Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (522944), страница 139
Текст из файла (страница 139)
о о. ЧФ л < ы Ю о ьы Ь о. й < к 0 й е ~ о й. Ь О < О к И < Ь л — о — 8 у о х о х о ! о= у о ь о +е — о — о е о о о х ь Ь .й — о — 8 ! у о х о ! о о о :~8 л — о — о о у о у о Аииио Асиб о Ф о о' ю О О о Г СР 3 о л О о, о о 'о о к о о 6 к о. о Я о о о о 'о О о с о о о 'о о о о о о, о ° ~ — о — 8 х х о — о о у о х у ! 8 +~ — о — о 1 у о ! о о о Х о ~к — о — 8 1 х о 1 о о о .й-о — оо 1 х о ! о 7 у о х ! ,.
*„1 1 ох тт ох / о — о Х о +т — о — 8 1 о о 8 ~~ — о — о х х о — о ! о о +~ ~— о — 8 1 х о о=о Ы" х у ! 8 ~~ — о — о 1 о о :-~ — о — 8 ! о о о А8.3 АВ. 3 А8.3 А8.4 А8.5 АВ 5 А8.5 А8.6 Негпосу1огпе1гу Сооп1!пВ 1г!аЬ|!!1у 51а!п!пВ А8.6 А8. 7 А8.9 А8.9 А8.11 А8.12 А8.19 АВ. ! Аррепйх 8 Согпгпоп!у 0ьед Тесйп~циеь ~п Мо!есЫаг С!оп~пц РКЕРАКАТ!О!х! ОГ СЕА551АгАКЕ А!х!О РЕА5Т1СИгАКЕ 5!!!соп!а!пВ С!аааиаге, Р!аьВсиаге, апг! С!ааа й~оо! РгерагаВоп о! Кйаье4гее С!аааи~аге РКЕРАКАТ!О!х! ОГ 01Асг'515 Т!3В1!х!С 5ТОКАСЕ ОГ ВАСТЕК1АЕ СИ.Т13КЕ5 51аЬ СнЬоге ° Со!1игеь Соп1а!п!пВ С!усего! Е5Т1МАТ1ОЬ! ОГ СЕВЕ !хПЗМВЕК Р!ЗК1Г!САТЮЬ! ОГ !хП!СЕЕ!С АСЮ5 Ех1гасВоп иКЬ РЬепо1:СЫогоЕоггп Огор О!а!уа!з СО!х!СЕ!х!ТКАТ!!ЧС !х 1ЗСЕЕ1С АО05 Е1Ьапо! Ргес!рПа1юп 51апг!агг! Е1Ьапо! Ргес!р!1а1!оп о! 014А !и М!сго1оВе ТоЬеь Ргес!рПа1юп о! КЙА и ПЬ Е1Ьапо! Ргес!рПа1юп о! 1агВе КНАь иг!1Ь 1!1Ыогп СЫогЫе Сопсеп1га1!пВ апг! Оеяа16пВ Нас!е!с АсЫа ичгЬ М!сгосопсеп1гагогь Сопсеп1га1!пВ Хис!е!с АсЫа Ьу Ех1гасгюп иг!1Ь Вогапо! Я!ЗА!х!Т1ТАТ10!х! ОГ !х!13СЕЕ1С АС105 5рес1горЬо1огпе1гу о! ОНА ог КНА Г!оогогпе1пс 12оап81а1!оп о! ОНА Уа!пВ НоесЬь1 33258 Ооапг!1аг!оп о! ОооЫе-ь1гапг!ег! ОНА Оа!пВ Е1Ь!г!!огп ВгогпЫе 5агап Чlгар МегЬос! Оа!пВ Е1Ь!г!!игп ВгогпЫе ог 5уВК СоЫ АВагоье Р!аге Ме1Ьог! М!п!Ве! МегЬог! А8.12 А8.14 А8.1 6 А8.16 А8.1 6 А8.18 А8.20 А8.22 А8.23 А8.24 А8.24 А8,24 А8.2 Аррепйх 8г Соттоп!у ЕГгег1 Тес!гпщиег т Мо!ееи!аг С!опгп8 МЕА5Е!КЕМЕЫТ ОГ КАР!ОАСТ1Ч1Тг' 1Ы ЫЕЗСЕЕ!С АС105 Ргес!р!гаг!оп о! Мис!е!с Ас!гЬ иг!й ТпсЫогоасеПс АсЫ АдаогрПоп 1о ОЕ-81 Е!Нега РЕСОЫТАМ1ЧАТЮ1Ч ОГ 5ОЕЕ!ТЮЫ5 СО~ЧТА1Ы1ЫС ЕТН1РШМ ВКОМ10Е Кегпоч!пВ ЕЕЬЫвт ВготЫе !гот ОНА О!арое!пВ о! ЕЕЬЫшт ВготЫе Оесопгагп!пагюп о! Сопсепггаге8 5о!иГ!опт о! Е1Ыг!!ит ВгогпЫе !5о!и1!опт Сои!а!и!пц ) 0,5 т57т!! ОесопГагп!па1юп о! О!!иГе 5о1иПопа о! ЕЕЬЫшгп ВготЫе (е.В., Е!есггорЬогеаЬ Визг Сопга!и!пВ 0.5 рВггп! Е1Ыг!!ипз ВгогпЫе) Согптегс!а! ОесопГапнпаПоп К!Ь СЕРЕ1ЕТКАТЮЫ СНКОМАТОСКАРНг' Ргерагагюп о! 5ерЬайех Со!игпп СЬгогпа1оВгарЬу 5рип-со!игпп СЬготагоВгарЬу 5ЕРАКАТ1ОЫ ОЕ 51ЫСЕЕ-5ТКАЫОЕО АЫО РОЕ!ВЕЕ-5ТКАЫОЕР РЫАь ВУ НУОКОХгАРАТ1ТЕ СНКОМАТОСКАРНУ ГКАСМЕЫТАТЮЫ ОГ 01ЧА 5оп!саПоп йеЬи!!каПоп СЕЫТК1ГЕ!САТ1ОЫ 505-РОЕУАСКУЕАМ10Е СЕЕ ЕЕЕСТКОРНОКЕ515 ОГ РКОТЕ! Ч5 КеаВепЬ 5ТА1МЫС 505-РОЕУАСКУЕАМ10Е СЕЕ5 5!а!и!пВ 505-Ро!уасгу!атЫе Се!е и81Ь Соогпаьа!е ВпП!апг В!ие 51а!и!пВ 505-Ро!уасгу!агпЫе Се!а е81Ь 5!!чег 5а!Ь ОКгПЧС 505-РО1ХАСКУЕАМ!РЕ СЕЕ5 1ММЕ! ЧО ВЕОТТ1ЫС Тгапйег о! РгоГе!пь 1гот Се! 1о ЕПгег Турец о! МетЬгапеа 5!а!и!пВ о! Рго1е!пь г!иг!пВ !пнпипоЫоЕПпВ В!осЫпд АВеп1ь РгоЫпВ апг! Ое1есПоп А8.25 А8.25 А8.26 А8.27 А8.27 А8.27 А8.27 А8.28 А8.28 А8.29 А8.29 А8.29 АВ.
30 АВ. 32 А8.35 А8.36 А8.37 А8. 39 ЛВАО АВ. 41 А8.46 А8.46 А8.47 А8.50 А8. 52 А8. 52 А8.53 А8. 54 АВ. 54 А8. 54 Ргерагабои оЕ Яа5ячаге аиг) Р)аз6сшаге А8.3 РКЕРАКАТ)ОЫ ОЕ СЕАЬЯАЕАКЕ А~ЧО РЕАЬТ1СЮАКЕ СА!)Т1ОЫ: Р)еахе аее Аррепйх ! 2 Еог арргорла)е Ьапг)ппа оЕ гпа!епа1а гпаг)гег) чиЕЬ <! >. АП 8)аах!чаге хЬоц)г) Ье хге61гхег) Ъу ацгос)ач)п8 ог ЪаЫп8. 5оше, Ьц! по! аП, р)аы!сччаге сап Ъе ацгос!ачей с)ерепйп8 оп ЕЬе гуре оЕ р)аапс.
Мапу !геша оЕ хгегП!хе!) р1аапсъчаге аге сопцпегсгаПу ачаг! аЫе, АП оЕ )Ье ргосег)цгеа сопцпоп)у цхег) ш пю1есц1аг с1оп!п8 хЬоц)6 Ье сагг!ег) оц! !п Ыеп!е 8)ааа!чаге ог р!азгкшаге; )Ьеге !х по х!8п!6сап! )охх оЕ шасепа1 Ъу аг)аогрбоп оп!о )Ье ацгЕасеа оЕ ЕЬе сои!а!пега Но!чечег, Еог сеггагп ргосес1цгеа (е.8., Ьапд!)п8 чегу япаП грлап66еа оЕ а!п8)е-аггапг)ег) РЫА ог аес)цепс)п8 Ьу ГЬе Махагп-Я!Ъег! гесЬп)г)це), Ь га Ьея Со цае 8)ая!чаге ог р)аапс!чаге гЬас Ьаа Ьееп соасег) гч!)Ь а )Ь!и 61гп оЕ я1копе.
А яшр1е ргосег)цге Еог я1- копылп8 япаП Ьегпа ацсЬ аа ргрессеы гцЬеы апг) Ьеа1сега !а 8!чеп Ъе)очч. То я!копгхе 1аг8е Пеша ацсЬ аа 81ая р1агея р)еахе геЕег го )Ье поге а! )Ье епг) оЕ )Ье ргогосо!. Я1)соп)2)щ С!а85ччаге, Р!аВЕ)сччаге, апд С!а88 ЪЧоо! ТЬе Еопоччгп8 ше)Ьог) ччах хцррПег1 Ьу Впап 5еег) !МаахасЬцаець бепега) Ноар!га)).
1. Р1асе )Ье 1[еша го Ье я)коп)хес1 !пяг)е а )аг8е, 8!ая г)еяссагог. 2. Аг)г) ! ш) оЕ йсЫогойше)Ьу1я1апе с)> го а япаП Ьеа1сег !пяс1е ЕЬе г)еяссагог. 3. АпасЬ )Ье г)еяссагог, гЬгоцВЬ а ггар, со а часцшп ршпр. Тцгп оп )Ье часцшп апг) сопгшце го арр1у хцспоп цп61 )Ье йсЫогойшегЬу!ы1апе Ье8)па Го ЪоП. 1пцпейаге!у с1агпр )Ье соппес6оп Ъепчееп ЕЬе часцшп ршпр апг) ЕЬе г)еяссагог. 5чч!гсЬ о6' )Ье часццгп ршпр. ТЬе г)еы ксагог хЬоц)с) шагпгагп а часцшп. !г В еяепца! го шгп оЕЕ гЬе часцшп ршпр ая аооп ак гЬе г)!сЫогос$!шегЬу!к!!апе Ъех!пь го Ьо!!.
ОгЬепч!ае, гЬе чо!а!Во а8еп! мч!! Ье ыс)сей !пго гЬе ршпр апг) саше !ггерагаЫе с$ашахе со гЬе часошп аеа1а. 4. Ъй~еп ТЬе йсЫогойше)Ьу1ы!апе Ьаа ечарогагег) (! — 2 Ьоцгх), ореп )Ье г)еяссасог гп а сЬешка) 6ппе Ьоог). Айег гЬе Ешпеа оЕ йсЫогогПше)Ьу)ы)апе Ьаче йарегзей гепюче )Ье 8)ааы ччаге ог р)ахпсччаге. Ва)се 81ааячаге апг) 8)ааа ччоо! Еог 2 Ьоцга ас !80'С ЪеЕоге цье. К!пае р1аы Псшаге ехгепяче1у шЬЬ Н О ЪеЕоге цае! г)о по! ацгос1аче. )х) ОТЕ5 ° 1аг8е Кеша оЕ 8)ааа!чаге сап Ье я1!соп!хе!) Ьу хоа)с!п8 ог ппяп8 ЕЬеш гп а 588 ао)ц6оп оЕ йсЫогойше!Ьу1я!апе ш сЫогоЕопп ог Ьергапе. Сопппегс!а! ргерагабопа Еог ы!копопп8 аге аЬо ачаПаЫе (е.8., 518пгасоа!).
° Аа )Ье ог8апк ао)чепг ечарогасеы )Ье йсЫогойшегЬуЫапе )а г)ероягег) оп гЬе 8)аахччаге, !чЫсЬ шца! Ъе г!паес) пшпегоца Пшеа члгЬ Н О ог Ьа)сед Еог 2 Ьоцга а! 180'С ЬеЕоге цае. Ргерага6оп оЕ Кйа5е Егее С1а8ямаге бцЫе!гпеа Еог гЬе ггеагшеп! оЕ 8!аах!чаге Еог цае ичгЬ К)ч)А аге 8)чеп гп гЬе )пЕогшаг)оп рапе! оп НОЧЬ ТО ЪУ1Ы ТНЕ ВАТТЬЕ И!!ТН КЫАБГ гп СЬаргег 7.
А8.6 Аррепг((х 8: Соттои!у Ессеи ТесЬтдиеь т Мо!еси!аг С!отиП ЕЬТ!МАТ!О1Ч ОГ СЕЕЕ (ч)БМВЕК* ТЬе питЬег оЕ тапипа!гап се11ь !и а бе6пеб чо1шпе оЕ гпейшп сап Ье теаьигеб иып8 а Ьепюсуготесег. Аиготасеб тесЬобь ияп8 се11-соипбп8 бечкеь ьисЬ аь (Ьоье ргойкеб Ьу Сои!сег аге беягаЫе ччЬеп 1аг8е питЬегь оЕ )пйчЫиа1 ьатр!еь аге со Ье соипгеб. А те(Ьоб го еьгипаге йе пшпЬег оЕ 1п е се11ь гп а рори1абоп Ьу ьга!п(п8 тч!ЕЬ а чЬа1 с1уе а1ьо !ь ргочЫес1 Ьеге.
Неьт)осу1о)тье$су Сосьп6пр А Ьепюсуготегег сопСать гхчо сЬатЬегь, еасЬ оЕ ьч) ПсЬ хчЬеп 611еб апб сочегь6(рреб сои!ать а го(а! чо!шпе оЕ 9 р!. ЕасЬ сЬатЬег !ь ги1ес1 тго тпе гпа)ог ьс)иагеь, апс1 еасЬ ьс)иаге (ь 1 х 1 тт сч!(Ь а бер(Ь оЕ 0.1 пип. ТЬиь, ъчЬеп сочегьбрреб, (Ье чо1шпе оуеасЬ ьг)иаге !ь 0.1 пппь ог 0.1 р1. Ас1йгюпа! ьиЬйльюпь оЕ (Ье та)ог и!пе ьоиагеь аге по! песеььагу Еог соип6п8 апс1 сап Ье !Ппогеб. А гергеьепгагюп оЕ (Ье тагЫп8 оп а Ьегпосу(отесег )ь ьЬоччп т Р!Пиге А8-1. 1. Тгурь!и!ье ГЬе се1!ь (р1еаье ьее СЬар(ег 17, Ргогосо! 8: 51а8е 1, 5(ер 18) апб геьиьрепб !Ьет !и Пгочч(Ь гпейшп.
2. ЕЛе Раьгеиг р!Реиеь го геточе (иго !пберепбепг ьатр!еь Егот ЕЬе се11 ьиьрепяоп со Ье соип(- еб. ТТебчег еасЬ ьагпр1е оЕ се11 ьиьрепяоп тго опе ыбе оЕ (Ье сочегь1!Рреб Ьепюсуготегег Ьу сар!11агу асбоп. р)и)б ьЬои!б ) иьг 66 йе сЪагпЪег аиб пог очег6охч )пго йе ггоиПЬь оииЫе йе сопи!(ис Еасе.
Еоаб ЕЬе 6гя ьагир1е шсо опе сЬагпЪег апс! гЬе ьесопб ьашр1е шго йе ьесопб сЬагпЪег. 3. Соип! (Ье гога! пшпЬег оЕ се!1ь !п 6че оу (Ье тпе 1аг8е ьг)иагеь !п еасЬ оЕ пчо ябеь оЕ (Ье Ьетосуготегег Еог а гога1 оу (еп ьс)иагеь. ТЬе писгоьсоре 6е!б ияи8 а 30х оЪ)есбче аиб а 30х оси1аг ьЬои1б еисогирая гЬе гиа)оп!у оЕ опе оЕ ЕЬе шпе ьПиагеь оЕ ЕЬе сЬашЪег зоб Ь а соичеи(еиг шасс66сагюп го иье Еог соипг(ис. СеПь !Па! очег1ар йе Ъогбег оп пчо ьЫеь ос гЬе ьииаге ьЬои!б Ъе (ис)ибеб ш (Ъе сеП соииг апб пог соиигеб оп ЕЬе ойег пчо ьЫеь.
(Е йе пиба! еП(шюп геьи1и ш гпоге йап 50-300 се))ь(ьоиаге, п1а)се а ЕиггЬег гП)ибоп го ииргоче соииг(п8 ассшасу апб ьрееб гЬе ргосеьь о! бесепи(п(е8 сеП пшпЪегя г3С!)КЕ А8-1 5(апбагб Нешосу!оше!ег СЬашЬег ТЬе с)гс(е )пб)са(еь ЕЬе арргохппа(е агеа сочегеб а( 300х гп(сгоьсоре ша8033)са()оп (30х оси)аг апб 10х оЬ)ес()че). Соип! йе се))ь оп сор апб )е6 соисЬ)п8 йе ш)бб)е 3(пе (ореп с(гс(еь). 0о по! соип( йе се))ь ЕоисЬ)08 (Ье гп)бб)е Ппе ас Ьо((ош апс) г(ПЬ! (с(оьед сбс)еь). Соип! йе 4 согпег ьс(иагеь апс) йе гпЫсПе м)иаге )п Ьой сЬап1Ьегь (оп1у опе сЬап1Ьег (ь гергеьеп(ес) Ьеге).
*Абаргеб Егош ьресгог е! а!. (3998 Сера А (аьогаюгу)с(аииа6. Егг|таггоп оЕ СеИ!читЬег А8.7 4. Ас!д йе пшпЬег оЕ сеПа )п а соса1 оЕ сеп сЬатЪега (6че Егогп опе аЫе апс) 6че 6огп йе ойег) со 8!че йе пшпЪег оЕ сеПа !и 1 х 10 ' гп1 (! х 10 ' т1)ас)иаге х 1О ас!иагеа = а чо1ите оЕ 10 з т!). Ми!6р1у сЬе соса1 пшпЬег оЕ сеПа Ъу 1000 со 8|не сЬе пшпЬег оЕ сеПа)т! ш йе аатр!е сопи!ей |Е гП|ис|опк Егопс ЕЛе ог!8!па! сеП яьреияоп Лазе Лееи псас|е, ЕЫе Еассог гпыс а!ео Ле спсогрогасес|. ЕХАМРЕЕ: | 1 гп| оЕ а 10гп| яь репа|оп оЕ сеПч !а с!Пи!ее! зч!ЕЛ 4 гп| оЕ гпес)|игп. ТЛе с|Пигес) яьрепяоп ь Феп аагпр!ес! зч!ЕЛ а Рачсеиг р!репе ич!се.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
