Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.3 (522944), страница 105
Текст из файла (страница 105)
1994Ь Ноъчечги ъчЬеи йе рЬацеш!6 В же|1 |о |галя(опп се!1я ехргеяяпй ап а|пЬег яирргеяяог, |Ье епбге Еийоп рго|еш 6 яу|Ьея!гы( апс) ЕгаВшепся оЕ апс!Ьоду аге |Пар!ауей оп |Ье янгуасе оЕ яесгесес( Ьассег!орЬаВе раг|к1ея |п |Ье полна! ъчау. Р!ладе 0!яр!ау оЕ Рер(!с)ея Ву !пяегг!пй шсо Вене П1 ог Ъ|П! рори1абопя оЕ яуп|Ье6с о1!Воине!еог!6ея йа| Ййег ш яе|)пенсе Ьи| аге оЕ ег)иа!!епйсЬ, й ь рога|Ые |о цепегасе 1агйе 1|Ьгапея оЕ гесоп|Ь|лап| Ьасгег!орЬацея |Ьа| гйяр1ау лепя оЕ |го!1|оп| оЕ рер|Ыея (Съч!г1а е| а1. 1990; Реч1ш е| а1. 1990; 5сон ап|1 5пшЬ 1990; НоицЬсеп е| а1. 1991; Еог геч!еч я, р1еаяе яее Ноео 1993; 5сЬа|г 1994; Сог|еяе е| а1. 1995; Вадег апг( ВагЬая 1997; 5пнй апй Реггеп)со 1997; Вогй ап|1 Ма)соъчя)с! 1999).
Ая гйясыяед аЬоче, Ьассег!орЬацея Ьеаппй а ярес|йс сагйег рер|Ые Еог а гесер|ог, ап апс!Ьог)у, ог апойег ргосе!п сап Ье рипЕ|ег) Егоп| йе 1|Ьгагу Ьу а1сегпас!ий гоипйя оЕ айлпйу еппсЬшеп| апд Ьасгег!орЬайе цгочиЬ. 5!псе |Ье Вене еисосйпВ |Ье сагйес рер|Ые ь раг| оЕ |Ье Ьас|епорЬайе Вепоше, ЬасгепорЬайе рер|Ые гйяр1ау сап Ье шее |о Во!а|е а ярес!йс РВА яе|рлепсе Ьу аййпйу яе1ес|юп оЕ |о рго|еш ргоъ(исс. АшопВ |Ье ч Ые чапе|у оЕ Ью!ой!са! яуясешя |Ьаг Ьаче Ьепеу|ге|) Егош Ьассег!орЬайе рер|Ые |Пар!ау аге ерйоре п|арр!ий, апа!уяя оЕрго|е|п-ргосеш ш|егас6оп, ап|! йе ьо!а6оп оЕ шЬгЬ||огя, а5опВ|я, апй апгайои)ягя.
5РВ5ТВАТЕ РНАСЕ5 5нйагасе рЬайея, ънЬ!сЬ аге няе6 |о ала!уге ап6 !шргоче рго|еаяе с!еанайе я!Еея, дыр!ау галдогп рерг!де яе|)неисея Ье|чееп ррй ил|1 а (ай. ТЬе !!Ьгагу о( рЬаце рагйс(ея аге у|гас сир|иге|1 оп ал !гпгпоЬ!1!гед !!Вапй |Ьа| Ь| п6 я |о йе сан апд |Ьел | лсиЬа|е|! ч4|Ь а рго|еаяе. ТЬе ягла!1 п ни| Ьег оЕ Ьас|еиорЬ идея салу!лд а рер|Ые с1еанед Ьу йе рго|еаяе аге ге1еаяе|1 (гол| |Ье ша(г!х ал|1 ап|ройед.
Айег пчо ог (Ьгее гонийя оЕ яе!ес- Е!опlашр!!Е|сас!оп, |Ье яег)непсея елсой!ий |Ье рерйдея |и !п6!и!6иа! Ьассег!орЬайея аге де|еггп|лед. Ву |Ыя глеаля, || Ьая Ьееп рояя!Ые |о !6епс!Еу пеъч ог !гпргочед с!еанайе я!Еея Еог ргосеаяея янсЬ ая |Ване р!аягл|поВеи асг!нагогя (Ке е| а!. 1997; СоошЬя е| а). 1998), со! !айепаяе (Репц е| а!.
2000), ал|! я|голле)уяп (5пп|Ь е| а!. 1995). Вапдосп РерНдея Е!Елгаг!ея Моя| гапйош рер|Ые 1|Ьгапея Ьаче Ьееп сопя|спесей а| ог пеаг |Ье апнио |егпнпия оЕ |Ье |па|иге Вене П! рго|еш чЬг1е 1агйег рго|е!пя Ьаче Ьееп ехргеяяег) Ы а йех|Ые Ь!пйе Ье|чееп |Ье апнпо- апй сагЬоху-|еггшпа! |(оп|ашя (5пн|Ь 1985; Съч|г1а е| а1. 1990; Е|еч!ш е| а1.
1990| 5со|| ап|1 5гийЬ 1990; Еог геЫеъчя, р!саяе яее ба11ор е| а1, 1994; Согйоп е| а1. 1994; 5сЬа|г 1994). Весаияе 65па! с!еачаце В ге|)и!гег( |о ргойке ш(ес6оы ЬасгепорЬаВе раг|к1ея апй Ьесаые |Ье геяЫиея йоъчпя|геаш Егош |Ье с!еачайе 6|е шау шйиепсе |Ье еуйк|епсу оЕ ргосеяя!пц, П В ргеЕегаЫе |о шяег| ганг)ош рер|Ыея а Ееъч геяЫиея йоъчпя|геагп йоги |Ье 1п~огтат(оп РапеЬ 18.117 шасиге апипо сегпипив. 1п йе Я ЬассегюрЬаце депе П1 йвр1ау вувсеш с1евсНЬес! Ьу (3еч1ш ес а1.
(1990), вупсЬе6с оПцопис1еосЫев аге с!опес1 шсо а ясе съчо со сЬгее апипо асЫ геядиев 6оъчпягеапс Егогп сЬе Неачаце ясе. РерсЫев епсобе6 Ьу йе )пвегсе6 о)сдопис1еосЫев аге сЬеге(оге йвр1ауе6 пеаг сЬе апипо сегпипив оЕ пса!иге РП! (ктстА)а-С!и-(ХХХ)„-Рго-А!а-С!исооп) ш )споЬ-П)се всгиссигев сЬас ехсеп6 Егош сЬе вигЕасе о( сЬе игсь рагбс1е (Сгьвпъап апс) цписЬ 1984) апт) аге ассевяЫе со ап6Ьойев апс) осЬег )агде Пдапе я АЫсоицЬ йе депе П! ргосесп шсегассв йгесс1у чбй Р рс1с, сЬе ргевепсе оЕ вЬогс Еогесдп рерсЫев ас ог пеаг сь апипо сегпнпсь боев пос аисопсаскацу ЬНпц аЬоис а вувсеша6с гебиссюп сп еПЬег ЬассепорЬаце усеЫ ог шЕесссчссу (Рапп1еу апс) цгпсй 1988; Счбг!а ес а1.
1990; )3ечцп ес а1. 1990; НоицЬсеп ес а!, 199! ). 1п ап Ыеа! ъчог!й йеге вцои16 Ье по ве!ес6оп ргеыиге Еог ог ацсбпвс ЬассегюрЬацев йас ехргеы раг6си1аг рерсЫев оп сЬесг вигуасев. Ноччечег, вапср!спц оЕ рерсЫе 1сЬгаьев сопвсгиссед ш сЬе РП! ргосеш видцевсв сЬас сувсеспе ап6 81шапипе аге ипйеггергевепсей ъчЬегеав рго1спе ь аЬвепс Попс сЬе роясюп сшшейасе1у сагЬоху-сегпппа1 оЕ йе яцпа1 вес!иепсе с1еачаце ясе (СъчсНа ес а1. 1990; В!опйц!цишй ес а1. 1993; ЕъеСгааЕ ес а1.
1993; Кау ес а1. 1993). РшсЬеггпоге, ЬассепорЬацев сЬас епсобе гесоспЬспапс р!П ргосешв сопсаш(пц а ЫВЬ ргорог6оп оЕ роя6че!у сЬагдед гев(диев цгоъч чету роог1у — ргевигпаЫу Ьесаиве оЕ а 1оъчегед есПс)епсу оЕ сЬе швег6оп оЕ йе РП1 ргергосеш што сЬе Ьассепа! пкгпЬгапе (Ресеь ес а1. 1994). Мо1еси1ев оЕ р ч'1П саггуспц а Еогесцп репсарерсЫе ас сЬе псасии агпшо сегпшшв аге аЫе со Еогтп а сопър1есе ЬассепорЬаде сарвЫ (Пу(сЬеч ес а1, 1992), ъчЬПе ас 1еавс юпсе оЕ сЬове саггушц ап оссарерсЫе саппос (Ре!кс ес а1, 1991), ТЬеве геви1ь виддевс йас рерск1ев сопв(всшц оЕ е(дЬс ог псоге гевЫиев гпау десоггп сЬе рч'П1 ргосеш со висЬ ап ехсепс сЬас и Ьесогпев поп!ипссюпа!.
ТЫв ргоЫеш сап Ье с(гсшпчепсеь( Ьу согпппц а ш)хе6 сарвЫ сопсровес! Ргеъ(огпшагсс!у оЕ чй!с1-суре рътП1 (виррПе6 Ьу а Ье!рег РЬацеспЫ) ап6 рагс1у о( ЬуЬгЫ РИ11 сЬас сагпев а Еогесцп рерсЫе ас пв апппо сегпипсь (Ре!кс ес а1, 1991; Сгеепъчоос( ес а1. 1991; Капд ес а!. 1991). ТЬе табо оЕ ччцй суре ЬуЬгЫ р ътП1 и сЬеве РЬепосуркацу ш(хек рагссс!ев чапев Егопс 30 со 300, дерепйпд оп йе вес)иепсе оЕ сЬе Еогесцп рерсЫе (Ге1ссс ес а1. 1991). Ап а1сегпабче во1и6оп ь ргочЫе6 Ьу а чессот саггуспц а воспоем сору оЕ цепе ътП1 швепед шсо а веъ)иепсе оЕ тЬе спсегдешс гед(оп (Наарагапса апд Нсье 1995).
Весаиве спвегбоп сп сЬсв гед)оп оЕ йе чессог ап6 виЬ- вес)иепс ехргеввюп оЕ сЬе с1опед вес)иепсе 6о пос а6чегве!у айесс гер1ссасюп, йе гесотпЬспапс чеяог арреагв со цгоъч погпъаПу, ргос)исшц ч61Й-туре р1аъ)иев. ВассегюрЬацев йвр1ау(пц Соте(цп рерсЫев ас йе апппо сегшшив оЕ есйег РП1 ог р ътП! геасс ъчпЬ врессцс ро1ус1опа! ог псопос1опа! ап6Ъойев йгессе6 ацашвс сЬе соас ргосеспв. ТЬеве ап6Ьойев сап Ье сье6 со Весесс гесопсЬспапс ЬассегюрЬацев йас ехргея а врессйс Пдап6 ап6 Ьаче Ьееп сарсиге6 оп арргорпасе аЕЕсп(су шасгкев.
ТЬсв аыау Ьав Ьееп сье6 виссея(иПу со вси6у, Еог ехашр1е, сЬе шсегассюп оЕ РЬацев ЙЬ- р! аушц 18С-Ьспйпц с(опсашв оЕ всарЫуососса1 ргосеш А ъчпЬ чапоив виЬс1аввев оЕ Ьшпап 1цС (КивЬъчаЬа ес а). 1994; ВЬагъЬча) ес а1. 1995). 1п яппшагу; ° Роге(дп рерсЫев сап Ье ехргеьеъ) ас сЬе апппо сегппш оЕ ЬосЬ пипог апс) ша)ог соас ргосешв оЕ 61ашепсоив ЬассепорЬацев. ° ТЬеве а1сегес) ргосешв сап Ье шсогрогасе6 шсо шЕессюсь ъбгюпв сЬас йвр!ау йе Еоге(цп рерсЫе оп сЬесг виг(асев. 1п ЬосЬ савев, сЬеве рер6дев сап Ье гесодшхе6 Ьу ап6Ьойев, епгушев, ап6 осЬег врес(Е- к Пцапбв.
° Сапе 1П ргосесп Ь а шспот сотпропепс оЕ сЬе ЬассегюрЬаце соас, Ьис ссв Еипс6опв ш гпогрЬоцепеяв ап6 !пЕес6оп аге пос сопсргошЬе6 Ьу сЬе ргевепсе оЕ Еогесцп рерсЫев ас (ь апппо сегш(пив. Ву сопсгавс, рерсЫев оЕ ях ог гпоге гевЫиев спвепед спсо йе ашспо сеппшсь оЕ РЪ'1П сап йвсигЬ сь соп(оппассоп апс) 6сегеЬу ргечепс аяепсЫу оЕ сЬе ч(га1 соас (Пу)сЬеч ес а1. 1989, 1992; Сгеепъчооб ес а1.
1991). Роге)цп рерсЫев сап, Ьоъчечег, Ье йвр1ауе6 оп РЬепосурссацу пихе6 рагск1ев ъчЬове соас сопявь ргедогпшапс1у оЕ ч61йсуре р ътП! ап6 аьо сопсаспв а япаП ргорогсюп оЕ ЬуЬгЫ р'ътП! пю1еси1ев. ТЬе Ееасигев оЕ чапось чессогв депчед Егопс В!аптепсось ЬассепорЬаце сопппоп1у иве6 Еог рерсЫе йвр1ау аге випипапхе6 ш ТаЫе 18-13 ап6 аге девспЬе6 сп десаП ш а гечсечч!ъу цпий апс) Ресгеп)со (1997).
СопвсгосНоп оЕ Рерс!т!е О!вр!ау !.1Ьгаг!ев ТЬе всерв шъ оЬе6 ш цепега6пц рерсЫе йвр1ау ПЬгапев аге яшр!е Ы рппсср1е: Капбош рори1асюпв о( оПцопис1еосЫев оЕ йе соггесс 1епдсЛ аге вупсЬеяхей сопчегсеь! со йшЫе-всгапбе6 шо)еси1ев Ьу РСК, йцевсед чбй а гевспссюп епхуше, ап6 Пдасед шсо а сошра6Ые гевсьсбоп Псе сЬас Ьав Ьееп ргечюсь!у епд(пеегед ас ап арргорьасе 1осабоп ш ЬассепорЬаде цепев П! ог Л11. ТЬе Пдапоп ргойкь аге сгапв- 18.118 СЬарсег18: Ргосесп 1псеысНоп Тес)спо!08сек ТАВЬЕ 18-13 С1аккИ1сайоп оЕ РЬаее-д!ар!ау Усес(огк СОАт РЕОтеся )ЧО. Ое РОЕ Е)15РЕАу Сесче5 0С5РСАУ ОЯ СОР1Е5 ЕХАМРЕЕ ссестОЕ ТуРе й е е е а е зс с е 5 Ссчпг1а ес а1. (1990); 5сои апд 5ш(ЕЬ (1990); Кау ес а1.
(1993) АП Туре 3 (рЬа8е) М13КЕ рП1 ПуЫЬеч ес а1. (1992); Ресгегйо ес а1. (1996) (пос сопипоп!у изей) '1уре 8 (рЬа8е) Туре 33 (рЬа8е) Туре 88 (рЬа8е) Е1 р'г«1П 5огпе 5огпе рП! МсЬаЕЕегсу ес а1. (1993); Наарагапса апд Нике (1995); В1апсаЕогс ес а1. (1999) (88-4 рУП! рСОМВЗН ВагЪак ес а1. (!991) Туре 363 (РЬа8епгЫ) РП1 Туре 83-8 (рЬа8ешЫ) рг«1П 5оше 5огпе Кап8 ес а1. (1991); СУ«18Ьсоп ег а1. (1996) рСОМВВ Еессед спсо Е, соП апд ЕЬе Ьас1епорЬа8ек ргодисед Ьу ЕЬе си!сше аге соПессед.
Мапу Ьассег!орЬа8е сПкр1ау чессогк, Еог ехаспр1е, сЬоке оЕ ЕЬе П)5Е кепек (Рапп!еу апд Вгп«ЕЬ 1988; 5сосс апд 5писЬ 1990), саггу а сессасус1ше геяксапсе Пепе (Тса) йа1 аПоигк сЬе шЕессес) сеПк со Ъе ке1ессед апд пгашсаспес! ак со!оп(ек оп пседЬ иш соп1асшп8 йе апс«Ью1«с. ТЬе рЬа8е Вепогпе сап йеп Ье ргора8асед ак П П счеге а р!акспЫ. ТЬЬ ке!есПоп пипипыек йе дегпапс) оп р(П Еисссс!оп йас оссигк с)ипп8 пси10р1е гоипйк оЕ шЕессюп. ВассепорЬа8е рагИс!ек сап Ье соПессед ас апу Ппсе Ьу Пгосчш8 йе сеЕЬ Еог а Еесч Ьоигк ш 1к!шс) пгес1шпг. ТЬе роо15 оЕ купсЬе1Ы шлс!еосЫек шкегсес1 спсо сЬе сПкр!ау чессогк сопякс оЕ ппхсигек оЕ о1«8опис1еосЫек и«Ьоке Ьесего8епеоик сепсга1 рогиопк аге Пап)сед ас йе 5' апд 3' епдк Ьу кес)иепсек гесо8«с!сед Ьу гекспссюп епхушек, Сошр1есе1у гапс1опг рори1асюпк оЕ оПВопис1еос!дек оЕ деЕ«пед 1еп81Ь апс) согпрояйоп сап Ье купсЬекыес) Ьу исП!8)п8 пихсигек оЕ аП Еоиг пис1еокЫе ргесигкогк дипп8 купс)шкЬ оЕ с!се де8епегасе ге8(оп.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
