ с < а с о о а о о сс й аВ С О о .О ).'О «о с О С „„с .со Б с о с с »й Р О О.
о а О. а а О. о с < о О. Е О Е '> Д .о .О с О Е с »,» О Е с О 'о» о »й с О о о Е о о ) 'ж х < о с о а Я ,» а а с а о О .— о Е Ею С О.= осе о с о Я Е 'й Ч О с с Е с Е Е О ОР о ,» Е о Е „„„ х с Х с оа л о О о Бо Е Е Е О а с а о с о с »й с О о ) л Е ° о .а с х сД вЂ” с 'О с Е с о х Б й ох 'О й а Б .О с— »й с ° с Б о О с с „ а с й о Е О »" О О о .с о 'О о .с о с о й Е 'О о О О .о с )» » о О. < х Д Е о с ж а .о Ю с» О» О» О О с Б Е с Е 8 Е :- о .О » о ссс л о с о О Е "О с с » о с 'О О -.Б х с $ р с с о и» Е Е с О, » Е Л о„ д о с О о .о х »й с Е О. о с о а ) О О О О 'О Е о Е о 'О 'О о 'Е Д х с» с О О а .О .О Б с О О о о Б — со ас О8) й о с О' с 0 0 'О с О Е а .Р о е Е 4 о с .с о »й о с .О ас »й о ЕО й о ра о Е о .с О О а~- с с с Е О с а О о с .О О Е О 'йй а.а 'й с с Б о — са Е „".
'Ъ 8 а '. я' а~ о 8 с О С х О | О о о' с о о 8 Е о Б О Е »й с»й с 'Е а с 'Б о с а с о Л Е'Е О~ о Ю О а а О О| о о ай О о Е.О ле А10.10 Аррепйх 10: Р1|ГА Аггау Тес!|по!ору ТАВЕЕ А10-3 СЬоке оГ ап Аггау Вуа|есп АакАЧ Туре АОЧАМТАСЕ5 015АОЧАМТАСЕ5 СОХА аггауь Опаопнс1еосЫе сЬ|рь Ношегпассе ьуьсепм ° Епппед ЙеюЬЙ|у ° СЫр соьы аге ехсгепк!у ЫЕЫ ° иьег я СогаПу г|ерепг|епг оп онгьонгсегС ргог|исПап о|сЫрь. Соиппегс|а| ьуьсегпь мапср!е Ргосе55!щ апе! НуЬТ!Г11ка6оп Опсе йе аггау Ьаь Ьееп рппсесс ог ригсЬаьей йе пехс 5|ер |5 со ЬуЪпйее а1аЪе!есс ргоЬе со йе !пспсоЪ!1!Ее|1 РсхсА5 оп СЬе аггау.
ТуркаПу, йе ргоЬеь Гог аггауь аге !аЬе1е|1 гергеьепгаг!опь о1 се11и1аг ОЖГХА роо15 !5о!асес! Его|и наг!оиь Ъсо!оа!са! геьоигсеь, аисЬ а5 се11 си1|иге5, 655ие5 оГ птоссе! остап!5п|5, с!|и!са1 Ь|оряеь, апсс Ь!5со1оа!са! ьа|пр1еь. Реса!1есс ргососо15 Гог ргераппа йе ргоЬе ьа|пр1еь (!пс1ийпц !5о1ас!оп оу сс!ч!А, ьуп|Ьеяь о1 сРГМА, апсс |псогрога6оп о1 йиогеьсепс с1уеь) ап|1 ЬуЪпйх!па йе ргоЬе псо1еси1е5 со сЬе ип|поЬ!1гае|1 РсчГА аггауь аге ана!1аЫе оп йе ГО!!оса!па чсгеЪ й!сеьс АчаПаЬ|1пу оГ 1агае попгегснпг|апг, ьес|пепсеча!Ыасегс с!опе ьеы Ггош Ййегепс огаапипы. ° Весаше рпог юг|пепси спгоппасюп ы пос гергей СОХА аггауь аге ап ехсеПепс сЬоке Гог Пепе йьсочегу.
° СОХА яае Ь оршпа| Гог ьрессйс ЬуЬпааас!оп. ° ТесЬпо|оау Гог *ронша ОХА оп 5!аьь апгс пкшЬгапеь Ь геасп!у ачас!аЫе. ° НГВЬ-гсепясу сЫрь сап Ье ГаЬисасей ° 1п ь|сн ьуийея* оп |Ье сЫр Вепегасеь сопь|ьсепс апд ниаогш Пеошесгу оГ ьрось. ° ОПВопнссеос|ае аггауь шау Ье шед Гог Вепосурспа аь гчеп аь Гог Вене ехргеы|ап апа!уяь. ° Маспыпппа!агае соПесиопь о| с!опас| ОХА шо1есп!еь Ь по1 еыепгса|, ° Весаше опаопнс1еос|аеь аге ге|аВче1у ГЬоп апгс сап Ье г|еяапегс |ог апу Вене геасоп, опаопнс1еосЫе сЬ|рь сап Ье пьес1 Гог ьес!Пенс|на, ЫепППсасюп оГ ро|упюгрЬсяпь, апс| расепссапу Гог Ыеппасаиоп о| ййегепс сгапьсирс ьр!ке чапан|а.
° ТесЬпо1оау Гог аггау ГаЬпсапоп |ь геагсау ачаааЫе апгс кеП ьшсес1 со 1аЬогасогу хесе|па. ° Опсе йе |ппаьсгнсшге Ь еьсаЫВЬей Ь Ь а 1еы ехрепяче иау оГ шаЫпа апауь. ° Оп!ни!сед пшпЬег оГ аггауь сап Ье Вепегасес| аь гег|шгес| Гг|н|се нье|н1 сопьЫеппа пнсгоаггау ехрегсшепы аге реггагшегс к|ГЬ а |агае пшпЬег оГ аыауь1. ° Ьсоьс ПеяЫе апсс чегьаспе гчау со ьсш|у апу ачапаЫе Пенес. Хегч Вепеь сап Ье асЫеа еая1у.
° Оьег Ьаь сагпр1есе сопсго1 очег йе геьеагсЬ апс| Ь |еы гсерепгсепс оп сопниегся! сошрашеь. ° 1|пКопппу ш сЫр с|наПСу. ° Внгг|еп оГ ргогснсС1оп апг| г|напгу сои|го! ы оп СЬе пяпнгасшГеГь. ° Оьег Ьаь ассеы со ргарпесагу сесЬпо|оеаеь апгс рггчасе с1опе геьонгсеь. ° !псеагасег| рас|сааеь аге ачаааЫе йг аггау ЬуЬиопхаиоп апг| йочгпьсгеаш ш|опиапсь, 1МАС1!ЧС А!Ь!Ег А!Ь!А1.'Тй!$ ОЕ ТНЕ АККАСГ ° Ргосеыспа с|опеь со Вепегасе рг!Пс-геагсу шасепа| Ь сшпЬелоше. ° Оепясу оГ рипсе|1 СОХА Ь 1окег йап Гог |па|си-ьупсЬеь|кгс о!щопнссеос|аы.
° СОХА ьа|непсеь шау санса|и гереисае ьесргепсеь яссЬ аь А1и сп Ьшпап 3' ОТКь аг В е!егпепьпп гог|епс 3' ОТВь, геьн!Впа |и сгоыЬ|ЬгЫяапоп, ° С|опе ашЬепс|сапоп сап Ье а ргоЫегп. ° ТЬеге Ь ап аЬьо!ше ьег|непсе г|аса гес|шгепсепс йг г|еяаи|ПП опаапнс|еасЫеь, ° ОПВопнс1еос|де ье1ессюп гн|еь аге пос киП Йеапей ° 5Ьогс ыг|непсеь аге пос йе Ьеьс сагаеы Гог ЬуЬпхпхапоп апй сЬеге|оге, арргарпаы сопсго1ь пшьс Ье сне|идей ° О1|аопнс!ео|Ые сЬ|рь аге ехсгеше!у ехрепяче нпгс |Ье снггепс шапяасснппа ргосеьь и спЬегеп|1у шпехсЫе. ° ||ьег гпшс 1еагп со гсеь|ВП апс| ЬшЫ сЬ|рь.
° Хос ГЬе ьуьсегп оГ сЬоке |Гоп!у а япаП пшпЬег о| аггауь аге пееаесс ог а Ппнсеа пшиЬег оГ ехреппмпы аге ресуоппес| Ьесанье сарсса| соьы гнп ЫЕЫ ГТЫь соьс сап Ье ссгсншченсегс Ьу еьсаЫ!ГЫПВ саге Тасс!Ыеь апа ГЬагес1 геьонгсеь.1 ° ТгасЫпа оГ с1опеь апсс риис псасеиа1 сап Ье сшпЬегюпк апг| епог-ргопе.
1таегщ апг/ Аиа!у|6| и/' йе Аггау А10.11 Ое1есТсоп оЕ Йе Ну/3тсйха(соп Ьсдпа! АЕсег ЬуЬТ!с((гас!оп, йе ЕЗДА писгоаггау Ь ясаппед со пюшсог йе Яиогеясепсе оЕ еасЬ ргоЪе сЬас |чая яиссем(и11у ЬуЬпйгей со йе сагйес. Мояс писгоаггауя ис!!!ге сч о ЙиогорЬогея, сурка1- 1у, йе |пояс сопипоп1у ияе|1 йиогорЬогея аге СуЗ (Вгееп сЬаппе1 ехс|сабоп) апд Суй (ге|1 сЬаппе1 ехспа6оп). То йепегасе а согпр1есе п|кгоаггау !шаие, К ь песеяяагу со ассриге ап !шайе Еог еасЬ оЕ йеяе йиогорЬогея. 1п Вепега!, сччо 6!ЕЕегепс ясапп!пц арргоасЬея аге ияей (1) яес)иенс(а! ясапп!пй асс)и!Тея опе !шайе ас а йпе ап|1 йеп Ъш1|Ь сЬе гасю !шайе а(сег ас|1шя6оп Ь сошр1есей апг( (2) япш!сапеоы ясапп(пй ас|ршея Ъой !шайея ас сЬе хаше сппе.
А)сЬоицЬ а гапйе оЕ ясаппегя Ь ача|!аЫе, К Ь сИйси!с со )иййе йе(г ге!а6че регЕоппапсея ас й|я сппе. А !!яс!пц оЕ ясаппегя апй |Ье|г посаЫе Ееасигея Ь ргеяепсед |п ТаЫе А10-4. ТАВЕЕ А!0-4 5саип1ий 5уяСешя 5сА|ч|чсис 5чятем Реясасчтсояс 5оиасе ТЬЬ ЫКЫу сошрасс ясаииег Ьая 10-сии геяо1ис!ои аид яии|!саиеоня йна! |чаче !еий|Ь каиший. !ся ша1и ясгеийсЬя аге а чесу яЬогс ясаи сине аи|1 регЕесс ри|е1- со-р|хес гей(ясгасюи оЕ сЬе ииайея |и Ьой сЬаиие!я. (Кеерсиц |Ье р|хе!я |и гей- иаег Ьеьчееи сЬаиие1я Ь а ргоЫеи| ойеи апас|асей чисЬ йна!-счаче1еийсЬ ясаииел,) 1| аЬо шс1и|1ея е!аЪогасе ипайе аиа!уяя яойсчаге.
ТЬе Ахои ясаииег Ь снггеис1у 1иийей со няий ои1у пчо йиогорЬогея. 6еиер|х 4000 Ахои !ияспииеиЬ, 1ис. чичю.ахни.сош ТЫя ш(сгоаггау ясаииег н61Ьея а сои(оса1 1аяег кЬЬ а гею1нсюи оЕ 10 иш аис) шс1н|1ея айчаисей яойсчаге Еог ииайе асс(н(я!бои, ипайе аиа1уия, аий Йаса ииший.