Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (522944), страница 137
Текст из файла (страница 137)
Аб.б Аррепг(сх б: Иис!е(с АсиЬ Аг)епоа)пе 5НРЬоарЬа!е (5'-АМР) Аг)епояпе 5'-г)!РЬоарЬаге (5'-А)3Р) Аг)епояпе 5'-!прЬоарЬа!е (5'-АТР) 2х))еохуаг)епоыпе 5'-гпрЬоарЬасе (5'-г)АТР) !1 !! абеб~бе НΠ— Р— Π— Р— ОСН2 ! )~' абеб~бе НΠ— Р— ΠР— Π— Р— ОСН2 о он он 1! () 1! абеб~ее НΠ— Р— Π— Р— Π— Р— ОСН2 он он он Г н н . мм. (прп) (х10 ') ОГ32ао 135.1 260.5 !3.4 О.!3 267.2 260 !4.9 0.14 347.2 259 15.4 0.16 427.2 259 15.4 0.16 507.2 259 15.4 0.15 491.2 259 15.4 0.15 ТАВОТЕ Аб-б Сусоубпе апс( Ке!асес) Сопсроппс(а 5ткссстсске Сусояпе Субйпе он он Субйпе 5НРЬоарЬауе (5'-СМР) 323.2 271 9.1 0.98 483.2 271 9.0 0.97 ОН ОН 2'-)3еохусус!4!пе 5сспрЬоарЬасе (5'-с)СТР) О О 467.2 272 9.1 0.98 ОН Н 'Ас РЬус!а!С8!Са! РН, аП ос йе Ьус)гагу!а Ьассп4 са РЬасрЬасе аге иушсес!.
Субйпе 5'-йрЬозрЬасе (5'-Срур) Субйпе 5сгпрЬоарЬаее (5'-СТР) аусавпп НΠ— Р— ОСН2 Гн Н) он он о О (( )( ау!аппп НΠ— Р— Π— Р— ОСН2 ) ОН ОН )' ОН ОН О 0 О !) )) !) аусавпп НΠ— Р— Π— Р— Π— Р— ОСН2 су ОН ОН !1 )) )1 аугавпе НΠ— Р— Π— Р— 0 — Р— ОСН2 ! ОН ОН Ъ с!а! 51аТ(ТСЫ оу')324А Аб.7 мм.
(псп) (х10 ') О0 111.1 267 6.1 0.58 243.2 271 8,3 0.93 403.2 271 9.1 0.98 ТАВЬЕ Аб-7 Спап1пе апс) Ке)асес) Сопсроппс)а (псп) (х10 ) ОО ьткпстпае Спапспе Спапояпе 363.2 252 13.7 0.66 он он 443.2 253 13.7 0.66 он он Соапояпе 5'-спрЬоарЬасе (5'-СТР) )1 НΠ— Р— Π— Р— ( он он ! ~."ф 523.2 253 13.7 0.66 он он о о 2'-)3еоху8оапоз)пе 5'-спрЬоарЬасе (5'-ИСТР) 507.2 253 13.7 0.66 НΠ— Р— Π— Р— он он он н "ас РЬуасосо8)сас рН, аП ОГ сЬе Ьупсохуса Ьоппд со рЬоарЬасе аге (оа1сес$. Аб.8 Аррепйх б: Кис)етс АтЬ Соапояпе 5'-РЬоарЬаее (5'-СМР) Спапояпе 5'-с)срЬоарЬаСе (5'-С()Р) о ..Х.'Х.с о ) ~3 ~Ф он он о дпапп. о о 1) 1) дпап пе НΠ— Р— Π— Р— ОСН2 ) он он н н н н 151.1 276 8.15 1.04 283.2 253 13.6 0.67 И~а( Отатга(!Оа О)г РХА Ао,9 м.сас. (псп) (х! 0 ') ОЕСга Ьтксгстсгаг' ТЬупнпе 126.1 264.5 7.9 0.53 ,Х„3 ,~.)" М он н " . "~'"4 о о о 1! (( 1! 482.2 267 НΠ— Р— Π— Р— Π— Р— Π— ОНг он он он 2' ПеохусЬушсйпе 242.2 267 9.7 0.70 2' с)еохусЬуш(гПпе 5ОРЬоарЬасе (5'-ТМР) 322.2 267 9.6 0.73 2' г(еохусЬушЫ)пе 5хспрЬоарЬасе (5'-ТТР) 9.6 0.71 он н (х! О ) ООгао Ьта» (прп) ьткссстсске 1)гаеП 259 8.2 0.17 ! 12.1 ()г)йпе ()г!Йпе 5ОРЬоарЬаге (5'-СЗМР) 260 10.0 ОЗ8 484.2 он он ТАВЕЕ Аб-В ТЬупс!пе апВ Ве1а(еВ Сопгроппг(а "Ас рЬуасо1О8)еа! рН, аП ос сЬе ЬуПгоху!а Ьоапс) со рЬО»РЬасе аге сошгей ТАВЬЕ А6-9 ()гас(1 апВ Ке1а1еВ Сопгроппг(а .А;.3 )' ф он он ()г(йпе 5'-спрЬоарЬаге (5' (3ТР) )! шаг~~ НΠ— Р— Π— Р— Π— Р— ОСНг !.
' он он он ~..~1 »Ас рЬуаса!О81еас рН, аП ос йе ЬуПгохуп Ьоапй со рЬоарЬасе аге сошый 244.2 262 10.1 0.35 324.2 260 10.0 0.38 А6.10 Аррепйх 6: Гк(ис!егсАсггЬ ТАВЬЕ А6-ТО ()паапа) Вааеа ОВ ао! О 13260 пгак (пгп) гпа к (х)0 з) ЬТКОСТОКЕ НурохапгЬ!пе 1пояпе 12.3 268.2 248.5 Хап!Ыпе ТАВЕЕ А6-11 )к(пс1еоа!4)е Апа1ока Оаег) аа СЬа1п Тегпг1па1ога 1п (3Ь)А 5ег)пепе!пк Вткостоке' о о о 1! 1) !! Ваке НΠ— Р— Π— Р— Π— Р— Π— СНЕ ! он он он 2',3'-О!оеохтк!Комосгео5!ое 5 ТК!РНО5РНАТЕ5 н н Ваке = аг)еп(пе 475.2 Ваке = сугояпе Ваке = 8оапше Ваке = ТЬугпгпе 451.2 491.2 466.2 скак Н40, 608.2 'Аг рбук!О1о8!са! рН, аП о! ТЬе Ьубгоху!к Ъоппй го рЬокрЬаге аге югбгег1.
2',3'-РЫеохуаг)спок!пе (г)йАТР) 2',3'-)3гоеохусуг(о)пе (й1СТР) 2',3'-)3Ыеоху8папояпе (гЫСТР) 2',3'-1!Ыеоху!ЬугпЫше (гЫТТР) 136.1 249.5 10.7 0.09 152.1 267 10.3 0.61 О(теолис!еогп(ез А6.1! ОФПСО)Ч! )СЕЕОТ10ЕБ ТАВЕЕ Аб-12 Сопзпзоп1у ()аег( О11еопос1ео!11(е Рпгпега Раз меа беОеземсе 5'-А6СААСТТСА6ССТ66ТТАА6-3' 5'-СТТЛТ6А6ТЛТТТСТТССА666ТА-3' 5'-66ТССССАССАСТССТ66АССССбсу 5'-ТТСАСАССАСАССААСТ66ТААТ6-3' 5'-6ТТТТСССАСТСАССАС6-3' 5'-АСС66АТААСААТТТСАСАСА66-3' 5'-6ТЛАААССАС66ССАСТ-3' 5'-66ААЛСАССТАТСАССАТ6-3' 5'-АТТТА66ТСАСАСТАТА6-3' 5'-ТААТАССАСТСАСТАТА666-3' 5'-АТТААСССТСАСТААА666А-3' тот асМсс оп спзтопз ртпаст дса8а, р1сазс зсс 1Ьс зпттойаспоп то СЬартст 111. ТАВЕЕ Аб-13 Мо!есо1аг Сопчега)опа (ог О11еоппс)ео!Ыеа 512Е ОГ ОЕ1СОМГЗСЕЕОТ1ОЕ (МОСЕЕОТ1ОЕ5) МОЕЕ5 ОГ 0М(А м ! ОВ МОеесезеАк МА55 ( 0 ЛЕТО М 5) МОЕЕСОЕЕ5 ОГ 0)х(А 1м 1 )гК )с8110 (огазатт( ргппег 18110 течетзе ргппег 18111 (огзчагс1 рпгпег )с8111 гечегзе рпгпег р(1С!М13-40 (огзчагс) рптпег р(1С!М13-48 течетзе ргппег рбС/М13-20 (огзчагт( ргппег р(1С/М13-20 гечепе рпгпег 5Р6 пп(четза! рптпег Т7 ппзчегза! рптпег ТЗ ргогпо1ег рпгпег 8 10 12 14 16 !8 20 2.64 х 10з 3.30 х 101 3.96 х 1О' 4.62 х 1Оз 5.28 х 1О' 5.94 х 101 6.60 х 1Оз 2.28 х 10" 1 82 х 10зз 1.52 х 10" 1.30 х 1О'" 1.14 х 1О'1 1.01 х 10'4 9.12 х 10зз 379 рпю1ез 303 рпю!ез 253 репо!ез 216 ргоо1ез 190 репо!ез 168 ргпо!ез 152 рпю!ез Аррепсйх 7 Содопя апд Апи'по Аешь СОООМ5 АМ0 СОООХ 05АСЕ АМВЕК МОТАКТ5 АМ0 АМВЕК 5Е7РРВЕ55ОК5 АМПЧО АС! 05 А7.2 А7.
5 А7.6 А7.2 Аррепйх 7| Сойоиз апй Атто Ас!йз СОООМЬ АМ0 СОРОМ ЮАСЕ ТЬе Вепе6с соде Ь гедцп|1апс, цяп8 61 содопз со зрес|Гу 20 апцпо асиЬ. Оп1у ссчо апцпо аспЬ (Ме| апд Тгр) аге зрес)Вед Ьу а яп81е содоп, лчЬегеаз СЬе ге|па(п|п8 18 апцпо асЫз аге еасЬ зрес|Пед Ьу пш!6р!е содопз (р1еазе зее Р18цге А7-1). ТЬе зупопутпоть со|1опз йас зрес|Еу а яп81е апипо асЫ аге пос изей лчссЬ ес)ца1 Ггет)цепсу (бгапйап| ес а1. 1980, 1981). !пзсеад, Ь|азед цза8е оГ зупопутоцз содопз Ь йе гц)е 1п аП зрессез апд Ь йе погт ш тозс Вепез.
1п а|Ы|сюп, сЬеге Ь сопядегаЫе чапа6оп ш со|1оп цза8е Ъеслчееп Вепез |п а яп8)е зрес)ез (Веппесхеп апд НаП 1982; боиу апд бацбег 1982). ТЬЬ гезц1сз Егот чапасюп Ьесъчееп Вепез ш |Ье б~-С сопсепс оГ |Ье й|г|1 роясюп оГ зупопупюцз содопз (Псепшга 1985; М)гоцсЬоцд ап|$ бац6ег 1988).
ТЬе раС|егп оЕ со|1оп цза8е ь йе гезц1С оЕ зе)ес6че Еогсез, тцса6опа1 Ь!аз, ап|1 Вепебс дпй. Рог еха|пр!е: ° 5е1ес6оп йиг1и8 сгаиз1а6оп зо тЬат 1$|е сойоиз изей таз|жгет)иеп|1у |патсЬ тйе тозс аЬипйапт 1$$$|ЕАз. Н18Ыу ехргеяед апд |чеаИу ехргеяед 8епез сПзр!ау сПЕГегепс рассегпз оГ содоп цза8е ш Ьой ргоЬагуосез ап|1 ец1|агуосез (Яце1|Ь ап|$5Ьагр 1987; Я|агр ап|1 Ре|дпе 1989; 5Ьатр апд Солне !991). Рсгесс аыауз оЕ сгапз!асаЪ|1иу оГ|пКНАз 1епд ВлтсЬег зирротс со сЬь ч(ечч (е.8., р1еазе зее Псептга 1982; Вогепзеп ес а1. 1989).
° "Киос$г-ои" ог соитехт ефестз, Еп сч$|1сЬ гпи|айои оу оие Ьазе йфиеисез отЬег Ьазез |и тЬе пе1|тЬЬогЬоой (Вц!тег 1990; Путе-чСтаПсет 1991). ° Апу зе1ес6оп тЬаз гези1зз |и а ту|аиде ш бС сопсепт ш сойоия Ветпат|П апд ВегпагсП (1986) Ьаче аг8це|1 |Ьас ге81опз оГ сЬе Вепоте чдсЬ $псгеазе|1 (б-тС) сопсепс аге сЬегпю|1упатка1- 1у пюге зсаЫе апд йас тК)ч)Аз псЬ ~п (б-гС) Ьаче тпоге зесопдагу зсгцсцлгез ап|1 аге сЬегеГоге тоге зсаЫе. 1Е сопесс, |Ь(з ге!асюпзЫР |чои1д Ьаче еЕЕесь Ьой оп апипо асЫ сотпроя6оп оЕ ртосець апд оп содоп цза8е. ТЬеге |чоц1д Ъе зе1есбоп Сот "зсгоп8" содопз йас сопса)п б апд С ас сЬе Пгзс с|но роябопз (б)у, А1а, Рго) ап|1 а зе)ессюп а8ацьс счеа1| со|1опз сЬас Ьаче А апс$ Т а| Ъо|Ь роясюпз (РЬе, Пе, 1.уз, Азп, Туг) (КатПп ап|1 ВцсЬег 1992).
1п а|ЫЬюп, йеге ъчоц1д Ъе а з1о|ч дт(Гс со тер)асе А апс1 Т |п сЬе |ЬЬд роя6оп |чПЬ б ог С. Очег |Ье соцгзе оЕ типе, йЬ 8епс!е ечо1ц6опагу ндпг! пи8Ы Ыоъч со|1опз, П)се ЕаПеп !еанез, |псо!оса1 с)шпрз сч)сЬ)п |псПчЫца! 8епез ог от8апЬпь. Но|нечет, сЬеге аге а!зо зсаЪ$!)х)п8 Еогсез сЬас ргосесс со|1опз гкЬ лп (АтТ). СЬ|еГ ап|оп8 сЬезе ь сЬе зсгоп8 зе!ессюп а8а(пзс |Ье зет)цепсе СС и| татп|па1|ап 8епотез. ТЬе сусояпе оЕ йь зес)цепсе сеп|Ь со Ъе тейу)асей апд ь йеп ргопе со пшсасюп. Опе геял!с ь а Ъ|аз а8а|пзс С ш |Ье й|г|1 роясюп оГ содопз йас ргеседе сос1опз Ье8(пп)п8 чдй б (е.8., р1еазе зее 7Ьап8 ес а1. 1991).
Содоп цза8е ь а сопсегп 1п пю!есц1аг с!оп)п8 $Е а зет)цепсе оГ апцпо асЫз ыьед со дея8п ап оПВопцс1ео6де Гог зсгееп)п8 сРХА ог 8епопцс ПЬгапез. Ь)о гц1ез Вцагапсее зе1ес6оп оГ йе соггесс содоп ас а роя6оп оГ атЬ|8шсу. Но|нечет, а ргоЬе оГ 30 ог споге оП8опцс1еос!дез ччои1д Ье ехрессе|$ со Ьаче ас 1еазс 7698 Ьопю1о8у лч)сЬ ~сз саг8ес зел)цепсе ечеп $Е аП со|1оп сЬо|сез |чете и|аде оп а гапдот Ьаяз (1.асЬе 1985). 1Г зцЪз6сцгюпз аге сЬозеп оп йе яа6з6са1 Ьаяз оЕ )тпоъчп содоп ц6!ыа6оп ш |Ье зрес!ез оЕ 1псегезс, сЬе ехрессе|1 Ьопю1о8у $псгеазез со 82о|8 )с гЬез з6П Влг|Ьег (со 86%) |Е ге8!опз 1ас)дп8 Ьец, Аг8, апд 5ег аге сЬозеп (еасЬ оЕ сЬезе апцпо ас1|Ь ь зрес|Вед Ъу ях содопз).
1п уеазс, з6П ЫВЬег ассцгасу сап Ье асЬ)ече|1 Ьу саЫп8 шсо ассоцпс |чЬейег сЬе Пепе ь Ь!8Ыу ог |чеаИу ехргеззед. 1п тпапцпаПап сеПз, й|з 1ассег ге6петепс ь пос ВепегаПу |ье|1 Ьесацзе оЕ йе 8геас чапасюп (п йе 1ече! оЕ ехргезяоп оЕ Вепез Ьессчееп сьялез. Сос(опз апг( Сог(оп Жаре А7.3 А с)агаЬазе оГ сос)оп пзаке ш ййегеп1 огВап(зптз (5 ана()аЫе а1 Ьггр:УУипни )сакпза.ог.)ру сос(оп/. ТЬе ))51 )5 Ьазес( оп с(ага с)ег(нес! Ггопг ап апа)уз)5 оГ согпр!еге сос((пк зес)пепсез гп СепВап)с (Ха)сап!ага ег а!. 1999). рог а птоге с(ега()ес( апа!уз)5 оГ ГЬе Г(псгпаг)оп оГ сог(оп паап (п с)УТГегепс уеазг кепез, р)еазе зее ЯЬагр апс! Сои е (1991). Сос(оп азаке ш Ьшпапз )5 5Ьои п !п ТаЫе А7-1. ТАВОТЕ А7-1 Соз)оп (Уааае зп Нпшапз РкеОоемсу гм НОМАм РКОТЕ!М5 (%) СОООм5 Амп Тне!к ()5АСЕ !М Н!УМАМ РКОТЕ!М5 (%) Амгмо Ас!О А1ашпе 6С(У (28.0) 6СА (20.0) 6СС (41.6) 6СС (10.3) 6.99 ССС (21.4) С66 (10.4) А66 (11Л) Аг8)п!пе С6(У (8.9) ССА (5.4) АСА (9.9) 3.92 5.07 2.44 6.82 4.47 6С(У (15.8) 66А (24.1) СА!У (39.6) ССС (35.8) 666 (24.3) САС (60.4) 7.10 !1(зг)с)(пе 140!епсгпе 2З5 А(УС (54.0) 4.50 (У()6 (11.5) С(УС (20.8) С()6 (44.5) Ьепс(пе 9.56 АА6 (61.1) ААА (38.9) А1У6 (100) (ЛУ(У (41.1) 5.71 2.23 1ЛУС (58.2) ССС (35.2) СС6 (11.6) 3.84 СС(У (27.3) ССА (25.7) 5.67 СС(У (18.3) (УСА (12.9) А6(У (13.2) (УСС (23.7) 1)С6 (5.9) АСС (25.9) 5еппе 7.25 ТЬгеопше АСС (405) АС6 (11.8) 5.68 Тгур!орЬап Тугоз(пе на!)пс 1.38 1УАС (60.0) 66гС (25 7) 6(У6 (48.7) 3.13 6.35 'Са)со!а!ад Ггогп ап апа1уяз оГ 1490 Ьогпап Кспсз (601,683 содопз) Ъу Унана сг а!.