Диссертация (1335845), страница 14
Текст из файла (страница 14)
Подобное разделение на 4 группы (пациенты с БоАл 70 лет,пациенты с БоАл > 70 лет, контрольные случаи 70 лет, контрольные случаи> 70 лет) по данным теста Kruskal-Wallis справедливо (p = 0.032).Рис. 8. Иммуноцитохимическое окрашивание аппарата Гольджи (АГ) в вертикальном ядредиагонального поля Брока (ВЯДБ) пациентов с БоАл 70 лет (A) и > 70 лет (B) и уконтрольных случаев того же возраста (C, D). Примечательно, что у пациентов с БоАл 70 лет (A) как интенсивность, так и размер АГ больше, чем у контрольных случаев тогоже возраста (C), тогда как после 70 лет различий между контрольными (D) и случаями сБоАл (B) не установлено. Масштаб = 25 мкм.В этом случае площадь АГ достоверно больше у пациентов с БоАл, чему контрольных случаев в возрасте до 70 лет (p = 0.010 по данным ANOVA, p= 0.030 по результатам теста Манн-Уитни и p = 0.037 согласно тестуБонферрони), а у контрольных случаев старше 70 лет больше, чем у людей от56 до 70 лет (p = 0.005 по данным ANOVA и p = 0.009 по результатам тестаМанн-Уитни) (Рис.
9). Следует отметить отсутствие различий размеров АГ иперикарионов нейронов у пациентов с БоАл до и после 70 лет, и междуконтрольными и случаями с БоАл после 70 лет (Рис. 8 и 9). Половых81различий указанных параметров в группе с БоАл выявлено не было. Влияниягенотипа APOE на метаболическую активность нейронов ВЯДБ у пациентовс БоАл не установлено.Рис. 9. График, отражающий различия размеров аппарата Гольджи между пациентами сБоАл и контрольными случаями (К) при разделении по возрасту 70 лет. Отмеченоувеличение метаболической активности нейронов ВЯДБ при старении и БоАл. РазмерыАГ значительно больше у пациентов с БоАл, чем у контрольных случаев в возрасте 50-70лет (p = 0.010), а у контрольных случаев в возрасте 70-100 лет больше, чем у контрольныхслучаев 50-70 лет (p = 0.005).Базальное ядро Мейнерта.Цитоархитектонические показатели метаболической активности нейроновБЯМПри старении площади перикарионов и ядер нейронов БЯМувеличивались во 2-ой возрастной группе (средний возраст) и оставались натом же уровне в 3-ей (пожилые) и 4-ой (старческий возраст) группах (Рис.
10и Рис. 11). Выявлено достоверное увеличение площади ядер нейронов в 3-ейи 4-ой группах по сравнению с 1-ой (молодые) (р=0.018 и р=0.049соответственно). Площадь перикарионов нейронов также была выше в 3-ей и4-ой группах по сравнению с 1-ой, при этом статистически достоверной82оказалась разница между 4-ой и 1-ой группами (р=0.033). Во всей изученнойгруппе наблюдалась положительная корреляция размеров перикарионовнейронов (r=0.362) и в меньшей степени размеров их ядер (r=0.298) свозрастом,чтонашлоотражениевнекоторомсниженииядерно-цитоплазматического отношения (ЯЦО) (r=-0.321).
Однако, статистическидостоверными эти корреляционные зависимости считать нельзя. Следуетотметить, что достоверных различий ЯЦО между возрастными группамиВОЗ обнаружено не было (Рис. 12). Увеличение размеров аппарата Гольджи(АГ) наблюдалось в 3-ей группе пожилых людей по сравнению с 1-ой и 2-ойвозрастными группами (р = 0.009, р = 0.029 соответственно) (Рис. 13). Вцелом, полученные данные свидетельствуют об увеличении метаболическойактивности нейронов БЯМ в процессе старения, проявляющейся у лицсреднего возраста, совпадающего с началом менопаузы у женщин иандропаузы и мужчин.Уменьшение размеров АГ в нейронах БЯМ при болезни Альцгеймераплощадь ядербыло установлено ранее в работах А. Salehi (1994).1601401201008060944020012030405060возраст701141121132348090100площадь перикарионов83800700600500400300482482509234392200100102030405060возраст708090100Рис.
10 и Рис. 11. Площадь (в квадратных микрометрах) ядер и перикарионов нейронов вбазальном ядре Мейнерта (БЯМ). Индивидуальные значения для каждого случаяотмечены ромбами. Линии показывают направление и выраженность корреляционныхзависимостей изученных морфометрических показателей с возрастом. Встроенныестолбчатые диаграммы демонстрируют средние значения (указаны над каждым столбцом)морфометрических показателей нейронов в четырёх возрастных группах ВОЗ (1 –молодые, 25-44 лет; 2 – средний возраст, 45-59 лет; 3 – пожилые, 60-74 года; 4 старческий возраст, 75-89 лет).0,2550,250,2490,2450,240,2360,2360,2350,230,2220,2250,220,2150,210,2051234Рис.
12. Ядерно-цитоплазматическое отношение нейронов в базальном ядре Мейнерта(БЯМ) человека в четырёх возрастных группах ВОЗ (1 – молодые, 25-44 лет; 2 – среднийвозраст, 45-59 лет; 3 – пожилые, 60-74 года; 4 - старческий возраст, 75-89 лет).Площадь АГ, мкм28425010411612175125342001501005002030405060708090возрастРис. 13. График, демонстрирующий площадь АГ в нейронах базального ядра Мейнерта(БЯМ). Индивидуальные показатели отмечены чёрными ромбами. Средние значения этогопараметра в четырёх возрастных группах показаны во встроенной столбчатой диаграмме:1 – молодые, 25-44г., 2 – средний возраст, 45-59 лет, 3 – пожилые, 60-74г., 4 – старческийвозраст, 75-80 лет).Туберомамиллярное ядроПоловые и возрастные особенности цитоархитектонических показателейТМЯГранулярное окрашивание АГ локализовалось вокруг ядер нейронов,типичное для этой органеллы (Рис. 14).
Следует отметить, что АГ и размерыперикарионов измерялись у молодых и пожилых контрольных случаев(Таблица 7). При БоАл эти параметры определялись в работе Salehi и соавт.(1995). Собственное окрашивание АГ у пациентов с БоАл (n=10) иконтрольных случаев (n=10) подтвердило эти результаты. Ни промежутокмежду моментом смерти и аутопсией мозга, ни длительность фиксации невлияли на полученные результаты при использовании теста линейнойрегрессии.В контрольной группе размеры перикарионов нейронов ТМЯ (r = 0.374; p= 0.046) увеличивались с возрастом.
Возрастных изменений АГ установленоне было (Рис. 15). После разделения на мужчин и женщин эта корреляция85наблюдалась у мужчин (r = 0.677; p = 0.006) и отсутствовала у женщин (r =0.167; p = 0.569).Рис. 14. Иммуноцитохимическое окрашивание аппарата Гольджи в ТМЯ молодогомужчины (A), молодой женщины (B), пожилого мужчины (C) и пожилой женщины (D).Масштаб = 25m. Нейроны ТМЯ у молодой женщины (B) крупнее, чем у молодогомужчины (A), а у пожилого мужчины больше, чем у молодого мужчины.86Более того, размеры перикарионов (но не АГ) нейронов ТМЯ у пожилыхмужчин (> 60 лет) значительно превышали таковые у молодых мужчин ( 60лет) (F[1;15] = 27.415; p = 0.0001). У молодых женщин этот параметр былбольше, чем у молодых мужчин (F[2;23] = 6.736; p =0.006). Размерыперикарионов нейронов ТМЯ у молодых и пожилых женщин не отличались(F[1;14] = 0.082; p = 0.779).
Различий между пожилыми мужчинами ипожилыми женщинами установлено не было (F[2;21] = 0.612; p = 0.553)(Таблица 7, Рис. 14).Таблица 7Площадь аппарата Гольджи и перикарионов нейронов в туберомамиллярном ядреконтрольных случаевВозраст 60Возраст > 60ПолМужЖенМужЖенКоличество случаев5756Площадь АГ,мкм266.74.563.74.859.27.1Площадь перикарионов, мкм2242.25.5 1,2 272.814.6 1 297.99.5 2 280.825.9p = 0.006; 2 p = 0.0001Площадь АГ, мкм 2162.04.51008060406763646212342002030405060708090возрастРис. 15. График, демонстрирующий площадь АГ в нейронах туберомамиллярного ядра(ТМЯ). Индивидуальные показатели отмечены чёрными ромбами.
Средние значения этогопараметра в четырёх возрастных группах показаны во встроенной столбчатой диаграмме:1 – молодые, 25-44г., 2 – средний возраст, 45-59 лет, 3 – пожилые, 60-74г., 4 – старческийвозраст, 75-80 лет). Достоверных изменений АГ в нейронах ТМЯ в указанных группах невыявлено.87При разделении контрольных случаев на 4 группы согласноклассификации ВОЗ площадь ядер нейронов была достоверно выше во 2-ой(средний возраст) и 3-ей (пожилые) группах по сравнению с 1-ой (р=0.028 ир=0.013). Площадь перикарионов постепенно увеличивалась и достигаламаксимума в 3-ей возрастной группе по сравнению с 1-ой (молодые) и 2-ой(средний возраст) (р=0.016 и р=0.025 соответственно).140площадь ядер1201008060959512370808386402040203040506090100возрастплощадьперикарионов600500400300349356124143773420010002030405060708090100возрастРис.
16 и Рис. 17. Площадь (в квадратных микрометрах) ядер и перикарионов нейронов втуберомамиллярном ядре (ТМЯ). Индивидуальные значения для каждого случаяотмечены ромбами. Линии показывают направление и выраженность корреляционныхзависимостей изученных морфометрических показателей с возрастом. Встроенныестолбчатые диаграммы демонстрируют средние значения (указаны над каждым столбцом)морфометрических показателей нейронов в четырёх возрастных группах ВОЗ (1 –молодые, 25-44 лет; 2 – средний возраст, 45-59 лет; 3 – пожилые, 60-74 года; 4 старческий возраст, 75-89 лет).88В 4-ой группе (старческий возраст) наблюдалось некоторое снижениеразмеров ядер и перикарионов нейронов по сравнению с 3-ей группой, но обапоказателя всё равно оставались выше, чем в 1-ой группе (Рис.
16 и Рис. 17).Вследствие неравномерных изменений размеров ядер и перикарионов, ЯЦОпри старении несколько снижалось (r=-0.227). Самое высокое значение ЯЦОвыявлено во 2-ой возрастной группе (р=0.022 по сравнению с 1-ой, р=0.006по сравнению с 3-ей и р=0.003 по сравнению с 4-ой) (Рис. 18). Такимобразом, в ТМЯ, подобно БЯМ, происходит возрастное увеличениеметаболической активности нейронов, максимальное в 3-ей возрастнойгруппе пожилых людей.0,28ТМЯ0,2690,270,260,250,2410,240,2320,230,2290,220,210,21234Рис. 18. Ядерно-цитоплазматическое отношение нейронов в туберомамиллярном ядре(ТМЯ) человека в четырёх возрастных группах ВОЗ (1 – молодые, 25-44 лет; 2 – среднийвозраст, 45-59 лет; 3 – пожилые, 60-74 года; 4 - старческий возраст, 75-89 лет).89Вентромедиальное ядроКлеточный состав ВМЯ в срезах, окрашенных тионином и антителами,распознающимиаппаратГольджи(АГ),оказалсянегомогенным.Наблюдались круглые, овальные, веретеновидные и мультиполярныенейроны различных размеров.