Диссертация (1335845), страница 15
Текст из файла (страница 15)
В латеральной части ВМЯ они были крупнее,чем в медиальной. Иммуноцитохимическое окрашивание АГ выглядело ввиде гранул. Интенсивность окраски АГ и размеры АГ оказались больше умужчин старше 50 лет по сравнению с мужчинами в возрасте до 50 лет.Более интенсивное иммуномечение АГ отмечено и у молодых женщин посравнению с молодыми мужчинами (Рис. 19).С помощью двухфакторного теста ANOVA был показан достоверныйэффект взаимодействия пола и возраста для размеров АГ в нейронах ВМЯ(основные эффекты (ME): F(2;28) = 0.158 и 0.214, p = 0.695 и 0.648; эффектвзаимодействия (IE): F(1;28) = 5.129, p = 0.032), для пропорциональногосоотношения АГ к площади сечения нейронов (ME: F(2;28) = 0.013 и 1.862, p= 0.910 и 0.185; IE: F(1;28) = 4.183, p = 0.052).
Согласно однофакторномуANOVA соотношение площади АГ к площади перикарионов былозначительно больше у молодых женщин, чем у молодых мужчин (ME:F(1;15) = 7.648, p = 0.005), а у пожилых мужчин превышало таковое умолодых мужчин (ME: F(1;12) = 7.588, p = 0.019). Достоверных различийразмеров перикарионов нейронов ВМЯ среди 4-х групп обнаружено не было(Таблица 8). Следует отметить, что в указанных четырёх группах различий вдлительности промежутка между моментом смерти и взятием материала (p =0.334) и длительности фиксации (p = 0.089) установлено не было.90Таблица 8АГ и размер перикарионов, соотношение АГ/площадь перикарионовв нейронах ВМЯ человека в различных возрастных группах≤ 50 лет> 50 летмужчиныженщинымужчиныженщиныЧисло случаев55811S АГ (мкм2)9.11.712.50.811.41.19.21.0S п (мкм2)151.921.4142.54.6147.57.6134.57.4SАГ/Sп (%)5.840.4 1,28.80.617.70.527.10.9S АГ – площадь аппарата Гольджи в нейроне,S п – площадь сечения перикарионов нейроновSАГ/Sп – соотношение площади аппарата Гольджи к площади сечения перикариона1p = 0.005; 2 p = 0.019Анализ линейной регрессии продемонстрировал, что при учёте всехслучаев размеры АГ достоверно коррелировали с размерами перикарионовнейронов (r = 0.379, p = 0.043) и пропорциональным соотношением АГ кплощади сечения нейронов (r = 0.808, p = 0.0001).
При этом корреляцийуказанных параметров с возрастом (r = 0.047, p = 0.809) и полом (r = 0.048, p= 0.805) отмечено не было. После разделения на мужчин и женщин,достоверная корреляция соотношения АГ/площадь перикариона с возрастомбыла обнаружена у мужчин (r = 0.568, p = 0.043) и отсутствовала у женщин (r= 0.086, p = 0.752) (Рис.
20). Ни длительность промежутка между моментомсмерти и взятием материала (r = 0.274, p = 0.150), ни длительность фиксации(r = 0.011, p = 0.957) не оказывали влияния на размер АГ.91Рис. 19. Иммуноцитохимическое окрашивание АГ в ВМЯ человека. Интенсивностьиммуноцитохимического окрашивания АГ отличается у молодого мужчины (A), молодойженщины (B), пожилого мужчины (C) и мужчины 31 года с феминизирующей карциномойнадпочечников (D).
Масштаб соответствует 42мкм.Рис. 20. График, демонстрирующий возрастные изменения соотношения АГ/площадьперикарионов у мужчин и женщин92Медиальное мамиллярное ядроЦитоархитектонические показатели метаболической активности нейроновММЯВ нейронах и глиальных клетках в ММЯ наблюдалось отчётливоеоколоядерное гранулярное окрашивание АГ (Рис. 21). Размеры АГ иперикарионов нейронов сравнивались в двух различных экспериментальныхгруппах: 1) молодых и пожилых контрольных случаев и 2) пожилыхконтрольных случаев и пациентов с БоАл (Таблици 9 и 10).Согласно непараметрическому тесту Kruskall-Wallis при разделенииконтрольных случаев (Таблица 9) на четыре группы по возрасту (50 лет) иполу (молодые мужчины, молодые женщины (≤ 50 лет), пожилые мужчины,пожилые женщины (> 50 лет) наблюдалась тенденция статистическойдостоверности для площади АГ (F[3;21] = 2.998; p = 0.060) и перикарионовнейронов (F[3;21] = 2.476; p = 0.096).
Площадь АГ (p = 0.032) и размерыперикарионов нейронов (p = 0.025) оказались больше у женщин послеменопаузы по сравнению с молодыми женщинами (Таблица 9). Достоверныхразличий размеров АГ (F[1;22] = 2.882; p = 0.105) и площади перикарионов(F[1;22] = 0.036; p = 0.852) между пациентами с БоАл и пожилымиконтрольными случаями установлено не было (Таблица 10). Половыеотличия по этим морфометрическим параметрам в указанных группахотсутствовали.При использовании теста линейной регрессиипоказано, что какплощадь АГ (r = 0.465; p = 0.034), так и размеры перикарионов нейронов (r =0.593; p = 0.005) достоверно увеличивались с возрастом в контрольнойгруппе (Таблицы 9 и 10).
После разделения на мужчин и женщин этоувеличение оказалось типичным для женщин (для площади перикарионов (r= 0.773; p = 0.005), для АГ(r = 562; p = 0.072)) и практически отсутствовало вгруппе мужчин (для площади перикарионов (r = 0.426; p = 0.220), дляразмеров АГ (r = 0.414, p = 0.235)). В группе с БоАл размеры нейроновположительно коррелировали с генотипом APOE ε4 (r = 0.665; p = 0.036).93Рис. 21.
Иммуноцитохимическое окрашивание аппарата Гольджи (АГ) в медиальноммамиллярном ядре у молодой женщины (A), молодого мужчины (B), пожилого мужчины(C), мужчины с БоАл (D), пожилой женщины (E), женщины с БоАл (F). Размерыперикарионов нейронов и АГ больше у пожилых женщин (E) по сравнению с молодымиженщинами (A). Значимых различий размеров АГ и перикарионов нейронов междумолодыми мужчинами (B) и молодыми женщинами (A), а также между контрольными ислучаями с БоАл в ММЯ не выявлено. Bar = 25мкм.94У пожилых контрольных случаев отмечена тенденция к положительнойвзаимосвязи между АГ и генотипом APOE ε4 (r = 0.866; p = 0.058).Таблица 9Размеры аппарата Гольджи и перикарионов нейронов в ММЯВозраст 50Возраст > 50ПолМужчиныЖенщиныМужчиныЧисло55АГ, m29.41.26.61.81ППН, m2149.67.6125.114.7 2 166.219.0512.52.2Женщины614.52.4 1171.810.1 21p = 0.032; 2p = 0.025АГ – аппарат Гольджи;ППН – площадь перикарионов нейроновТаблица 10Размеры аппарата Гольджи и перикарионов нейронов в ММЯВозраст > 50КонтрольБоАлЧисло1111АГ, m213.61.617.51.7ППН, m2169.29.7166.97.6АГ – аппарат Гольджи;ППН – площадь перикарионов нейроновДостоверных различий между контрольной группой и случаями с БоАл нет.После разделения контрольных случаев согласно классификации ВОЗплощади ядер нейронов ММЯ и их перикарионов постепенно увеличивалисьот 1-ой возрастной группы к 3-ей и достигали самых высоких значений упожилых людей (р=0.042 для площади ядер и р=0.013 для площадиперикарионов нейронов при сравнении третьей группы с первой).
В 4-ойгруппе показатели оставались приблизительно на том же уровне, что и в 3-ей(Рис. 22 и 23). В связи с более интенсивным ростом размеров ядер, ЯЦО при95старении незначительно увеличивалось (r=0.235) и достигало наивысшихзначений в 4-ой возрастной группе (Рис. 24). Аналогично данным площадиядер и перикарионов, наблюдалось увеличение размеров АГ в 3-ей группепожилых людей по сравнению с 1-ой и 2-ой возрастными группами (р =0.001, р = 0.002). Изученный морфометрический параметр оставался на томже уровне в 4-ой группе (старческий возраст) (Рис. 25). Таким образом, пристарении в ММЯ, аналогично БЯМ и ТМЯ, происходит увеличениеметаболической активности нейронов, достигающее максимума в 3-ейвозрастной группе пожилых людей.площадь ядер8070605040302040455150123410020304050607080908090100возрастплощадьперикарионов30012112815314212342502001501005002030405060возраст70100Рис.
22 и Рис. 23. Площадь (в квадратных микрометрах) ядер и перикарионов нейронов вмедиальном мамиллярном ядре (ММЯ). Индивидуальные значения для каждого случаяотмечены ромбами. Линии показывают направление и выраженность корреляционных96зависимостей изученных морфометрических показателей с возрастом. Встроенныестолбчатые диаграммы демонстрируют средние значения (указаны над каждым столбцом)морфометрических показателей нейронов в четырёх возрастных группах ВОЗ (1 –молодые, 25-44 лет; 2 – средний возраст, 45-59 лет; 3 – пожилые, 60-74 года; 4 старческий возраст, 75-89 лет).0,380,3750,370,360,3530,350,340,3320,3310,330,320,310,31234Рис.