Sambrook, Russell - Molecular cloning. Laboratory manual - v.1 (522940), страница 138
Текст из файла (страница 138)
А4ЕТНО0 1. Ргераге а ргерагагп е 1огч-гпе11!пц-ро1пг ацагоье РРСЕ йаг ич11 ргочЫе оргипшп геьо!01!оп оЕ 1Ье РХА Егацшепг ог ь1хе Егас11оп оЕ 1пгегеьс 2. 1оас! йе РХА яхе Яапс1агг!ь апг! япц1е р1иць оЕ 1Ье с!1цеьгес! цепопис РЫА гп 1апеь !оса!ее! оп Ъой ыдеь оЕ йе ргерагаг1че ь1ог.
Еоаг! йе ргерагаг1че ьагпр!е шго йе ргерагаггче ь1ог. Саггу оиг е!есггорЬогеяь аь с1еьсПЬес1 ш Ргогосо1 17 !ТАРЕ це11 ог Ргогосо1 18 (Еог СНЕР це11. Ав тапу ав 20 р!пцв сопгагпгпц 1!ХА г!!цевчег$ пчй а гевгпсиоп епауте сап Ье 1оаг!ег1 гпго а ппц1е "ртерагапче в!ог оп гЬе це! !чап Ве Ро1 ег а!.
! 990!. 3. АЕгег е1есггорЬогеяь, сиг 1Ье !апев сопга1п!пц 1Ье ь!хе яапс!агс!ь апг! япц1е цепопис РХА р1иць Егогп ЕЬе це1 апс1 ьга!и йеш ичгЬ е!ЬЫпип ЬгопгЫе ог 5"г'ВК Со!8 !ог 30 пипшеь аг гоогп Сегпрегагиге. 1Е песеььагу, г!ека10 йе це! ь1кеь гп Н О Еог 30 пипигеь. Ро пог ьгаш 1Ье ргерагаг!че 1апе. 4. Ехапипе 1Ье яа!пег! ь1кеь Ьу 13вт !1!ипипагюп апг! ша1се погсЬеь оп ЕЬе ь!кеь го гпаг1с 1Ье 1осаг1опь оЕ шаг!сеть ВапЫпц йе ров!1!оп оЕ РХА оЕ гпгегеьг.
5. 13пг!ег поппа! !1!иш1паг!оп, геавьешЫе йе це1 пчгЬ 1Ье !апев сопга!шпц 1Ье ьгашес1 ь!ге яапс!агс!ь апс! ыпц!е р!иць апг! 1осаге 1Ье арргохппаге гец!оп оЕ 1Ье ипвга1пес! Ргерагаг!че 1апе сои!а!и!пц йе РХА оЕ !пгегеьг. СагеЕи11у ехстье ЕЬгь гец1оп ич!Ь а с!еап гахог Ыаг1е, апс! ггапьЕег ЕЬе це! ь!ке го а впар-сар ро!ургору!епе гиЪе. Рог 1опц-гепп вгогаце, гЬе Егацтепг вЬоо!д Ье р1асед ш ап а!гг!цЬг гпЬе апг1 в!отед аг 4*С. Евос Ыогппц ог цоигЬегп Ыогггпц сап Ье ыеа го оЬгаш а тоге ргесие г!егегт!паг!оп оЕ гЬе !осагюп оЕ гЬе 6ацтепг оЕ шгегевг ш гЬе ргерагагае це! !чап г!е Ро! ег а1. 1990!.
6. Ее!и!11Ьгаге йе це! в!!се сопгагпшц ЕЬе ь1ге-Егасг!опасен РЫА гп 40 гп! оЕ ес1ийЪга11оп ЬиКег Еог 20 — 30 пипигеь аг гоогп гегпрегагиге. Ац1гасе 1Ье пихгиге цеп11у !ЬгоицЬоиг гЬ!ь регюс1. 5.88 СЬартег 5т бе1 Е!егтгорЬогелтл оЕР!ЧА аигЕ ри!лег!-Ете!тЕАчаготе бе! Е!егтторЬогел!т 10. 12. 15. 16. Роиг оСТ йе Ъийег апт! ше1с йе це! а!ке ас 65 — 68'С, Кепс!у алч!гПп8 йе сиЪе репойсаПу со епаиге сошр1есе ше!6п8. Кесогтс йе чо1шпе оЕ йе ше!сетс Ве! а!ке.
ЪЧЬт1е сЬе 5% ЬЕ05!ече бТб ш!п!801 !а асП! ш йе саре!1 саа608 сгау, 41ке оЕЕ епоиВЬ оЕ йе сор оЕ сЬе Ве1 со атеопипог1асе сЬе чо!шпе оЕ йе тпе1сетс Ве1 а! ке тЬас сои!а!па Рсч!А. Роиг ЕЬе ше!сет$8е1 аПсе Епсо сЬе саасш8 сгау аптс аПосч и со Ьап1еп. Сопсепсгасе сЬе ягеЕгасс!опасен РХА ш сЬе 5% Ве! Ьу арр1утп8 60 Ч Еог 12 ш!пи!ел рег пиПипесег оЕ 1отч-ше!сшц-сешрегатиге це!. рог ехагир1е, !Е сЬе !ои-гие16и8-сетирегатиге а8агоае рогиои оЕ сЬе Ве1 Ь 10 гиил 1ои8, арр!у а чо1са8е асгоя сЬе Ве! Еог 120 тсиисеа.
ЪЧЬеп е1ессгорЬогеа!а !а сошр!есе, а!ке а чету сЬтп чесс!оп Егош йе геитег оЕ сЬе Ве1 апт1 асаш К чч!1Ь етЬтйшп ЬгошЫе. Ресегпипе Ьочч Еаг тисо сЬе Ве1 йе РХА Ьаа ш!Втасегс ЕиаиаПу -2 пип!. !с Ь иирогтаит со ьса!и а а11чег Егоги йе сеисег оЕ сЬе 8е! аа аогие ыитПи8 осеига глиг!и8 есессгорЬогеыа.
Кетпоче сЬе!очч-ше!6п8 рог6оп оЕ сЬе Ве! аптс сгпп аа япаП а рогбоп ав роаа!Ые оЕ йе 5% Ве1 сопсаттбп8 ЕЬе сопсепсгасе6 РЬЕА. ЕтсиП!Ъгасе сЬе Ве! а!ке сопса!0108 сЬе Рсч!А ш 12 ш! оЕ 1х а8агаае й8еа6оп Ьийег сопсасп!п8 100 тпМ ХаС1, 30 ЕтЬЕ арегш!пе, аптЕ 70 ЕтМ арегппйпе. 1псиЪате йе Ве! а!ке !п СЬ14 ЬиЕЕег Еог 20 ш!писеа ас гоотп сетпрегашге чч!сЬ Вепс1е а8!сас!оп. Ргаш оЕЕ йе Ьийег, СгапаЕег йе Ве! а1ке Со а ш!сгоЕи8е СиЪе, апг! тпе11 СЬе РМА а!ке аС 65 — 68'С. ТгапаЕег сЬе ше1сег1 Ве1 со а ччасег ЬасЬ лес ас а сешрегасиге орйпа1 Еог йе а8агаае ргерагапоп Егесопппептсег! Ьу йе шапиЕассигегЬ ЕпсиЬасе сЬе ше1сед Ве! а1ке Еог 15 пиписея аптс сЬеп атЫ ап арргорпасе апшипс оЕ а8агаае со йВеас йе асаг6п8 чо1шпе оЕ 5% Ве!. Р!8еасюиа аге иаиаПу сагг!егС оит ас сегирегасигеа Ьетчгееи 37'С аигС 45 С аигС Еог с!гига гаи8!и8 Егот 1 Ьоиг Со очегш8ЬС.
АЕсег йВеабоп, сепспй8е сЬе сиЪе ас шах!шиш ареегс Еог 5 пиписеа !п а писгоЕи8е со ре1- !ес деЬпя апг! сгапаЕег йе ялрегпасапс со а ЕгеаЬ тпкгоЕи8е сиЪе. 5ес ир а с!гор гПа!уяа оЕ йе аирегпасапс ияп8 шетпЬгапеа лч!й а 0.05-ртп роге а!ле: а. 5рос йе аирегпасапс опсо йе сепсег оЕ йе шешЪгапе, Поа6п8 аЬтпу ят!е ир оп 100 ш1 оЕ ш!ее!топ/сгапаЕесстоп ЬиЕЕег. Оие гиеитЪгаие саи еаа!1у ялрроя 100 р! оЕ ылрегиасаис. Ь. Рта!уге Еог 1 Ьоиг ас гоотп септрегасиге. Кер!асе йе от!8!па! ЬиЕЕег ъч!1Ь 100 ш1 оЕ ЕгеаЬ тп)ес6опйгапаЕесбоп ЬиЕЕег апг1 тс!а!уяе Сот ап адтП6опа1 Ьоиг.
ТгапаЕег сЬе РЬЕА со а с1еап ииего6л8е сиЬе. Ргор йа1уяа геиючеа сЬе ацагаае еиауиле аигС сЬе гС!Веасегс сагЬоЬуглгатеа ге!галет! Егоги сЬе анатоле. АЕтег гсгор йа1уяа, сЬе соиееисгаьои оЕ сЬе РглА саи Ье еасипатегС Ьу 8е! е1еетгорЬогет!а. ТЬе РЬтА саи Ье !и1ессетс йгеес1у ог согиЬ!ией и!й а 1тросеесюи геа8еис Еог сгаиаЕессюи тисо еи!тигегС се!1а. Кеуегелсея 5.89 )ЪЕГЕ)4Е!ЪГСЕь Аа!1 С. апб Вага| Р. 1972. ТЬе Ве! е!есйгорЬогеяя оЕ РХА.
В)осЬ)т. ВгорЬуь. Асса 269| ! 92 — 200. Апапб К. 1986. Ри!ьеб Гйе)6 Ве) е!ессгорЬогеяь: А йесЬп)с)ие Гог Ггассюпабп8 1агВе РХА то)еси)еь. Тгелг)я белес 2: 278 — 283. Вапсгой 1, апд ЪиоПс С.Р. 1988. Ри)яеб Ьото8епеоиь огсЬо8опа! Яе16 Ве! е)есйгорЬогеяь )РНОСЕ). Хис1е|с АсиЬ Кеь. 16: 7405-7418.
В)гб А.Р. 1989. Тига с)атея оЕ оЬяегче6 Еге0иепсу Еог гаге-сиййег яйеь т СР6 )ь!апбь, Хис1е)с АсиЬ Иея. 17: 9485. В1г|1 А.Р., Та88агй М., Ргопипег М., МП1ег О.!., апб Мас)еоб Р. ) 985. А Яассюп оГ |Ье тате Всполье сЬас ь Яепчеб Ггот Ыап|Ь оЕ попп|е|Ьу1асе6, СР6-псЬ РХА. Сей 40: 91-99.
В|ггеп В.ЪЪг., Еа| Е., С)агЬ 5.М., Нооб 1... ап6 5!топ М.1. 1988. Орсипьес1 сопйбопя Гог ри1яе|1 Ейе)д Ве! е!ессгорЬоге6с ьерагабопь оГ РХА. Хис1е|с Асиб рея. 16: 7563 — 7582. Вгип1| С.Е апб гбтрюп 1.. ) 977. Сотрапюп оГ чапаю иЬгапо)ес яоигсеь Сог Яиогеьсепс Яейесй)огй оГ есЬ|йшп Ъгоп|ЫеРХА сотр1ехеь )п ро)уасгу)агпЫе Ве)ь. Ала1. ВгосЬет. 82: 455-462. Вопле|пег М. ап|1 ЕеЬгасЬ Н.
1989, 1ю!асюп оГ 1аг8е РХА Ега8- п|епсь Гго|п а8агоье Ве1ь ияп8 а8агаье. Тгелй белей. 5: 41. СаПайпе С.К., СоПЬ С.М., Рге|ч Н.К., апд Мой| М.К. 1991. А яи)у оЕ е!ессгорЬогеис пюЬПиу оЕ РХА !п а8агаяе апд ро!уасгу)агпЫе В.Ь. К Мо!. В)о1. 221| 981 — 1005. Сап|РЬеП ЪЧ.Р, Ъчп81еу С.ЪЪг., апб Маг8о1ь !. 1983. Е)есйгорЬогеьЬ оГ ыпаП ргосе!пя ш Ь|8Ыу сопсепсгасеб апб сгоыПп1|еб ро)уасгу1агпЫе Вгайепй Ве)ь.
Ала1, В)осЬет. 129: 31 — 36. Сапйог С.К., 6аа! А., апд 5|ппЬ С,Ь 1988. Н!8Ь-геяа)ий!ап яерагаиоп а|Ы ассигасе яхе де)ест)пасюп !п риЬес1-Ейе)й Ве! е1ессгорЬогеьЬ оЕ РХА. 3. ЕЕГесс оЕ е1есйпса! ЯеЬ1 яЬаре. ВюсЬетглгу 27| 9216 — 9221. Саг1е 6.Е апд О1ьоп М Ъг. 1984. 5ерагасюп оГ сЬготаяота! РХА то1еси1ея Кот уеаяс Ьу огсЬо8опа1-Яе!йа)сегпаиоп Ве) е1есьорЬогеяя Хис)е|с Апй Кея. 12: 5647 — 5664. ... 1985. Ап е1ессгорЬогебс 1сагуосуре Гог уса|с. Ргос, №г!. Айаг).
5с). 82: 3756-3760. Саг)е 6.Г., Ргап)с М., апб О!юп МРК 1986. Е)ессгорЬогес)с яерагабопь оГ 1а|8е РХА то)еси)еь Ьу репойс шчегяоп оГ йе е1есспс Яе1й 5с|елсе 232: 65 — 68. СЫап' М. ап6 К|ВЬес6 Р.6. 1995. Хе|я суре| оЕ яерагасюп тайп'- сеь Еог е)ессгорЬогейь. Е)есггорЬогеыя 16: 1815 — 1829. СЬо| Т.К., НоПепЬасЬ РЪЪг., Реагюп В.Е., ) геба К.М., Ъие|ЫеП 6.Х., КигаЬага С.6., ЪйгооЯЬоиье 6.5., Кау К.М., ап6 1.опп8 !.Е 1993. Тгап|8епк лисе сопйа|п)п8 а Ьшпап Ьеачу сЬа|п иптипо8)оЬиПп депе Яа8гпепс с)опес1 |и а уеаьс агпЯс|а! сЬгопююп|е. №Г.
белей 4: !!7-123. СЬгаспЬасЬ А. ап|1 КоЯЬагб Р. )972. Ро1угпепгабоп оГ ро)уасгу)атЫе Ве!ь: ЕГЯс|епсу апб гергобис|Ьс Псу ая а Гипсбоп оГ саиПуы сопсепсгасюпь. 5ер. 5с|'. 7| 663-703. СЬи 6. 1990а. Ри1ьейЯеЫ Ве) е!ессгорЬогеяЬ: ТЬеогу апб ргасс|се. Мейо|Ь 1| 129 — 142. — . 1990Ь. Аррагасия Еог сап)лиг-с!агпре6 Ьопю8епеоия е1есйпс Яе)|Ь.
Ме|Ьой 1: 212 — 214. СЬи 6., ЪгоПга)Ь Р., а|Ы Раль К.ЪЪ|. 1986. 5ерагасюп оГ !агВе РХА пю1еси1еь Ьу соййсоиг-с)атреб Ьоп|о8епеоия е)есспс ЯеЫь. 5с)сисе 234: ) 582 — 1585. С)аг1| 5.М., 1.а| Е., В)пеп В ЪЧ., апб Нооб 1.. 1988. А по| с) |пягитепс Гог ьерагабп8 !аг8е РХА пю1еси1ея и|)сЬ ри!ье6 ЬоспоВепеоия е)есйпс Его)йя. 56е осе 241: ) 203 — ) 205. Соо)с Р.К. 1984. А Вепега1 те)Ьод Гог ргерапп8 )псасй ппс!еаг РХА. ЕМВО Е. 3| 1837 — 1 842. Ргеьеп 6., ВеПагб М., 5аяопе-Согя Р., апд СЬагпЬоп Р. 198!. А геПаЫе гпесЬо|1 Гог |Ье гесочегу оЕ РХА Ггарпепь Ггоп| а8агоье апб асгу1агпЫе Ве)я, Ала1.
ВюсЬет. 112: 295 — 298. Рппапас К., РесгоЫс М., 6Пяп |2, апб Сг)счел)а)соч К. !986. А са1си)асюп оЕ Егарпепй 1епрЬь оЬса|паЫе !гоп| Ьшпап РХА ълй 78 геьсг)ссюп епхутея: Ап аЫ Гог с!отп8 апс! таррт8. Хис1е)с Асиб йеь. 14: 4691-4692. Ейпопбьап 5.Р. апб Сгау Р.М. 1984. Апа)у|Ь оГ йе е)ессгорЬогебс ргорегбеь оГ ЯоиЫе-ясгапбеб РХА апб КХА )п а8агояе Ве1| ай а Яп!се чо1саВе Вгайепс. Вюро!утеп 23| 2725-2742.
Рапрпап ЪЪ|.Ь 1978. 5ерагасюп оГ чегу 1аг8е РХА гпо)еси1еь Ьу Ве! е!ессгорЬогеяь, №с1е)с АсиЬ Кея. 5: 653 — 665. Рача!ого !., ТгеЬтап К., ап6 Катеп К. 1980. Тгапьспрбоп |паря оГ ро!уота Ыгы-ьрес|Яс КХА: Апа1уяь Ьу пчо-йтепяопа! пис!саяе 51 Ве) гпарр|п8, Мейой Елхуто1. 65: 718 — 749. Регрьоп ЪЧ.!., ВгаипьсЬйче)8ег К.1., ВгаипьсЬсче|8ег ЪЧ.К., 5пи|Ь !.К., МсСогпис1| !.!., Ъчаяпапп С.С., !агчь Х.Р., ВеП Р.Н., ап6 Сааб Х.Е, 1980.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
