Диссертация (1335845), страница 19

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 19)

45. График, демонстрирующий выраженное увеличение процента нейронов ВЯДБ сядерной окраской ЭР у пациентов с БоАл (p = 0.006).ЭРИммуноцитохимическое окрашивание ЭР выявлено в цитоплазме иядрах нейронов с явным преобладанием цитоплазматической локализациикак у контрольных, так и у случаев с БоАл.ЭР в контрольной группеПо данным однофакторного анализа ANOVA и теста Kruskal-Wallisстатистически достоверных различий процентного содержания нейронов сЭР среди четырёх контрольных групп с разделением по возрасту 50 летобнаружено не было (Таблица 22). Изменения этого показателя при старенииу мужчин и женщин отсутствовали.

После разделения по полу у мужчиннаблюдаласьположительнаязависимостьпроцентанейроновсцитоплазматическими ЭР от генотипа APOE (r = 0.949, p = 0.051). Уженщин, подобная положительная корреляция генотипа APOE отмечена длянейронов как с цитоплазматическими, так и ядерными ЭР (2 < 3 < 4; r =1.000, p = 0.0001).131ЭР у пациентов с БоАлСтатистически достоверных отличий процента нейронов ВЯДБ с ЭРмежду пациентами с БоАл и контрольными случаями не выявлено (Таблица23). При разделении контрольных случаев и пациентов с БоАл по возрасту 70лет было обнаружено значительное увеличение с возрастом процентанейронов с ядерными ЭР (F(1;21) = 6.737, p = 0.018), тогда как пропорциянейронов с цитоплазматическими ЭР не изменялась.

Более высокоесодержание нейронов ВЯДБ с ядерными ЭР определено у пожилыхпациентов старше 70 лет по сравнению со случаями моложе 70, но старше 50лет (p = 0.031 согласно тесту Манн-Уитни) (Рис. 46). Процент нейронов сядерными ЭР увеличивался с возрастом у пациентов с БоАл (r = 0.802, p =0.009). После разделения по полу указанная корреляция сохранялась только упациентов с БоАл мужского пола (r = 0.975, p = 0.025), и отсутствовала уженщин с БоАл. Интересно, что пропорция нейронов с цитоплазматическимиЭР также увеличивалась с возрастом у мужчин с БоАл (r = 0.957, p = 0.043),и не изменялась у женщин с БоАл.Рис.

46. Различия в процентном содержании нейронов ВЯДБ с ядерными ЭР у людей ввозрасте 50-70 лет и старше 70 лет (p = 0.018). Так как различий между пациентами сБоАл и контрольными случаями установлено не было. Учитывались все пожилые случаи,отмеченные в таблице.132Туберомамиллярное ядроЭстрогеновые рецепторы  и Иммуноцитохимическая экспрессия ЭР и ЭР изучалась у пациентовс БоАл в сравнении с контрольными случаями (Таблица 13).

Половыеразличия для этих рецепторов показаны у молодых людей (Kruijver et al.,2002; Kruijver et al., 2003). Данные, касающиеся изменений при старении,отсутствуют. Мы провели дополнительное исследование ЭР и ЭР умолодых и пожилых контрольных случаев (Таблица 24) при одновременномокрашивании всех случаев, чтобы убедиться, что старение неодинаковопоражает экспрессию эстрогеновых рецепторов в ТМЯ мужчин и женщин.Половых различий в интенсивности окраски ядерных и цитоплазматическихЭР и ЭР в ТМЯ установлено не было.

Цитоплазматическая экспрессияЭР и ЭР снижалась при старении у мужчин и не изменялась с возрастом уженщин. Ни промежуток между моментом смерти и аутопсией мозга, нидлительность фиксации не влияли на полученные результатыприиспользовании теста линейной регрессии.ЭР в нейронах ТМЯ при БоАлЭР выявлен в ядрах и цитоплазме нейронов ТМЯ, в глиальных клетках инезначительном количестве нервных волокон (Рис. 47). Наблюдаласьтенденция к увеличению пропорции нейронов ТМЯ с цитоплазматическимиЭР в контрольной по сравнению с группой с БоАл (F[1;30] = 3.898; p =0.058).

Статистически достоверных различий в процентном содержаниинейронов ТМЯ с ядерными ЭР между контрольными и случаями с БоАлустановлено не было (F[1;30] = 1.628; p = 0.213) (Таблица 25).Независимо от БоАл, у мужчин насчитывалось больше нейронов ТМЯ сядерными ЭР (p = 0.050). Однако, половых различий в экспрессии ядерныхи цитоплазматических ЭР в контрольной и группе с БоАл не обнаружено.

Умужчин с БоАл наблюдалась положительная корреляция процента нейронов133с цитоплазматическими ЭР и генотипом APOE 4 (r = 0.775; p = 0.041). Умужчин контрольной группы с генотипом APOE 4 положительнокоррелировала пропорция нейронов ТМЯ с ядерными ЭР (r = 0.885; p =0.019).Размеры перикарионов нейронов ТМЯ у пожилых контрольныхслучаев отрицательно коррелировали с пропорцией нейронов, содержащихЭР в цитоплазме (r = - 0.547; p = 0.028).

После разделения на мужчин иженщин эта взаимосвязь наблюдалась у женщин (r = - 0.733; p = 0.039) иотсутствовала у мужчин (r = 0.018; p = 0.967).ЭР в нейронах ТМЯ при БоАлЭР главным образом локализуется в цитоплазме нейронов ТМЯ (Рис.34), хотя было отмечено и слабое ядерное окрашивание. Дополнительноокрашивание ЭР было обнаружено в глиальных клетках, многочисленныхнервных волокнах и многочисленных кровеносных сосудах (Рис. 48).Средний процент нейронов ТМЯ с цитоплазматическими (F[1;30] = 4.514; p =0.043), но не с ядерными (F[1;30] = 1.904; p = 0.179) ЭР был выше упациентов с БоАл по сравнению с контрольными случаями (Таблица 25).Половых различий в содержании ядерных и цитоплазматических ЭРотмечено не было.

У мужчин в контрольной группе (r = 0.924; p = 0.025) игруппе с БоАл (r = 0.763; p = 0.046), процент нейронов ТМЯ с ядерными ЭРположительно коррелировал с генотипом APOE (2 < 3 < 4).Таблица 24Интенсивность окраски ЭР и ЭР в туберомамиллярном ядре при болезниАльцгеймера в сравнении с контрольными случаямиВозрастПол: в ядре1) 562) 583) 584) 605) 616) 637) 638) 649) 6910) 6911) 7212) 7413) 7614) 8015) 8016) 94мужженмужженженмужмужмужженженмужмужженженмужжен++++++++++++++++++++++++++++++-1) 542) 573) 584) 605) 636) 637) 638) 639) 6910) 7211) 7212) 7213) 7814) 7815) 83женмужмужженженженмужмужженженмужмужмужженжен+++++++++++++++++++++++++++++++++в цитоплазме: в ядре/в цитоплазмеКонтрольные случаи++-/++++-/+++-/+++-/+++- /+++-/+++-/++- /+++-/++- /++- /+++ /+++++-/+++ /++++-/+++ /+Случаи с болезнью Альцгеймера++-/+++ /++++ /++++ /++++ /++++ /+++++ /++++ /+++++ /++++-/+++ /++++-/++++-/+++-/+++-/+135Таблица 25Средний процент нейронов, содержащих ЭР и , в туберомамиллярном ядре приболезни Альцгеймера в сравнении с контрольными случаямиКонтрольные случаиЧисло наблюдений 16/15БоАл14/15ЭР %:в ядрев цитоплазмеотсутствует31.04.795.11.14.91.138.93.791.51.58.51.52.90.679.53.2 120.53.2 24.20.687.51.9 112.51.9 2ЭР %:в ядрев цитоплазмеотсутствуетЭР - эстрогеновый рецептор ; ЭР- эстрогеновый рецептор ;ТМЯ- туберомамиллярное ядро;16/15 и 14/15 - 16 контрольных случаев и 14 случаев с БоАл при окраске на ЭРи 15 контрольных и 15 случаев с БоАл при окраске ЭР1,2p = 0.043136Рис.

47. Иммуноцитохимическое окрашивание ЭР в ТМЯ контрольных (A, C) и случаевс БоАл (B, D). Значимые изменения окраски ЭР в ТМЯ при БоАл отсутствуют. Масштаб= 25 m.137Рис. 48. Иммуноцитохимическое окрашивание ЭР в ТМЯ контрольных (A, C) и случаев сБоАл (B, D). Интенсивность иммуноцитохимической окраски цитоплазматических ЭРвыше у пациентов с БоАл, чем у контрольных случаев.

Масштаб = 25 m.138Медиальное мамиллярное ядроРазличия в процентном содержании нейронов ММЯ с ЭР и ЭРоценивались у пожилых контрольных и случаев с БоАл (Таблица 26).Экспрессия эстрогеновых рецепторов в группе молодых контрольныхслучаев была изучена ранее Kruijver и соавт. и в настоящей работе приодновременном окрашивании срезов с ММЯ молодых и пожилых случаев.Результаты этого эксперимента оценивались по шкале интенсивностиокраски ЭР (Таблица 26). У молодых женщин в ММЯ выявлена болеевысокая интенсивность окрашивания ядерных ЭР по сравнению смолодыми мужчинами и пожилыми женщинами.

У пожилых контрольныхслучаев мужского и женского пола слабое окрашивание ЭР локализовалосьв цитоплазме и практически отсутствовало в ядрах нейронов. Таким образом,после менопаузы у женщин происходит исчезновение ЭР из ядер нейроновММЯ (Таблица 27). Выраженных половых и возрастных различий винтенсивности экспрессии ЭР отмечено не было. По результатам тесталинейной регрессии ни промежуток между моментом смерти и взятиемматериала, ни длительность фиксации не влияли на полученные данные.ЭРПри иммуноцитохимическом исследовании на клеточном уровне ЭРвыявлен как в ядрах, так и в цитоплазме (Рис. 49). В нейронах ММЯ ЭРнаходилсяглавнымобразомвядрах.Приэтом,ядерноеицитоплазматическое окрашивание ЭР не ограничивалось локализацией вперикарионах нейронов и было обнаружено в глиальных клетках и нервныхволокнах.

Интенсивность окраски и количество нейронов ММЯ с ЭР в ядреоказались значительно выше в группе с БоАл по сравнению с контрольнымислучаями.Таблица 26Клинико-патологическая информация и интенсивность иммуноцитохимического окрашивания ЭР и ЭР в ММЯ№ Возраст Пол В м (г) Пи ФAPOE : я+ ц+: я+ ц+СБШР Причина смертиКонтрольные случаи1)56М1357 5.00 3533+++++0опухоль носа, лапаротомия2)58Ж1221 6.45 28++++ ++0послеоперационная кома3)58М1408 <17.00 96++++0разрыв аорты, гипертензия4)60Ж8.00 87+++0карцинома яичников5)61Ж1296 17.45 119++++0острая сердечная недостаточность6)63М1368 1.40 65+++0пневмония, желудочковая тахикардия7)64М1448 8.09 3022+++++0лейкемия, тромбоцитопения,субарахноидальное кровотечение8)69Ж1074 8.30 3133+++++1инфаркт миокарда, лёгочная эмболия,9)69Ж1264 6.15 3133+++++1кардиогенный шок10)80М1380 6.56 3333+++++0дыхательная недостаточность, эмфизема лёгких11)76Ж1226 7.35 270+++++0аденокарцинома яичников с метастазами, отёклёгкихСлучаи с болезнью Альцгеймера1)54Ж1055 3.15 2833++++++6болезнь Альцгеймера, кахексия2)57М1690 5.00 4543+++ +++67болезнь Альцгеймера, пневмония, сепсис3)58М1350 4.45 3243+++++67болезнь Альцгеймера, кахексия, дыхательнаянедостаточность4)61М1180 6.05 3033++++66болезнь Альцгеймера, лихорадка5)63Ж934 4.55 3833+++++65болезнь Альцгеймера, инфаркт миокарда6)63Ж980 3.20 3233+++ +++67болезнь Альцгеймера, кахексия7)63М1350 5.00 3033++++++67болезнь Альцгеймера, пневмония8)69Ж1150 4.00 3333+++ ++++66болезнь Альцгеймера, пневмония9)72Ж958 4.00 69nr+++++5болезнь Альцгеймера, бронхопневмония10)78М1240 3.15 3133+++++67болезнь Альцгеймера11)78Ж959 4.25 2843+++ +++57болезнь Альцгеймера, кахексияСокращения: М - мужчины, Ж – женщины, В м (г) – вес мозга в граммах, Пи – посмертный интервал (в часах:минутах), Ф – длительность фиксации (в днях), АPOE –аполипопротеиновый генотип, я+ - эстрогеновые рецепторы в ядре, ц+ - эстрогеновые рецепторы в цитоплазме, СБ – стадия нейропатологических изменений по Браак,ШР – тяжесть заболевания по шкале Рейсберга, ЭР - эстрогеновый рецептор , ЭР - эстрогеновый рецептор .140Таблица 27Изменения размеров аппарата Гольджи и перикарионов нейронов, а также интенсивности окраскиэстрогеновых рецепторов  и  в медиальном мамиллярном ядре при старении и болезни АльцгеймераАГППНЭР яЭР цЭР яЭР  цУ мужчин при старении= (0.442)= (0.220)= (0.954)= (0.342)= (0.207)= (0.181)У женщин при старении (0.032) (0.025)= (0.586)= (0.514) (0.031)= (0.279)При БоАл= (0.105)= (0.852) (0.002)= (0.103)= (0.340)= (0.657)Знак равенства указывает на отсутствие достоверных изменений, в скобках приведены значения Р.ППН – площадь перикарионов нейронов, ЭР я – ядерные эстрогеновые рецепторы ,ЭР ц – цитоплазматические эстрогеновые рецепторы , ЭР я - ядерные эстрогеновые рецепторы ,ЭР  ц - цитоплазматические эстрогеновые рецепторы .Количество нейронов ММЯ с ядерными ЭР было значительно выше упациентов с БоАл по сравнению с контрольными случаями (F[1;22] = 12.415;p = 0.002) (Таблица 28).

Характеристики

Список файлов диссертации