Диссертация (1174310), страница 17
Текст из файла (страница 17)
Gromadzka (2005), где показано103наличие корреляции нонсенс и фреймшифт мутаций с более ранним итяжелым течением БВК [89]. Прианализесвязимеждугенотипомпомутациям,существеннонарушающими функциональность белкового продукта (nonsense, frameshift,splicing) и более низким уровнем ХЭ выявлена статистически достовернаясвязь, что может отражать нарушение белоксинтезирующей функции печени.К сожалению, установление достоверной связи между определеннойклинической картиной и конкретными патогенными вариантами гена ATP7B вданной работе было невозможным в связи с редкостью отдельных мутаций ипреимущественной компаунд-гетерозиготностью пациентов.104ЗАКЛЮЧЕНИЕВ данной работе впервые показано разнообразие патогенных и непатогенныхвариантов, обнаруживаемых при секвенировании гена ATP7B пациентов с БВК.Спектр обнаруженных мутаций существенно отличается от спектра мутаций вдругих популяциях, и даже имеет заметные различия с другими результатами,ранее полученными на Российской популяции.
Таким образом, достигнута главнаяцель исследования и получены ценные сведения, имеющие как научную, так ипрактическую ценность.Дальнейшееизучениегенетическихособенностейиклиническогополиморфизма при БВК в будущем может быть направлено на анализ вероятногомодифицирующего влияния непатогенных вариантов гена ATP7B, а такжегенетических вариантов в возможных генах-модификаторах. Кроме того, можетоказаться целесообразным изучение влияния на манифестацию и течение БВКобраза жизни, диеты, употребления лекарственных или наркотических веществ, атакже других внешнесредовых факторов.105ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ ИССЛЕДОВАНИЯУчитывая тот факт, что в настоящем исследовании были обследованыпациенты преимущественно с абдоминальной формой БВК, для получения болееполной картины о спектре мутаций гена ATP7B при данном заболеванийцелесообразно расширение выборки за счет пациентов с неврологической формойБВК.Дальнейшее изучение генотип-фенотип корреляции при БВК также требуетанализа значительно большей выборки пациентов.
Накопление данных может бытьосуществлено в процессе работы биобанков орфанных заболеваний.Уточнение спектра мутаций гена ATP7B у больных БВК в российскойпопуляции может быть использовано для формирования новых диагностическихпанелей на мажорные мутации, что улучшит раннее выявление БВК.Данные, полученные при анализе спектра мутаций гена ATP7B в сочетании склиническими данными в будущем могут послужить основой для разработкиновых методов патогенетической терапии БВК.106ВЫВОДЫ1) В результате проведенного исследования в выборке больных из различныхрегионов России идентифицирована 31 патогенная мутация гена ATP7B,приводящая к развитию болезни Вильсона-Коновалова, что указывает навыраженную генетическую гетерогенность заболевания. Информативностьисследования составила 96%.2) В спектре выявленных причин болезни Вильсона-Коновалова наиболеечастымиоказалисьмутацииc.3207C>A(p.His1069Gln),c.3190G>A(p.Glu1064Lys) и c.3402delC (p.Ala1135fs), которые встречались в 51,85%,8,64% и 6,17% всех аллелей соответственно.
Идентифицированы 3 новые неописанныеранеепатогенныемутации:c.1870-8A>G,c.3655A>T(p.Ile1219Phe), c.3036dupC (p.Lys1013fs).3) Оценена частота гетерозиготного носительства мутаций гена ATP7B вконтрольной группе. Обнаружено гетерозиготное носительство толькомутации c.3207C>A (p.His1069Gln) с частотой равной 1:89. Носительстводругих мутаций у лиц группы контроля обнаружено не было.4) Показано, что болезнь Вильсона-Коновалова характеризуется выраженнымполиморфизмом клинических проявлений.
Отмечается широкий диапазонвозраста манифестации: от 5 до 45 лет (в среднем – 18,57±8,2 лет); различныеформы дебюта заболевания: абдоминальная форма (60%), неврологические ипсихиатрические проявления (31%), смешанные проявления (14%). 9%пациентов не имели клинических проявлений (БВК была обнаружена врезультатесемейногоскрининга).Отмеченопреобладаниетяжелойабдоминальной формы болезнь Вильсона-Коновалова (у 34,5% больных).Среди внепеченочных проявлений наиболее частыми были нарушенияменструальной функции у женщин (17% больных).5) Выявлено, что диагностика заболевания осуществляется на поздних сроках(в среднем через 34 месяца после проявления первых симптомов), нередко на107стадии декомпенсированного цирроза печени или фульминантного гепатита(34,5%), что значительно ухудшает прогноз.6) При исследовании связи генотипов и тяжести болезни Вильсона-Коноваловапрослеживается общая, оцененная по результатам различных подходов иисследованным параметрам, тенденция, указывающая на более тяжелоетечение БВК при мутациях, потенциально приводящих к значительнымнарушениям процессинга белка – nonsense, frameshift, splicing мутации.108ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ1.
В целях ранней диагностики БВК рекомендуется проведение молекулярногенетического тестирования всем пациентам с поражением печенинеуточненной этиологии, особенно при наличии единичных маркеров БВК иневозможностипроведениядифференциальнойдиагностикиинымиметодами. Внедрение в практику NGS-метода в будущем позволитзначительноувеличить(до96%)информативностьмолекулярно-генетического исследования без существенного увеличения стоимости.2. Распространенностьсемейныхслучаевподтверждаетнеобходимостьпроведения семейного генетического скрининга при обнаружении БВК уодного из сибсов.3.
При планировании деторождения пациентами с БВК для определенияпрогноза потомству рекомендуется молекулярно-генетическое обследованиесупруга/супруги. При обнаружении гетерозиготного носительства у партнерариск рождения больного ребенка составляет 50%. В таком случае семьеможнорекомендоватьприменениесовременныхметодовпреимплантационной и пренатальной диагностики для рождения ребенка, нестрадающего БВК.4. Рекомендуется создание клинико-генетических баз данных пациентов с БВК(региональных и российских),включающихданные генеалогического,клинико-лабораторного и молекулярно-генетического обследования ипозволяющие осуществлять активный мониторинг семей с БВК для оценкикачества медико-генетической помощи, особенностей течения заболевания,качества жизни больных и эффективности терапии.109СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙApoE - алипопротеин ЕATP7B – аденозинтрифосфаттрансфераза 7 BBAL – British anti-LewisiteCCS - медный шаперон для супероксиддисмутазыCOMMD1 - домен 1 протеина метаболизма меди MURR1COX17 – медный шаперон для цитохром С оксидазыCP – церулоплазминDBH - допамин-β-гидроксилаза (допамин-β-монооксигеназа)DMT1 – транспортер бивалентных металлов 1DNMTs - ДНК метилтрансферазаhCTR1 – человеческий медь-транспортирующий белок 1HEPH - гефестинLOX - лизил-оксидазаMBDs - metal-binding domains, металл-связывающий домен белка ATP7BMLPA - мультиплексная амплификация лигированных зондов (англ.
Multiplexligation-dependent probe amplification)MTR - метионин-синтазаNGS – секвенирование нового поколения (англ. Next Generation Sequensing)SAH - S-аденозилгомоцистеинSAM - S-аденозилметионинSERPINA1 - альфа-1 антитрипсинSLC33A1 - ацетил-CoA транспортер 1SOD1 - супероксиддисмутазаtx-j- мыши породы «toxic milk mice»XIAP - Х-сцепленный ингибитор апоптозаАЛТ - аланинаминотрансферазаАСТ – аспартатаминотрансфераза110БВК – болезнь Вильсона-КоноваловаВРВП - варикозное расширение вен пищеводаГГТ – гамма-глутаминтрансферазаДНК – дезоксирибонуклеиновая кислотаД-ПАМ – Д-пеницилламинКМГМ – кавернозные мальформации головного мозгаЛПНП – липопротеины низкой плотностиМРТ – магнитная резонансная томографияНГХ – наследственный гемохроматозПЦР – полимеразная цепная реакцияХЭ – холинэстеразаЦНС – центральная нервная системаЩФ – щелочная фосфотазаЭГДС – эзофагогастродуоденоскопияЭПС - эндоплазматическая сеть111СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ1.Асанов, А.Ю.
Федеральные клинические рекомендации по диагностике илечению болезни Вильсона–Коновалова (гепатолентикулярная дегенерация) /А.Ю. Асанов, А.А. Соколов, С.Я. Волгина и др. – М., 2013. – 71 с.2.Багаева, М.Э. Клиническая картина и течение болезни Вильсона у детей / М.Э.Багаева и др. // Вопросы современной педиатрии. – 2004. – Т. 3. – № 5. – С. 13– 18.3.Валикова, Т.А. Болезнь Вильсона–Коновалова / Т.А. Валикова, М.Н.Филимонова, О.Ю. Корягина и др.
// Бюллетень сибирской медицины. – 2008.– Приложение 1. – С. 191 – 195.4.Вялова,Н.В.Молекулярно–генетическийанализубольныхгепатолентикулярной дегенерацией в Хабаровском крае / Н.В. Вялова, Т.Н.Проскокова, Г.М. Баязутдинова, Н.Н. Тен, С.И. Нам, А.М. Хелимский //Дальневосточный медицинский журнал. – 2016. – № 2. – С. 72 – 73.5.Ганнушкина, И.В. Количественное изучение Т– и В–систем иммунитета приразличных наследственных заболеваний нервной системы / И.В. Ганнушкина,И.Г. Жирнова, Н.Г.
Торопова и др. // Журнал невропатологии и психиатрииим. С.С. Корсакова : Ежемес. науч.–практ. журн. – 1981. – Т. 81. – № 7. – С.1009 – 1013.6.Гржибовский, А.М. Анализ номинальных и ранговых переменных данных сиспользованием программного обеспечения Statistica и SPSS / А.М.Гржибовский, С.В. Иванов, М.А. Горбатова // Наука и здравоохранение. –2016. – № 6. – С. 5 – 39.7.Гуляева, С.Е. Молекулярный дефект гепатолентикулярной дегенерации и егоклиническое отражение / С.Е. Гуляева, А.В.
Овчинников // Тихоокеанскиймедицинский журнал. – 2013. – № 4. – С. 98 – 102.1128.Дубовик, С.В. Популяционная частота болезни Вильсона в Беларуси / С.В.Дубовик, Н.Б. Гусина // Медицинская генетика. – 2010. – № 11. – С. 27 – 33.9.Егорова, А.Т. Болезнь Вильсона–Коновалова и беременность / А.Т. Егорова,М.И. Базина, Д.А. Маисеенко, Е.Ю. Киселева, Е.П. Царюк // Сибирскоемедицинское обозрение. – 2014.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
