Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.2 (522942), страница 141
Текст из файла (страница 141)
о О С Я Р, и Я 3» о с Х од 33 .С О Я с .с с .О 3» ~з Р Х Я с а Я о с с о о Я О а о с .с ..с я о ) о Я о ).с 3 О РХ Д .с с 3 »Я и Я 3 Д- — с 3 Я с о.Я о Б о- о < Е Д э 33 Я о з с „ 3 ,).- о ) 4в "О Б,Я Я с .с Р. » 3 О »3» д с »3» и .РсБ КА с о Б' О а .Я ОД с О Я 3 ,с о „ о с С 33» 3 о') о о о а Я ол с - с 3 .с .с ~с Я .Р )О < о.сХ Д 3) Я о а Я 'О О С 3 3 .х "о .с с Ф О и Я '3", с Б а» Е о ° е о ъ Я о я Я .с а'З 3 Р.
о Я О ) с 8 3 3» О» «3 Р о и 3 О 3 с с о О о с с Р. 33 Я 3 .О .Я Р 3 )Р О „С оо Я Р о .Я см О с о 3» 33» с й Я .с о Х с Я Я 3 .Б Р Я ь с :.Б 'З и О О О 3) с 3» о О с о Л Я ОО О -О .с Б 3 >е> О ь о о .о О О О о Р О' 3 Ь ас с Б .Х 3 о „с .с Я „„а я.с о о с ъ к ОЕ зсд О аЯ Я 33 3 .с о Я аБ о О Я 3 ) о о а а) С .3» Х" ДЯ с о 3 а'с 3 аа з Я с -" о О О О» Р,'.
'и О о 'Я.с „ 3 с ) о Я о с с Ф )СО .О О й с и 3 и о О 3» 3 Р. и »» О с Б 3 с Я .с ) о Б с о ь Я м м о Я Л 3 о о .с .с я 3 .с о а о 4 е и 3) О» С с с с о 33' о 3 3 .с О» 12.58 О Я Е 8 О О йО '-О О О О» а й й» а й» ее й» О» О с. Р. Е о о с о с а а О О с О Е .О '»» » х < О О» Х О О» и» а с о О .» Ь » а с с о -с с о й О с оЯФ Е о О О д ас ЕЕЕ, о О О .с Я » о с с С О йй О о О » б"..с Е йй о .с йй .с И » о о с о О » Р. Е с О» О йй » Е О О О » Е с О »- с о с ай р <; а О с О С Р. Е О О » Е а.с 3 а о йй с о О с Н О йй,с О :а 'с ,й о .с »- а й О ОО » С О "О йй 'О с О О» с Р 'а о Е.а с о .с о '»» 'с О Ф а о .О О О О Е о Я йй с о О» 'о Ф йй О О йй о с» с й с о 'О 'и «» Е йй с О О с о 8- о а о с О Д о х с й ' » О О о б О О О йй о с О с .О с О йй а;Е Е с »О о ы» а < »О аы йй О» О О.
О О йй с Е Е О о о с а" с ОЕо с со 'йй .И,с Я О О Е.с о О»»Е а о йй с с »с д с д О Р. Д О С С О с О.О О й с. Дяс О О с О О о с О 'йй О' О о СБареег 12: ОНА Бее1иепе»пц О о о -с»с ». Е » й Я О йй О й . 'О с .Р» айе о' ЗО В с с О .С О о йй о О О о о Р О ЕЕО О й Е с Р. Е О .с йй ОЕ о О й с о Я Е с о О б с ' "» .с Е о О' с ом »е Ей Е ОО О ЖЕ О О» 'Е Йа О О а а, Е с.й» а Р, с 2. ОО Р, О йе .О»» Й О»Х ~МО 6 'а,с с О -О О с Е»" .а О С с .) й ОЛ о Е 'О» о Е О ф о о .с а с» о с О О о Е с йй Р. Я Ед О О О а О й О ЬО с О й Е б Я Е О а О О й с.
Р О .с б О О Р д»с .с О О О О ОЕо \ Е с .с 7» й. Ф о О йй ~3 О с- О а Я с » - Е Я о О Д О „Я 5 О С а с й' а» О .с О Р,— Е 6 о ». -с с й о с О О .а с й .с Я .Я .И Я О» о с ОЕ а Е О Я а о с с й О Я .- .О о с с О» Е йй „ :4 О .с »- с с О Е й О а О Я О О О .м .с 'а а Я„а Р.
~ Е ф о о О "Е О йй о,с И о О О йй йй О Я О .я.а -а о о О З о 'с О о .с О О. '„ о Е О йй йй с с о О йй о » .с с о о О О С » О аа Е Е О Е.с » О с с „о .я о Рто!оео! б; Суе!е Бее!иепапц» Р!О!еоХУ-те»!!аеЕ»! 5еО!иепс!Пд Лесе!!сиз Бйпе РСй аи»! ЕпО!-!и!»Е!ЕО! Рптеее 12.59 с. й ОО с и Ой Ой Ой с о с с о" й с о с Ой » й к С Ой е 'с ~4 .й~ й » Π— о о:о й » ОЕ О й О -О и ИЕОЕ о' й Я С С Я О с с ооой Е 'ф а.'Я Е с Е оЕ с .Е о о о »» Я .О» С о й » Л а.с » и Я Ой й» о.Я 'о о й о о а о с ~ О Ой а а о' о о о с.
й о" и Е „с Ой о о Я ,Я о 'Я, йс О о о о я с.с с и О О » Я й »О ао Ой Е с ~ о ~~к а.с Я ,о.у о » с, о с, о с З о й а О й» 'с о с. с о "о й с «~, о "Й .Е о с Ой с о й с. .И— „Е .с '" о.Я Я й Е о й с "о ойс о.о о о о с. й ОК 'О Ой й сс„ Ой »» .с к Ой о с Е:о » с й кк а о Е Ой о о» .М о о с с» о .о с 4 -„." й .с с » с.о 1 о й »Ей о Е »Я Я Е й \ Я о с.й Есй ЕЖЕ 'о й »и ок Ой «\ о О 2 Ой О с Е Я о Е Я й '»О М .с 7 Е 1'и-о Ой М » о с С 'С '»О с о о .с о о д»» н Е 6 Ой О - ЯООО О Е»Я о й о ц » ск 4 аЕ .с О :Я » о с » о » Ой с и о о О Ой с о с с о' й с о с. с О .
с. Я О ЕЯ. й о а о о .с Ой С о Я »»й о » ~ 8 .с с 24 О Я » ОО=. з Е й Ю а Я Ой с о я и с а й а Е о о к й О » Ой '„'а и Е ,»О а Я й Е М» 'Я ОЕ й Е Я З к.с й о с о,с с .о » к о Е.о О й со о с О Е -о о а с Е й й .»О .и й оцЕ и "о Я о Я;Д с. о Я~ Ы, э о О» К .Я о о О Ойо с си Я й с с й ~ .с Е 0 ':к ЯО - СО Ой О» ,0 й й с с о ОО ' Я с» о Як ~~0 й „вЂ” »- с» ° 1 й ° ' йы» ОС о ОО - О.! с» ,О а о с. Ой с. Я с «» о Ой о ;Е Е "о Ой Ой с Я о Ю ООК й с.Я с о и .о о с 12.бо С)заРТег 125 17ИА 5ег(иепсйп5 АОО(Т(ОМАЕ РКОТОСОЕ: СЧСЕЕ 5ЕО()ЕМС(МС КЕАСТ1ОМ5 Е)51МС РСК АМ0 ПЧТЕК1ЧАЕ ЕАВЕЕ11ЧС ЪЧ(ТН (и-акр)дМТР5 МО51 гадйо1аЬейед сус)е-5есйиепсйпу геасПоп5 иле 5' ттР-)аЬе(ед о)35описйео1(де рптег5 зо цепега1е 1аЬе!ед сЬайп-зеппйпазед ргодис(5 (Ьаз сап Ье дезеслед оп 5езйиепс)п5 ден Ьу аизогад(05гарЬу.
Апо(Ьег ъчау 1о асМече ТЬе лагпе хоай ь 1о йпс!из3е (а-зтр)с1МТР5 йп сус!е-5езузепопд геасзйоп5. ТЬыпедзод, Ьоъчечег, йп оиг Ьапдл, ргОдисе5 ГПЕ55)ЕГ дЕ(5 ИЛПЬ Ь)ПЬег Ьас1зцгоипдл аПС1 саппоз Ье гесогпгпепдед ил(Ь еп(Ьи5|алт. ТЬе (овоилп5 ргозосо! Ь ап атайдагп о( те(ЬосЬ Ьагчемесй (гопз йпдйчйдиай йпчелзйдазог5 апд (гогп ТЬе гпапизас1игег5 О( (Ьегто5(аЫе О МА ро!угпега5Е5, ТЬе ргозосо! Ьал Ьееп орзйтйхед зог 05Е Ъъй(Ь Агпрй зТао С5, Ьи( япзз1аг ТЬепползаЫе епхуте5 (ГОГП ОЗЬег тапи(асзигег5 5Ьои!д Ье еевзаву е((есзйче (р)еазЕ 5ЕЕ СЬооипц а 5езйиепсйпд 5у5(егп )п ЗЬе сЬарзег йп(годис(юп апзй ТаЫе 12-9).
САЗЗТ1СЗНз Р1еазе зее Аррепзох 12 (ог арргорг(а(е Ьапд1(пв о( зпа1егйан зпаг(зед чз(ЗЬ (3>. Аддйтйопа! Матенайл (и-ззРУЯТР (3000 Сй(тто(е, 70 тСз(т() < 3 > ог (и-555(сАЯТР (7000 Сз)тпзо(е, 70 тСз(то < ! > ог (и-ззр(дЯТР (2000-4000 Оз(тто(е, — 70 тО(гпо (! > Сус(е-5ез)иепсйпц ех7еп5(оп7(епп(па((оп т(х(иге5 Ргерагед ал озл)зпед (п тане 72-74. ОППопис(ео(зде рпгпег (ип(аое(ег( апе( д(55ОЬед (и Е(ТО а( а сопсеп(габоп ОГ 20 РМ) МетЬод 1. Тгапл(ег 2 и! о(ТЬе арргорпазе ЕЫМТР пзЫиге (5ее ТаЫе 12-14) зп1о 0.5-т! со1ог-содед тйсго(и ог йпзо йпдмдиа! ъчеП5 о( а Ьеаз-5(аЫе пззсго(вег р!азе рге!аЬе!ед С, Т, А, апд С (з.е., 2 ий о( дд Ьзге йпзо зиЬеузчеП !аЬе!ед С, 2 )зй о( ЕЫТТР п ох(иге йпсо 1СЬКАчеП 1аЬейед Т езс).
51оге (Ье зиЬе5(т рйа1е5 оп зсе. 2. Еог еасЬ зетр1а1е зо Ье 5егйиепсед, ргераге 30 ий о((Ье (оооъипд пзЫиге апд асЫ )Ье геацеп)5 йп 5ЬОъъп. зезпр)азе 0НА зп Н О о))волос)ео(зде рппзег (3 О ЧМ) а-)КЬе1ед дАТР 5х сус)е-зез)иепсйпв Ьи((ег Н„О 3 — 3 00 (зло)ел 7.0 к) в.о 81 Зо 80 81 М3х зне геадеп(5 Ьу депз(у ПЫЫпц зне ои(Езде о( ТЬе с!олед 1иЬе. (з песе55агу, сепзп(иде Пзе зиЬе деро531 ав (Ье геадеп(5 Ы ТЬе Ьоиот. 3.
Тгапл(ег 6 и) о((Ье гпЫиге ргерагес( !п 5(ер 2 йпзо еасЬ о( (Ье (оиг зиЬе5(ъче85 ргерагесй зп 5(ер 4. (ОПизе ап авцио1 о( ГЬе ргерагаооп о( Атр! ГГагй С5 (2МА ро)упзегале ъъл(Ь 1х сус)е-5есйиепсйпд Ь Ппа! сопсепзгавоп о( 05-1.0 ипйо и!. АЕЫ 1 и) о( зве дои(есй епхуте зо ЗЬе ПЕ3е о( еасЬ зиЬе ог ъч 5. Ео31оъч 5(ер5 4-7 о( (Ье гпайп ргозосо!. 44МТР КТАстзои Мзхтике сзтнек КеАсевт5 тз и е Р 1 тм м МТР тм Ам Чозимез зи ! Тзил-Сз Е()ТА дттр 4АТР ЬСТР ЕЫСтр змттр ддАТР ЕЫСтР д м, РН В.О) дО тМ, РН В.О) Н,О т дСТР ддСТР ЕЫТТР дзйзъТР зЫСТР 20 20 20 80 10 10 820 20 20 20 — 160 10 10 740 20 20 20 — — 120 10 1О 780 20 20 20 — — — 40 10 10 880 20 20 20 20 ТАВЕЕ 12-14 ддМТР Ех1еплзоп(тегпзйпа(йоп Мйх(игел Гог ()Ке йп Сусйе-Кезйиепсйпд Кеас(йопл ъчй1Ь Кадзо1аЬе!ед дАТР Рго1осо! 7 Спеппса! 5ециепс~пц ТАВЕЕ 12-1 5 СЬегпка! Мог)!Екаг!005 С15егС 1п СЬе Махагп-С11ЬегС МеСЬогС ВА5Е 5РЕС1НС МОП181САТ1ОЫ МесЬу!апап оЕ Х, иисЬ СКшесЬу!хи!Гасе ас рН 8.0 гепг!еь сЬе С,— С, Ьопг! хреегВса1!у хихсерпЫе со с!еача8е Ьу Ьахе.
РгрегЫ!пе Еоппасе ас рН 2.0 чгеахепх сЬе 81усохЫк Ъопг15 оЕ аг)еп!Пе апгС Виашпе гехЫиех Ьу ргоса- папп8 п!сго8еп агошх гп сЬе риг!пе г!П85, гехи16п8 гп гсериппасюп. НугСгах!ие арапе руипигВие гспВА гчЬкЬ гесус1ые си а Ече-шешЬегегс Еапп сЬас ы хихсерс!Ые са гепюча1. !п сЬе ргехепсе оГ 1.5 М ЬсаС!, оп!у сугохспе геаеь арргесгаЫу кЬЬ Ьугсгах!пе. 1.2 к ьсаОн ас 90'с гехи!ып 81гап8 с1еачахе ас А гех!8иех апгс хчеасгег неача8е ас с гехыиех.
А.ГС С+Т С А>С ТЬе ча1агКе хесаииагу аииие РГреигпие 1х ахед га Пеаче гЬе хахас-РЬахрЬеге сЬа1и аГ ПЬГЛ хг Гие *Ьех аГ Ьазе гпа010еаИаах. Раг спхсыпаих аГ гаесиаи!хга аГ с!еачахе, р!еххе хее Махаю аии СВЬегг (19801 аи4 Маггах ег а1. (19881 12.61 н нике тне снл1н-текм1нлт1Он геенн!с)сге, ччн1сн 1нчоече5 енхчмлт1с 5чнтне515, сЬе Махаш-с 11Ьегс шесЬог! епса115 сЬеппса! г)е8гаг!а!!оп оЕ а 5е8шепс оЕ ЕЗУСА. А Ега8шепс оЕ ЕуХА гайо1аЬе!ег! ас опе епгс 15 раг6а1!у с!еачег! ш 6че 5ерагасе сЬеппса! геассюп5, еасЬ оЕ ччЬ(СЬ 15 5ресгбс Еог а раг6си1аг Ъаае ог суре ПЕ Ъаае (Махаш апг! С1!Ьегс 1977, 1980). Рог 6ггсЬег йасп5- 51оп оп епй1аЪе11пц, р!еаае 5ее йе рапе! АОО1Т1ОЫАС РКОТОСОЫ РКЕРАКАТ!О!ч ОЕ Е!90- САВЕЬЕО Ошл ЕОК СНЕМ1САС 5ЕО(1ЕЫС!ХС ас сЬе епг) оЕ сЬ15 ргососо! апг! р18пге 12-7.
ТЬе с1еача8е геасбоп5 Вепегасе 6че рорп1а6оп5 оЕ гайо1аЬе1ег( пю1есп1е5 йас ехсепг! Егош а сошшоп рошс (йе гайо1аЪе1ег( сегпппп5) 1о йе я1е оЕ сЬеппса! с!еача8е. ЕасЬ роро!асюп сопяаь оЕ а ппхшге оЕ пю1есп!е5 ччЬ05е 1еп81Ь5 аге г!есегш(пег! Ьу сЬе !оса6оп5 оЕ а раг6сп1аг Ьаае а!оп8 йе 1еп8сЬ оЕ ЕЬе ос!8!па! Есаул.
ТЬеае рорп1а6оп5 аге йеп ге50!че6 Ьу е1ессгорЬогея5 йгоп8Ь ро1уасгу1аш(с!е Ве15, апг! сЬе епс)-1аЬе!ег! пю1есп1е5 аге с!есессег! Ъу апсогайо8гарЬу (р1еаае 5ее г18пге 12-7). Рог 6ггйег г)еса115, р1еаае 5ее сЬе шсгойк6оп (р. 12.3). ТЬе Махагп-С11Ьегс шесЬог! Ьаа пос СЬап8ег! я8ш6сапс1у япсе 1ь ш111а! гсече1оргпепс. А11Ьоп8Ь аг!Йс(опа! сЬегпка1 с!еача8е геас6оп5 Ьаче Ъееп г!еч15ег! (е.8., р1еаее 5ее АшЬгоае апс( Р!е55 1987) апг( ойег геас6оп5 Ьаче Ьееп 5ппр!16ег1 (Мого ес а!. 1993; РкЬег5Ьу 1996), шоас 1пчехс18асог5 ге1у оп йе г!шпсес оЕ геас6оп5 ос!8!па!1у с1ехсПЬес1 Ъу Махаш апг! с*1!Ьегс (1977, 1980). ТЬеае с1еача8е геассюп5 аге сагу!ей ош ш си о 5сацея (1) 5рес16с Ьааее (ог суре5 оЕ Ьааех) ппгсег80 сЬешка! пюй6сапоп апг( (2) сЬе пюйбегс Ьаае Ь гешочег! Егош 1ь 508аг, апг! йе рЬоарЬойехсег Ьопг15 5' апг1 3' со йе пюй6е11 Ьаае аге с!еачег! (р1еаае 5ее ТаЫе 12-15).
12п52 СЬар)ег 121 РХА 5ег)иепст5 8 5'р-ОАТССААИТ З и ИчА ТеС С А>С Ме!Ьу!ааоп о( и, и!!П бчпе1пу) еи!1а!е (РН 8) !палее спе Св-Се Ьопб Р~репб!Пе 1оппа!е (РН 2) чгеахепе гье 9!усояб!с Ьопб о1 роппее, Ьу 1.г и НПОН а1 905С гесс!15 1и 51гоп9 с)еачаде а! абеп!пе апб ччеахег Нубгаа~пе ер)!15 185 пп95 01 рупгп)б!Пес )и гпе РГЕ5ЕПСЕ о11.8 м Нао~ оп!у суГоа!Пе геас!5 пап Ьубгаг)пе.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
