Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.2 (522942), страница 144
Текст из файла (страница 144)
О 'о Ь о о .о О оО о О о о 'О о с О ОЕ о о с о с о о ОС о о о Е о о -О:О о с л О Е с с о,о Е О .с '$0Е с с'оо Е ' й Ол о ОО 0 о 0 О .0 о .С:О О "ОО ~л с О О. О о о О а "ОО Е б Ооо О о Е о" о О О о О Е" о ОЕ с о о О с о оо З-с ОЕС ОО .0 О О с сЕ о О .с .с «О о О .О с о о О.
о .О С о о о йй . йй с с. 0 С О О О .М О АТЕЕ с .'с 'с .с о ос.о 'Е о оо о О 0 С О .О 4 л О о ОО о с Е О .О 4 И ОЕ ОО йй ) О О о Е с ОО с Е о с с о л о о О о Е О Ой о с с Д ° Е Ю О й л ОС О ю с й ДЛ Ой 'О с Е й 0 Е ОЫ 0 й $ с Е ОЕ й о .с с Е о й а с й О 'О О. о Реоеоео! 7: СЬет1еа1 Яедиепетц 12.71 о х > о .с о о Ь 'Е-'И ю о '44 Ж О Ю < м Ф 44 о о 4 44 .ь о Е .о й о.
с о о' О о ь Ж Е о х о с О .О Е о . о о о 'о ю ЬЬ о 4 Е Ю о .О о о Е Ю Ю 4'4 Ь Е ЬЬ о ю Е 4'4 О 'Ь4 с о О Е Е о о Л~ о 'Е О 4 Е о Е 'О. О Ю 'О ЬЬ Х < Д < Е Д Ь Е ою Оа х Лм .с О. о Е с Е о ЬО оо Ь ьо со 4 с Е 4 „о с Ьо Ю Ю ю Е а 4 ЬО Ь Е ь 'СО о о х ) о Ь О .О Е.О . о о о ОЮ < м Е й Ю о О х О- ) ЬЬ ь о о < .о о х ) о 4 О .О Е с о о .44 Ю о 4 о с Е ю с а, Е Л ЬЬ о о 4 .О 44 С с Е 0 Ю 'О о Ь 44 4 Е с о Е Ю Е о .О 4С с :Е О л О + О х .< Д~ й д с " -О 4 4 4 охС О в 4' Х О..О Я Ю с о Ь О.
о Е О О Ю Ьо Ю Е Е с О 4 а о оо ) о о2 о х > о Ь Е .О Е "с Ь4 . о Е О И ~Ю с о Е 4,4» О' й„о о с 4О о Й 44 44 О с о Ь о - О Ю .е Ю о о с ,Е .с 44 м '3 Ю о о М .О о < с '.2 О. Л ь Ю о ,о Ь Ь4 Ь Д< Х О о Д х с ц О. О, О О О л < с о о Ь 44,44 ьс О '"„ Ь„О с,о Ь о 44 О о М 4 х у о .о о с Е о ЬЧ Ы Ю -о М .О ° о о Ь о 4 4 О с Е Ю 4 О с о М «4 4 О с Е О Ю о .О В с о 'Е О О йс о .~д Е Дх, ВО О 4 4. о о х С хо о оь Ь м .О ~Ю 'О ."Е О. 'Е. Ю м .О Ю -О 4 о о О > с < ьо с Е с Ф О Э Ф .О О Е % о О о % с О ье о О с 44 В о оо Оо О4 4 Ю < О о о 4 х О.
о Е Э ) Е -' о о о с Ь .о ооь Ю Е ь4 ь4 Е Е о АЗ С Д В м Е ь 'Е с 4 "4 а О О О. Ьо М.Е -'Я о <о2 О с о 4 ь о 4 х ) ьо Е 4с Ь о 4 4 оо с оо Е ьй Ю О' о „ о х .- Ю :О а, Е,О о О О Е о О ОО ьо Ь О с аО й о о О Ею 4 О. Ео о, о -,о о „ 4 ".е о Е . 4 ЬЬ,З О Ю.ОД Ю. Ю ооо 44 о о „.о а о „Е о "Е й, Яоо Ь Ю Ь а о о оо,,— О,с ос сох о О О,о Ргойосо! 7: С)зет|са! Бег)иепс|иц 12.73 А003Т|ОЗъЗАЕ РКОТОСО|п РКЕРАКАТ|ОРЗ ОЕ ЕЗъ|0-ЕАВЕЕЕ0 РЗъЗА ЕОК СНЕМ|САЕ 5ЕОй)ЕЗъЗС3$ъЗС ТЬе епде о1 доиЬ|е-ейгапдед 0)4А сап Ье |аЬе|ед аъ (оЗЗоъчя ° Тгагь(ег Язе, Р 1гоги 1, з~Р)АТР ог, Зегь согппзоп|у, [Т-"Р)АТР 1о (Ле 1гее Лудгоху| Игоир а1 ййе 5' йеггп|гп! о1 доиЫеейгапй|ед 0)ъ(А.
ТЬь Зп ч|йго геасйюп ь сайа|уаед Ьу ЬасйеиорЛаВе Т4 ро|упис|еобде |с|асье (р|еаее еее СЛар1ег 9, Ргойосо|е 14 апс3 15). (Нейе (Ьа1 [Т-з'5)АТР 'ь по1 а узос3 язЬейгайе 1ог ро|упис|ео1|де Зипаее апд 'ь йгапе(еггед Зоей)с|епду йо 5'-ЛусЗгоху| уоиря) ° Тгапа(ег 1Ье сЛа|и-йеггпгпа6пВ Ьаее апа|оВ [и-ззР]соп|усер|п йпрЛопрЛайе (3'-деюхупЬопис|еояде йпрЛоерЛайе) 1о 1Ле (гее Лудгоху| цгоир а1 (Ле 3' йегпппз о1 дооЬ|е-ейгапдед 0НА (СЬар1ег 9, Рго1осо| 12). ТЛ|е геасйюп 'ь сайа|утед Ьу саИ (Лупзие с$еохупис|еояде 1епи|па| йгаппйегаее (Ти апс3 СоЛеп 1980).
° ЕИЗ гесегьед 3' 1егпппз ъч|дз [а-ззРЗдНТРе |и а вупййе6с геас6оп сайаЗ)иед Ьу 1Ле К|епоъч 1гауиепй (СЬарйег 9, Рго1осо3 10) (СоЫапсЫ апд ЗАгз|еоп 1987). ЗА'Ле(Лег 1Л|е геас6оп Вепегайее 0НАз (Лай аге ЗаЬе|ей| ай опе ог ЬзкЛ йепизпз дерепде оп ъчЬе|Лег опе ог Ьо(Л йегиз)пЗ аге гесейьед, апд 6 ю, оп (Ье пег)иепсе о1 (Ле ргойгод|пИ за|!я Ойеп, 1Ье Яз|$|пВ геасйюп сап Ье пей ир ю йЬай |Ье гадю|аЬе|ед д|ъЗТР ь |псогрогайед зп1о оп|у опе 1епиЗиз ь о1 ййе 0Л(А.
1и (Л|а сазе, (Веге ь по пеес| 1о с|еаче ййе гасро|аЬе|ед 0ХА ъч|(Л а гейпсйюп ептузпе ог 1о ригйу а (гаИпзепй Ьу Ие! е|есйгорЛогее|а Ье1оге ргосеед|пд 1о сЬепз|са| пей|пепе|ау Ехагпр!ее о1 (ЛЗе йуре о1 аеупзгпейпс ЗаЬе!Зпц аге еЛоъчп |и Е|Воге 12-8. ° Сапу оой а РСК ъчЗ(Л опе гасйо|аЬе|ей$ ргпиег апд опе ип|аЬе|ей| ргппег (Ноой чап НЫ|едицпеп 1992; Копай е1 а3.
1994) (СЬар1ег 8). Весаиее оп$у опе о1 1Ле пчо а(саиде о1 1Ье РСК ргодосЬ 'ь ЗаЬе|ед, Язеге 'ь по пеег| йо с|еаче 1Ле гаййо|аЬе|ед 0|ъ[А чдйЬ а геейг|сй|оп епаупзе ог йо рип1у а 1гаВгпепй Ьу Ве| е|есйгорЛогее|е Ье(оге ргосеед|пд 1о сЛегизса| еес|оепс|пВ. Весаиее ййе Япй Ьчо пзе(Лоде а|азией а|ъчауе гею|1 |п 1Ле |п1годисйюп о( гад|о!аЬе! а1 Ьо(Л зепи|из о( (Ье 0НА, адд$6опа| вйера аге июару гегрлгес$(о оЬ|ази аеугпгпейпсару ЗаЬе|ед гпо|еси|ея 1п зиоей саеея (Ле гайЯ- о|аЬе|ед 0ХА 'ь дЗВеейед ъчЗ(Л опе ог гпоге геейг|с6оп ептугпея апс! 1Ье гею$6пВ епй3-ЗаЬе|ег| доиЬ|е-ейгапд- ес$1гауиепЬ аге ййеп рипйес$ Ьу сопчеп1юпа! попдепайиппВ аВагоее ог ро|уасзу|апзк$е деЗ е|есйгорЛогеяя ТЬе ю|е д|еадчапйаВе о1 1Ль д|деебоп яер ь Язай з1 сей|и| гее еогпе ргюг Зспоъч|едВе о( 1Ье раиегп о1 с|еачаВе о1 (Ле 0НА Ьу ййе раг6си|аг геейг|сй|оп еплугпе(п) иеед. Рог |Ье геаюпа !Зайед Ье|оъч, ЗаЬеЗ !од Ьу РСК ь поъч Язе гпе(Лед о1 сЬо|се 1ог ргераппц епй| ЗаЬе|ед 0НАе (ог Махапз-СИЬегй еесрлепсзпу ° Кад|о|аЬеЗЗиВ сап Ье сагпед ои1 ие|пВ егиа!$-вса|е ргерагай|опа ой р!аезпк$0|ъ(А.
° ТагВей 0НА сап ойеп Ье ъеср>епсед 1гоги Ьо(Л епдя ° Весаиее ЗаЬеЗЗпд Ьу РСК 'ь гарИ апд ягпр|е, пзапу д|йегепй йегпр|айее сап Ье ргерагед 1ог еес|иепс|пВ ог гпапзри|а6оп е|изо|йапеоое!у. ° ТЛеге ь по пеес! (о гиар 1Ье рое$1$опе о1 геейпсй|оп ейее зч|1ЛЗп ййе йагдей 0ЛЗА Ье1оге еег|иепс|пу йА4зайечег 1Ье пзе(Ьос$ иеед 1ог гадю|аЬеИпу |Ье епд-ЗаЬе|ес$ йагВей 1гауиепй иве( сопйа|и а1 Зеаей 5 х 1 Оз сргп о1 ззР (Ьу Сегеп|соч соипбпу р|еаве еее Аррепд|х 8) зп огдег йо оЬ|а|п ап аойогад|оВгарЛ о1 а еес|оепс- !иВ Ве! 1Ьа1 сап Ье геад айег 24 — 48 Лииза о1 ехроеоге.
То асЛ|ече (Л|а Воа|, й 'ь июаИу песегьагу 1о гад|о|аЬе! а1 Зеаъй ОЗ рпзо|е о1 |Ье йагВей 0НА (е.у, 1 иВ о[ а 5-ЗзЬ 1гаупепй) апс| йо иее яр-ЗаЬе!ед ргесигюге о1 Л|ВЛ ерес|йзс ас6М|у (>3000 Сйппю|е), ззР ог зе5 |аЬеИпВ ь гюй иъед йо ргераге 0НАа 1ог Махалз-СИЬегй еег|иепс|пп, ЗагВе!у Ьесаиее 1Ле Зоъчег епегВу о[ с$есау апд ЗопВег Ла|1-$$чее о1 1Леее 'во|орех дгеаду ехйепд ййе Яизеь гегрпгег$1о еъйаЬЗ|ьЛ пабе(асйозу аззйогад|оВгарЛе (А'ЛейЛег ог по1 (Ле гас$ю|аЬе|ед йагВей 0|ъЗА 'ь гесочегес1 (гопз а цеЗ ог 6|гас(|у 1гоги ап еиеузиабс геасйюп, й пЛои|д Ье риийез| Ьу ехйгас6оп ъчйЛ рЬепо|:сйого1гопз апд е|Ьапо$ ргес|рйа6оп зп ййе ргееепсе о1 0.3 хз под)игп асейа1е (рН 5.2). ТЬе рере1 о1 0|ъЗА апд ййе е|дее о1 (Ле йиЬе еЛои|д 1Леп Ье ъчаъЛед еечега! 6гиеп ъчйЬ Зсе-со!д 70 4 е|Лапо| 1о геиюче геяс$иа| еа!1.
ТЬе пеаг|у с|гу реИей о1 0 НА еЬои !й| ййеп Ье дыло|чей| |и Н О а1 а сопсеп1га6оп 1Лай ей|оп|а 5000 сргп!ОЗ. 6 (Ле с|оапбйу о1 гад|о|аЬе$ед 0|ъ(А 'ь ИгпШпу з1 'ь оюа|- Зу рояИЫе йо й|е1епп|пе ап ипапзЫВооиа 0|ъЗА еск|иепсе Ьу сагзу|пВ оий оп|у 1оиг (С, С РТ, А4С, апс$ С) о( ййе Яче геасй|опе дейаз|ед |и Язе Яозч сЛагй. А 3МРОКТАНТ 0о по1 дью|че 1Ле 0НА |п ТЕ ог апу ю|чеп1 сопйа|п|пВ ва$1.
5а|1 Зпйег1егее ъчЗ(Л ййе геасйюп Ьепчееп Лудгае|пе апд ййупз|пе апд ю гедисее 1Ле |п1епяйу о( (Ье Ьапде |и |Ье ТЕС геас6оп. Вийеге ъисЛ ах Тгь (Лай аге псЫи апппе Вгоире сап юрргейь 1Ье й$ериг|пайюп о1 А апд С. Рго1осо! 8 Ргерага6оп о1 ОепаЫг|пц Ро!уасгу!атМе СеЬ га ьбоовгас!гас, тоов ббтб ог Ойл твлсмбгств лвб абботчво вч ттбстворноввв!ь ипс!ег с!епатиг!п8 сопс!11!опт тЬгоиВЬ а йтп ро1уасгу!аптЫе Ве!. ТЬЬ рготосо! с!еасг!Ьеа Ьочч то роиг а РХА бес!иепс!п8 Ве! йа! сопташа опе сопсептгаВоп оуЪитгег апс! а яп81е сопсептгапоп от" асгу!ашЫе тЬгоиВЬои! 1Ье це1.
1!геа 1а !пс1ис)ес! ш тЬе Ве! аа а с1епатигапт то епаиге тЬат йе аерагатес! !1!ч!А атгапс!а гетпа1п арап апс! пп8гате тЬгоиВЬ йе Ве! аа 1шеаг тпо1еси!ея ТЬе Ве1 !а саат Ьетччееп ичо 8!ааа р1атеа йат аге аерагатес! Ьу ттчо тЬтп Тейоп ог пу1оп арасегя А зо-са!1ес! аЬаг1с'а тоотЬ сошЪ ог, !еаа !тес!иепт1у, а атапс)агс) а!оттек! сотпЫогша тЬе аашр!е чче!1а што юМсЬ тЬе 1УЬ!А тес!иепсш8 геаспопа аге 1оас!ес! Ъе1оге е1ессгорЬогеяя Ро1уасгу!ашЫе Ве!а иаес! тп тЬе еаг1у с!аут от 1к)ч!А тес)иепс)п8 чтете Вгоаа1у йк1с Ьу тос!ау'а агапе!агс!я Аитогас)1ОВгарЫс ехроаиге тнпеа счете 1оп8, апс! 1Ье Ьапс!а от 1.к! !А тчеге с!1йиае аа а геаи11 ОГ с!иепсЬш8 апс! йарегяоп ОГ тЬе гас!!паст)че яапа!.
То а11еЫате тЬеье ргоЪ|епы, Ргес1 5ап8ег апс1 А1ап Сои!поп (1978) с1еч)аес1 а шейос1 кчЬегеЬу "йтп Ве1а" чуете роигес1 иа1пц и1тгатЫп арасега гап81п8 ш тЬ|с1спеаа уготп 0.2 ппп то 0.5 пип. ТЬтп Ве1а аге потч иаес1 иЪ|с!и1тоиа1у то геао1че йе ргос1иста от" !к!ч)А бес)иепс1п8 геастюпя ТЬе Ко!1очч)п8 рготосо1 !а а й)гс1-Вепегат)оп ргос)ист (Ргес) 5ап8ег от тЬе МгсС, СатпЬгЫВе, !1К; МкЬае! 5пптЬ от" йе 1)п1чекяту от Вг111аЬ Со1шпЪта; апс1 !уачЫ ччк.
Китае!1 от тЬе !Лпчегяту ОГ Техаа 5оитЬкчеатегп Мес!1са1 Септег, 1!а!1аа) от йе ог!8!па) 5апвег апс! Сои!тюп гпейос! 1ог роипп8 тЬтп Ве!я МАТЕИАЕ5 САНТ!ОМ: Р!еаае атее Аррепс!!х ! 2 !ог арргорпа!е Ьапс!!!па о! татег!а!а таг!сес! чч!1Ь < ! >. Вттйегв ап41 5о!ттбопв Р!еаае аее Аррепс!!х ! !Ог сотпропепта о! атос!с ао1ипопя Ьиггегя апс! геадеп!я О!!иге атосЬ ьо1ипопа то !Ье арргорнате сопсеп!габопя Ассу!атгс!е ьо!и!!оп !45/ ип9 <1> асгу1атЫе !тгЬтЛ-ае9иепсшв вгасте) 434 8 1ч',!ч"-тегЬу1епеЬ1ьасгу1атнте 1б 8 НО ко бОО т! Неаг кЬе ао1игюп го 37'С го його!че йе сЬегпка!я Лс!!иак гЬе чо!шпе со 1!пег актгЬ с!1аг111ес! Н О. Рб!гег гЬе ао1игюп йгоивЬ а тгкосе1! и1оае 61гек !е.в., Ьта!8е, ОА5-ипк роке же), апс! яоге йе 11!гегес$ ао! ииоп ш с1аг1с Ьогг1еа ак гоогп гепгрегагиге.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
