Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.1 (522940), страница 39
Текст из файла (страница 39)
° Весаиае сЫогашрЬешсо! шЫЬ|ь Ьассепа) ргосе(п аупйеяя й ргечепса гер!кайоп оЕ |Ье Ьассепа( сЬ|ошоаоше. Носчечег, герйсайоп оЕ шапу "ге!ахесГ' р!оп(оя шс!исйп8 ч!гсиайу ай чессоь саггу(п8 СЬе ей!й|уре рМВ1 (ог со!Е1) герйсоп, сопг(пиеа |п йе ргеаепсе оЕ йе йгий ипй! 2000 ог 3000 сор(еа Ьаче ассипш1асе|1 ш йе сей (С!е|чей 1972). ° 1|псй сЬе еаг!у 1980я сЫогап|рЬешсо1 |чаа |пей гоийпе!у со оЬ|аш йесепс у(е1йа оЕ р!аяп|сЬ сопса|пш8 сЬе ив1йсуре со1Е1 гер1|соп (гоп| 1агйе-аса!е си!сигея Моас Ь|ВЬ-сору-пшвЬег р!аяпЫ чессога сопасгиссес) айег 1982 саггу ппйасюпа йас ргечепс ог йеасаЬ|1Ье сЬе |псегассюпа Ъессчееп ЙХА! апй КЫА!! апс( |ЬегеЬу ге!еаае р!аяпЫ РХА Егош сору-пшпЬег сопсго1. Веса|ье чессога сопсашш8 сЬеае шисасес) чегяопа оЕ |Ье со1Е1 оп81п аге гпашсашес( ас аечега! Ьипс(гес) сор(еа рег сей, Ь|ВЬ у|е!сЬ оЕ р1аяпЫ Е|ЫА сап Ье оЬ|а|пе|1 члйоис |пЬ|Ь|сш8 Ьассепа! ргосе|п аупйеяя !ч(ечегсЬе1еаа, сгеас|п8 Ьассепа! си1- сигеа |чйЬ сЫогагпрЬепко! айй Ьаа ю|пе ас)чапсайеа: ТЬе сору пшпЬег оЕ |Ье р(аашЫа (псгеааеа а 6|гсЬег с|чо- со йгее(оЫ ш йе ргеаепсе оЕ |Ье с)ги8, ап|1 п|оге ыйшйсап|1у, |Ье Ьийс апс( чьсоясу оЕ йе Ьассепа1 1уаасе аге Вгеас!у гейисей Ьеса|ье Ьоя герйсайов ь (пЫЬ(сей Мапу (пчеаййасога Есп|Е йас а|Ы|пй сЫога|прЬешсо) со |Ье Вгосчшй си!сиге Ь Еаг |поге сопчешепс |Ьап Пеайпй чд|Ь а Ь|8Ыу чьсоиа (уаасе.
° Рог гпапу уеагя й |чаа сЬои8Ь| |Ьас агпр!|йсасюп о( р1аяпкЬ ш сЬе ргеыпсе оЕ сЫогап|рЬеп|со! счаа ейесйче оп1у |чЬеп сЬе Ьоас Ъассепа |чеге Вгосчв ш пшшпа1 шес((иш. Носчечег, а ргососо1 йас иаеа псЬ шео(иш апс( сЫогашрЬепко! 8!чеа гергойис|Ыу Ь|ВЬ у(е1оа (>! ш8 оЕ р1аяпЫ ЕЗУСА рег 500 |п) оЕ си1- 1туоттагтоп Рапе1ь 1.145 КАМАМУСЕЫ6 Ргорег((еь апд Моде оЕ Асс!оп оЕ Капаспус1пь ТЬе 1сапашусшк, кчЬ!сЬ аге шешЬегв оЕ йе аш(по81усок!т)е Еапи!у оЕ апс!Ь!о6св, счете 6гя Ьо!асес1 ш !937 ас йе 1арапеве уаасюпа1 1ппПисек оЕ Неа1й Егош си!ситек оЕ Зттерсотусек 'хапатусет(сик (()шешсча ес а1. 1907), счЫсЬ купсЬеяхек йгее Еоггпк оЕ сЬе апдЬюдс: 1сапашусспк А, В, апт) С. Капашусш А, йе гпа)ог сошропепс, Ьав а Ъгоат( арсе!тити оЕ асс(чссу а8ашвс псапу крее(ев оЕ Ьассепа апт( Еог вечега1 уеагк счав ап иврогсапс апссЬю6с Еог йе сгеаппепс оЕ вспоив !пЕесс(оик саикет( Ьу бгатп-пе8ас(че ЬасПП.
1ь всегеосЬепиксгу апс1 аЬьо! ше соп68игасюп счете т(ег!чет) !шдаПу Ьу сЬеииса! псейотЬ авт) пис1еаг гпа8пе6с гевопапсе (ЫМВ) апс) счете 1асег сопусппет( Ьу Х-гау сгувсаПо8гарЬу (Еог течсечк р!еаке вее Ноорег 1982). ТЬе аш(по8!усов)т)е апПЬсодсв аге ро!усаиопв йас ЖЕЕике геас61у йгоиВЬ ропп сЬаппе1в сп йе оисег тпетпЬгапек оЕ бгаш-пе8ас!че Ьассепа. Носчечег, сгапврогс Еготп сЬе репр!аяшс красе шсо йе сусоко! Ь т)г!чеп Ьу йе пе8астче тпешЬгаве росеп6а! оЕ сЬе сппег репр!аяпк псешЬгапе апс) Ь, йегеЕоге, ап епегВу-т)еревт)епс ргосевв. Опсе тп йе сусоко), сЬеве апс1Ьюдск шсегасс сч)сЬ ас!сакс сЬгее пЪовогпа! Ргосешв апс) чдсЬ крее(6с Ьакев спсЫп сЬе с)есосПп8 ге81оп оЕ йе япаПег пЬокогпа! ВЫА киЬшис, гевп16в8 ш спЬс- Ь(сюв оЕ ртосеш куисЬеяк авс) ап !истекает! Егет)иепсу оЕ шт)исес) сгапк!асюпа1 еггогв (Сот геч(етчк, р1еаке вес ЫоПег 1984; СипсП)ЕЕе 1990).
1п исто, 1сапашус!п апс1 осЬег апипо8!усокЫе апПЬю6св сЬат 1ас1с а Ваап!т1о Вгоир (е.8., пеошус!п апс1 Вепсашусш) а!во )пЫЬЬ крПс!08 оЕ Вгоир 1 шсгопв (чов АЬвеп ес а). 1991, 1992; чоп АЬвеп апт1 14оПег 1993). ТЬЬ оЬкегчасюп виррогЬ сЬе Ыеа сЬат йе аш(по81усок(де апстЬтодск шау тесо8и(ае апс!епс пгиссшек сп ВХА сЬас Ьаче Ьееп сопвегчет) йгоиВЬ 1оп8 всгессЬев оЕ ечо!шюпагу сапе (Рачдек 1990). МесЬап(ьтп оЕ йеь!ьСапсе Со Капатпус!п 1п в!гостите, сЬе 1сапашус!пв гекегпЫе Вепсашус!п, пеотпусш, аптс Вепескш (С418) (р1еаве вее р)Вите 1- 14), апт( йеу аге шасдчасед Ьу шапу оЕ сЬе ватпе Ьассепа! аиипорЬокрЬосгапкЕегавек (АРНв) (Еог геч!етчк, р!еаье вее Рач!ев апс) Вш(сЬ 1978; ВЬачт ет а!. 1993). ОЕ йе вечеа ша)ог 8гоирь оЕ АРНв йас Ьаче Ьееи т)!к!(п8шкЬет) оп сЬе Ьаяв оЕ сЬесг киЬягасе врест6стдев, ссчо Ьаче Ьееп ивет) ехсепяче1у ак ье1естаЫе шаг1тегв Еог 1тапашус!п геяксапсе (Кш ): АРН(З')-! Ьо1асед !тоти сгапвровоп Тп903, апт( АРН(3')-11 сво1асед Егосп Тв5.
ТЬе АРНк епсот(ет( Ьу йеве Вепеь шас6часе )тапатпус(в Ьу сгапкЕегпп8 сЬе у-РЬокрЬасе оЕ АТР то сЬе Ьутсгоху! Вгоир сп сЬе 3' роя6оп оЕ йе рвеит(овассЬагЫе. ВосЬ арЬ(З ')-1а апс1 ар)т(З')-Иа Ьаче Ьееп мед ав ье)ешаЫе тпаг1сегв ш рго1сагуо6счешоть, Ночтечет, П Ь пос а!ъчаув еаву со аксегсаш Егопс сЬе 16егасиге счЬ!сЬ Вепе Ьав Ьееп пьет! со сопксгисс рагски1аг чессогв. ТЫв Ь ип!от!ипате Ьесаиве сЬе РЬСА вет!иепсеь оЕ ар)с(З')-1а апт( ар)с(3')-Па Ьаче 6(чет8е6 ехсепьЫЫу (ВЬасч ес а1. ! 993), впсЬ сЬас йе ссчо Вепеь Ьаче 6(ЕЕегепс гевспссюп псарь апт1 счП! пос стоя-ЬуЬпсПхе ипс)ег поппа! сопсПсюпк оЕ кспп8епсу.
АРЬ(3')-Н ейксепс!у спассЫасев Вепесксп (С4!8) апт) Ь ивет) аь а т(ош(паис ке!ессаЫе шаг)сег сп еи)тагуос(с сеПв (е.8., р1еаве кее )ииевех апт) Радек 1980! Со164ге-Сагарш ет а). 1981; ВоиСЬегп авт( Вег8 1982; СЬеп китс Ри)тиЬата 1988). ОН СН ОН ОН -'.~:Л-, Й)ЙЙЙЙ Й Й ° й« 1.146 СЬартег 1: Р1аяпттЬ апт1 ТЬев с)теуи!петт |и Мо1еси1аг С!оптП ВК322 ° рВП322 апт) аП о1 |ь с)ег)чат)чеа гер1ка|е ш а ге!ахет! 1айюп. ТЬеЬ сору пишЬег сап Ье шсгеаает! )гогп -20 то >500 Ьу шЫЬ16п8 Ьас|епа1 рготеш ауптЬеа)а иий ап апПЬютк |шсЬ аа сЫоташрЬешсо1. ° рВП322 апс) аогпе оу |ь т)ет)чат)чеа гесотпЬ|пе то уотш ши1т)шега |п тесА" Ьоата (Вес)Ь|оо)т ет а!.
1979). рВП322 т!оеа пот саггу а атаЬ|рпу ге81оп (сег) |Ьа| гпа)пташа |Ье р! аяпЫ аыпопогпегя |чЬкЬ аге тпоге е|Пс1епт!у рагс)тюпет! Ьет|чеев т)аиВЬтег сеП| 15шпп|ега апт! 5Ьеггая 1984), сег Ь а 280-Ьр ает)иепсе ат тчЬкЬ а Ьоя гесогпЬ)пате 1хегС) ась ш сопсегт |ч||Ь АгВП ап|1 РерА ргосеша |о гет!исе пш1типепс р1аа- п|Ы РЬ|Аа |о а пюпотпепс Еотш (СоПотпа ет а1. 1990). ° рВП322 апт! па вп|пейа|е т!ет)чат)чеа!ас1| а раг|Пюп гипс!)оп апс) аге геай1у 1оат уготп сеПа йлпп8 яьта1пет! Вготч|Ь |в пиштпа! шейа )п |Ье аЬ|епсе от" апПЬюПся ТЬ|а ргоЫетп тчаа ао)чет) Ьу |Ье сопягис|юв от" р1аяпЫа |Па| соп|а|п |Ье раг!оспа оЕ р5С101 |и а рВП322 Ьас1|Ъопе Яиг)та е| а). 1984).
ТЬе раг !оспа 1пт)исеа шрегсоП|п8 от" |Ье ог)8)п оЕ герПсаиоп, |чЬ|сЬ аотпеЬотч аПо|ча еасЬ р!аяпЫ пю1еси1е |и Пте |п|гасеПи!аг роо! |о Ье тгеате|1 аа ап )пйчЫиа! ипП о1 шЬеп|апсе (МП1ег е| а!. 1990; Соп1еу апт) СоЬеп 1995; РПг|Ье|п апП К)ш 1997). ° рВП322, !Псе а1шоя аП р!аяпЫ честога сопипоп!у пает! 1п пю!еси!аг с1опш8, Ь попсов)ицат)че ап|1 Ь шсараЫе от" йгесПп8 Па соп!и8а) тгапагег ггош опе Ьас|епиш то апо|Ьег. ТЫа Ь Ьесаиае рВП322 1ас)ь а ге81оп (тоЬ) епсойп8 рготешз |Ьа| Ьтп|1 то |Ье р! аяпЫ РЬ)А ат |Ье ог)8!и ог" ггапатег (опТ).
МоЬ рготеша 1птгот!исе а яп81е-а!таит! шс1| а| а я|е саПет! п)с!осате|1 |ч!|Ып а си-астш8 ге81оп саПет! Пот (Еог геч)етчя р1еаае аее СЬап ет а1. 1984; Ч|П!етта апт! ЪЙПапа 1984). рВП322 апт) |ю|пе р!аяпЫ честога от" |Ье аап|е чш|а8е сап Ье шоЬ~1)тед 1|" а соп)и8аПче р!аяпЫ | Па| ехргеааеа МоЬ ргоге)па Ь а1ао ргеаепт 1п |Ье сеП (Уоип8 апт! Рои1Ь 1978). МоЬП)гатюп от" рВЙ322 |Ьеп оссига !топ| |Ье тс яте (пис!ео|Ые 2254 )п |Ье рВП тес)иепсе).
Ь)етчег р1аяпЫ честите 1ас1| тЬе и)с/)тот я|е ап|1 саппот Ье гпоЬПгееП (Тъчщ ап|1 5Ьегга| !980; СочаггиЬ)аа ет а1. 1981). 1п)огта6оп Рапе!я 1.147 ТЕТ$тАСтгСЕ! 1ЧЕ регт!ея апд Моде оЕ Аст!ои оЕ Тетгасус!1ие ° А11 сесгасус!шея яЬаге ап Ыепдса! Еоиг-пп8 сагЬосус1к я)се1есоп сЬат яиррогь а чапесу оЕ Вгоиря (р1еаяе яее Р$8иге 1-15). ° ТЬе Вгяс оЕ тЬе сесгасус1шея — сЫогсетгасус1ше — лчая д!ясочегед ш 1948 ая а па!ига!1у оссигпп8 аидЬлоис аупсЬеяхед Ъу 5сгерсотусея аигеоЕис!ется апд асдче а8ашя а тчЫе-хап8е оЕ Сгаш-рояле апс$ Сгаш-пе8адче Ьассепа апд ргосохоа.
Ву $980, -1000 сесгасус$лпе депчадчея Ьад Ьееп Ьо1атед аид)ог яупсЬеяхес1, апт! сЬе еясипасес$81оЬа1 ргос$иссюп лчая тп ехсеы оЕ 500 гпесгк сопя (Еог гечлечя р1еаяе яее СЬорга ет а1. 1992). ° Тесгасус!ше епсегя Ьассепа1 се11я Ьу раяяче д)((ил!оп асгоь тЬе ошег шешЬгапе тЬгоиВЬ ропп сЬаппе!я, ъчЫсЬ аге соплрояед оЕ тЬе ОшрР ргосеш. Тгапярогс оЕ йе апВЬюдс ассом йе сусор1аяплс лпегпЬгапе апд лито йе сусор!аяп гетригея рН ог е1ессгоросепба! Вгад!ептя. ° Тесгасус1лпе шЬлЬгь Ьастепа1 Всей Ъу сВягирсш8 содоп-апскос$оп шсегастюж ат йе пЬояолпе, лчЬтсЬ Ыос1ся ргосеш яуптЬеяя (Еог течлечгя, р1еаяе яее ба1е ет а1. 1981; СЬорга 1985; СЬорга ет а1. 1992). 5рес(йса!1у, йе апдЬюдс Ыпдя то а ып81е ысе оп йе 305 пЬояоша1 яиЪ|лшс апт$ йегеЬу ргечепь ассас$ииепс оЕ аш(поясу!-т8$4А со тЬе ассерсог ясе. Рго 1пасс!чадоп оЕ йе сесАЕС) Вепе тЬегеЕоге ргочЫея ВголчтЬ асЬ апса8е со Ьассепа сЬас аге ехрояед то яисЬ а8епь.
1п йе еаг!у дауа оЕ шо!еси1аг с!опш8, йЬ еЕЕесс лчая гьед то яе! есс Еог Ьассепа саггуш8 гесошЬлпапс р!аяпЫя ш лчЫсЬ йе сесА(С) Вепе Ьас$ Ьееп шасдчатес1 Ьу (пяегсюп оЕ а Еогет8п $3)я)А яес)иепсе (ВосЬпег ес а1. 1980). ясна С 1 О О ОН О НО Г$СС)ттЕ!-15 5тгистиге апд 5уптЬеядя оЕ Тетгасус11пе ТЬе сагЬоп а!опля )п сЬе сесгасус))пе я)те!есоп саггу яиЬяьисе Вгоиря )п чагюия сесгасус))пе дегвасьея.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
