Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.1 (522940), страница 40
Текст из файла (страница 40)
СЬеписа! Ьопдя (ЙПес! аггои я) арреаг аЬоче СЬе р)апе о( тЬе $$8иге; Ьопдя (с(аяЬес( )спея) арреаг Ье!очч сЬе р!апе от сЬе Е(Вите. МесЬапЫпт оЕ Кея)ясапсе ОЕ Тетгасус1!пе ° ТЬе сЫеЕ шесЬашяп Ьу лчЬлсЬ Е. соВ Ьесогпея геяясапс то ЫВЬ сопсептгадопя оЕ тесгасус!ше (пчо!чея апдрогсег ргосешя, )сполчп ая Тет рготелия, лчЬ!сЬ аге 1осатед ш йе Ьассепа1 шпег шешЬгапе апд, ш ехсЬап8е Еог а рготоп, ехре1 шсгасе11и1аг тетгасус!ше-тиета! согпр! ехея а8ашяс а сопсепсгасюп ВгасВепс (Еог геч!елч, р1еаяе яее СЬорга ес а1. 1992).
Кея!ясапт се!!я аге аЫе со Вголч ш сЬе ргеяепсе оЕ тесгасус!ше Ъесаые сЬеу шашташ а !олч лптгасе!1и!аг сопсепсгадоп оЕ сЬе дги8. ° ТЬе Вче )спосчп ге!асес1 сеьасус1ше еЕВих Вепея, йея8пасес$ гегА(А) со сетА(В), епсоде ЬудгорЬоЬ(с рготеспя оЕ Ьопю1оВоия яес)иепсе апд яии!аг ягиссше. ° ТЬе се!А(С) Вепе оЕ рВК322 апд плапу отЬег честогя епсодея а 392-геядие ро!урерсЫе сошрояед оЕ ичо дошалпя еасЬ сои!а(шп8 ях сгапяпешЪгапе яе8шеитя (Еог гедем апд геЕегепсея, р!еаяе яее Мс$4(сЬо1ая ет а1. 1992). ТЬе ТесА(С) рготелп аыеплЫея лпсо а ши1типеглс Еопп ш йе шпег шешЬгапе оЕ Е.
сей (Нсс)ипап апт$ сечу 1988). ° ТЬе ехргеяя)оп оЕ сегА(С) Ьая яечега1 со!! асега1 еЕЕесся оп тЬе се!1 (Еог ге(егепсея, р1еаяе яее Сг)ЕЕлтЬ ес а1. 1994). ТЬеяе еЕЕестя лпс1иде (1) гедисед ВголчтЬ апт$ чтаЬл1лсу, (2) лпсгеаяед ялрегсол!лп8 оЕ р1аяпЫ Рся)А, (3) согпр!еплептасюп оЕ с)е(есь лп росаяяшп ирса1се, апс$ (4) тпсгеаяед яьсердЬл!иу со осЬег апдЬассепа1 а8епь, сис1ид)п8 апипо8!усоян1е апдЬюскя апд!)рорЬ)1к асЫя.
1.148 СЬартет 1| Р!актгдк аиг( ТЬеи 1ЛеЕи1иекк ги Мо!еси!ат С!оигвч АМР!С!Ш1Ч АМ0 САКВЕЫ!С!ЕЬ!1Ч Ргорег(!ек апд Моде оЕ Асдоп оЕ Атпр)с|В(п апд СагЬепЬоВ1|п ° АшркППи Ь ап апипореп!сППпг сагЪепкППп Ь а кепи'-вупйедс сагЬохуреикП1|п (р1еаве все Р!Вите! -16). ° ТЬе ап6писгоЬ|а! ас6чПу о( Ьой согироипсЬ ех|епсЬ то Стати-пе8абче ог8апЬпь юсЬ ав Наетср)гг!ив ги))иепгае ап|1 Е. сс1г. СагЬешсП1ш |чав йе Егкт реп|с|И|и чдй ы8п!Псапт асдч!ту а8а!пв|!гвеиг)отопив крее!ек |Ьа1 аге по| высер6Ые то апнпорепк|Пшв, юсЬ ак ашркП!ш, ° ТЬе г)81|3!1у оЕ йе сеП |чаПк оЕ киксердЫе ог8ашяпв Ь Пие ш рагс 1о а й|п 1аует оЕ стока-Пи)сег( рер6- 6о81усап, )тьт 1 — 2 пю1еси!ек й|с1|.
ТЬе 1оп8 81усап сЬа!пв ате сошровег3 еп6ге1у оЕ анино ю8агв апг( аге стоя-Пп1|ед Ьу рер|Ые сЬашв совташш8 О-аш!по ас||Ь. ТЬе решсП1нь шЫЬ~| |Ье Ппа! вта8е оЕ вупйеяв оЕ стоке-Пп)тк, гчЬкЬ оссигв оиьЫе йе сеП ап|1 Ь сата1уге6 Ьу а |гапврер|Ыаве (Еог геч!еъчв, р!еаке кее Хеи 1985; Ропогч||г апг) Мапг)ег 1988). РешсППпв аге гиок| асдче а8ашвт Ьастепа !и йе!о8- ап|Ьпис рЬаве оЕ 8го|ч|Ь апт) Ьаче теЪатгчйу 1ибе еЕЕес1 ш |Ье в|а1юпагу рЬаве, гчЬеп вуийеяк о( рер1Ыо81усап ь юрргеьей ° 1п а|Ы!6оп то йе!г асбпдту а8ашв| тгапврердт)аке, реп!сППпв |пЫЬ|1 еигутпев (саПег) решсйш-Ъшйи8 рготешк ог РВрв) песеяагу Еог йе гог)-1Пте аттис| ше оЕЕ, ссП ап|1 Еог вертши Еоппабоп г)ипщ |1мяоп (Тотпавг 1986).
МесЬап!кт оЕ Е(ев!в!апсе !о Атпр1с11Ип апд СагЬеп1с1!Вп ° ТЬе репр!аяшс епгуп|е !3-1асташаве саибугек Ьудго!ук!к о( 1Ье сус!к яп!Пе Ьоп|1 оЕ |Ье В-1асташ пщ, чдй сопсопн|ап| Петох|йсабоп оЕ ашр!сППп апд сатЬешсППп (АЬгаЬатп ап|1 СЬа|п 1940; ВыЬ апг) 5у)тек 1984). ° !3-1астап|авев аге ргевепт ш япаП атпоипь !и |Ье репр!аятис красе оЕ Пе!6 атташе оЕ ап6Ьюбс-геяяап|, боташ-пе8адче Ьастепа.
ТЬеу аге со|1е|1 е!йег сЬтотиовотиаПу ог оп р1аяпЫв. ТЬе гиок| ргеча1еп1 (3-1ас|ашаве ш Сташ-пе8а6че Ьастепа — йе ТЕМ (3-1ас|ап|аке — ь пашет! а(тег |Ье |п|6аЬ оЕ йе Айеп|ап 8и! Пош гчЬотп а ига|в о( Е, соП ехргевящ |Ье епгуше |чав Пгвт !ко!а1ег( |п 1965 (Егатта ап|1 Ков1описЬа1ои 1965). ТЬе ТЕМ (3-1ас|атпаве, |чЬ!сЬ ~в |чЫе!у ые6 ав а ве1ес1аЫе шаг1|ег |п тпо1еси1аг с1оп|п8, ь а 286- гевЫие рго|е!п епсо|1е|1 Ьу |Ье Ыа Пепе (5итсПЕЕе 1978). ТЬе Пгкт 25 анино асЫв оЕ |Ье павсепт 1ас|атпаве рго|еш Пгпсдоп ак а я8па1 кег)иепсе с1еачет) |1ипи8 тгапв1осабоп оЕ йе рго1е!п !пто йе репр1амп. е г|гЬеп (3-1ас1ашаке Ь ехргегьед !тоти Ь~ВЬ-сору чес|огв, висЬ ав йове |пей !и тпо1еси!аг с!ошп8, !аг8е апюип|в оЕ йе епгугпе аге весгетег) !п|о йе шег(!иш.
5ийк!еп1 (3-1асташаве сап Ье ргог(исе6 Ьу а яп81е 1гапв(огшег) со1опу |о Ьуг)го1уге йе ап6Ь|о6с ш йе юггоиптПп8 шесПшп апг( |о сгеате а рто|ес|- ег) гоне ш гчЫсЬ ап6Ью|к-вепябче со1оп!ев сап 8гогч. ТЬ|в! еа|Ь то йе арреагапсе оЕ поп|гане(огшег(, ва|еППе со!ошев. ТЬе ргоЫеп| ь аше1югатей Ьш по| сошр!ете!у е1нпша|е|1, Ьу ияп8 сагЬеп1с!П|п гайег йап ашркППи |п ве!ес1Ые шетПа, Ъесаые сагЬепк|Пш Ь |поте геяпап| |Ьап ашрк|Пш |о Ьуг(го!ук)к Ьу |Ье Е)-1ас1ашакек оЕ 8епега кисЬ ав Рвеиг)сто|гав апт) Евс)геггс)гга. и — с — н ! О НН Н ,. 7 '1,, ".-с — с -"8 Он, . "7 '",.4,, вие ог с|еачаие Ьу !Нас1ап|аве В = Ннг гп атр|сйй И = ОООН гп са|Ьепгсгйп г!С()КЕ ! -16 С)еачаие оЕ (3-Еасваш Ап6Ьш6св Ьу (3-Еас(ашаке СЬеинса! Ьои|Ь (ЕПес! аггогчк) арреат аЬоче йе р!апе о( |Ье Е!анте; Ьоп|Ь (г(акЬет( ))иек) арреаг Ье1о|ч йе р!аие о( |Ле Е!гите.
Еп)йггпаг)оп Ране!л 1.149 Е, со~ епсойеа а !)-8а!астоаЫаае |Ьат Ьуйго1ухел |Ье сП|ассЬагЫе !астоае што |Ье шопоаассЬагЫеа 81исоае апй 8а!астоае. ТЬе ас|пй|у оЕ |Ье свау|не сав Ье аяауей ъч)тЬ а сЬгошо8ев|с шЬ|тгате гисЬ аа Х-8а! (5- Ьгопю-4-сЫого-3-)пйо!у1-8-|7-8а1астоаЫе), ъчЫсЬ ь сопчег|ей Ьу !)-8а1астояйаае нио ап |пю!иЫе Пепле Ыие соп|роипй !Ногай|а е| а1. 1964; Раме| апй )асоЬ ! 968).
ТЬЬ й)асочегу санте аЬош ъчЬев, |и 1967, )иПап Рач|еы ъчогЫп8 а| |Ье Раатеиг !пат)тите, ъчаа |гу|п8 то т)ече)ор попйеыгисйче Ыз|осЬепнса1 ага)па |Ьат ъчои!й аПоъч Ььп| то йЬтш8ш|Ь Ьетъчеев 1ас апй 1.ас со1ошеы ТЬ)л 8оа! гет)и)гей ПпсПп8 а арес|Пс сЬготпо8ешс аиЬатгате |Ьа| ъчои1|1 Ье Ьут)го1ухей Ьу )3-8а)астоа)йаае то ЫПИу со1оге|1 рго|1исыЬа| |чете ЬотЬ поп|ИЬлыЫе апй поптохк. Рач)еа ъчаа р1еааей то Ппй |Ьас рЬепу!-!)-8а!астоыйеа ргойкей а лат)аЕастогу со1ог геас|юп, Ъит Ье ъчаа 1ея 8гаППе|1 Ьу |Ьен совчетяоп |о |охте пьгорЬепо1| |Ьа| еЕЕтс)епт!у ЫПей |Ье чету сеПа Ье ъчаа тгуш8 то Ыепт)ЕЕ.
Рпйеглтапт)аЫу, Рач)ея ъчЬо Ь чо1иЫе апй Че!|Ь, !оипй тЬ)а |Пиа|юп а 1н|1е Егиатгатш8. Не ехргеяе|1 Ыа Суп|Не )пй)8- патюп |о Ме! СоЬп, а Мы|от то |Ье 1аЬога|огу, ъчЬо Еог|ипа|е1у геп|ешЬегей геасПп8 а ЬйеЕ рарег Ьу Ногте)тг апй ЬЬ соПеа8иеа йеаст)Ъ)п8 |Ье иле оЕ й)Ьа!а8епо-шйо1у! согпроипйа аа Ь)ато1о8)са! аташа Еог )1- Па!астояйаае ЕНогъчьх ет а1. 1964). Рагйеа' пехт ргоЫегп ъчаа |о реьиайе |Ье реор!е а| |Ье раатеиг |о Ьиу |опте Х-8а1. Еп тЬоае йауы Х-8а1 ъчаь пот ачайаЫе согшпегс|аПу ап|1 сиатош ау|нЬе|Ь соы $1000 рег 8гатп. АЕтег внлсЬ й)асиааюп, Х-Па! ъчаь огйегей, аувтЬеыхей, апй йеПчегей. 1п а|Ы1||оп |о Ьеш8 лепяпче апй поптохк, Х-Па! |отпей оит то Ье ап ехтген|е1у Ьеаий|и! ЬппосЬешка! геа8еп| |Па| Ьаа 8епега|ей 8ог8ео|ь р1стигеа оЕ )3-8а1астоаЫаае ехргея)оп ш Лога апй Еаипа оЕ аП |уреы 'ъ'ътЬеп )астрлеа Моной Пгы лаъч |Ье Ьв!- Па|в Ыие со1ог оЕ |п|1исей Ъастеиа! со1ошеы Ье соввпептей |Па| тЬ)а ъчаа ргооЕ тЬа| Е.
со!| ъчаа |Ье тпоы шсеП|8еп| ог8ашяв ш |Ье ъчог1й. от-СОМРЕЕМЕ!ыТАТЕО)ъ! и-Сошр1етпептатюп оссига ъчЬев тъчо шасйче Ега8шевта оЕ Е. соП !)-8а1астоаЫаае атос)ате то Еогтп а 6лпсПопа1 епхугне. Ре!етюп оЕ |Ье 5' ге86оп оЕ тЬе !ась Пепе евсой)в8 |Ье!шт|анп8 гпе|Ьюпше геыйиеа саня еа тгапа1атюп то Ье81п а| а йоъчпыгеаш тпе|Ьювше геыйие, 8епеганп8 а сагЬоху-тетю)па1 !га8шепт оЕ |Ье епхутпе (|Ье ш- ог и-ассер|ог Ега8п|еп|). Ап аш)по-тетю)па! Ета8шевт Е|Ье а-йопог Ега8шепР ь 8епега|- ей Ьу йе1ейоп ог сЬа|п-тегп|ша|ш8 шитатюпа н| |Ье ягис|ига! 8епе, А1|ЬоиПЬ веПЬег |Ье а-йовог Ега8- шеп| пот |Ье |а-ассертог Ега8шепт Ь епхуп|а|каПу аст)че, |Ье |ъчо рать оЕ тЬе епауше сап аяос|а|е |о Еотш ап асйче !)-8а!астоаЫаае Ъо|Ь ~п сеП| авй ш апшо ЕБПтпапп е| а1.
1967). Ману а йопога оЕ чагуш8 1еп8|Ьх аге 6лпсйопа1 Еог соп|р!егпешатюп. ТЬе пнпнпшп геъ)и)гешепт аеешыо Ье ап а-рертЫе сопта|шп8 геаЫиел 3-4! Е1ап81еу е| а!. 1975; ХаЬ)в ! 982; ъЧешатос)с ет а1. 1983; Непйегаоп ет а1. 1986). Апа!уял оЕ |Ье |Ьгее-|1нпепа!опа! ыплсште оЕ Е. соП 8-8а1астол!йаае ДасоЬзоп ет а1. ! 994) ргоч!йеа а гайопа1 ехр!ава|1оп Еог а-сошр1ешептатюп. 8-Па!астояйаае ь а |етгатпег сов|ролей оЕ Еоиг Ыепйса) пиночета оЕ 1023 апнпо асЫя ъчЬтсЬ аге !о1йей |п|о Етче лет)иепйа) |1отпашы ТЬе авнпо-тегннпа1 ъе8- шевт оЕ |Ье |попо|пег Е|Ье сошр!еп|ептайов ге81оп) сПгесйу раг|к|ратеа ш |Ье штегЕас)а1 аяос)атюп авюп8 шопошега Ьу Еогвнп8 сон|ась ъч||Ь йоп|а|па 1, 2, апй 3 оЕ Па оъчп тпопогпег.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
