Главная » Просмотр файлов » Диссертация

Диссертация (1174310), страница 16

Файл №1174310 Диссертация (Оценка спектра мутаций гена ATP7B и клинического полиморфизма болезни Вильсона-Коновалова) 16 страницаДиссертация (1174310) страница 162020-05-24СтудИзба
Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 16)

Проведение генетического тестированиядо того, как у пациента проявилась развернутая клиническая картина (в том числев рамках семейного скрининга), радикально упрощает диагностику БВК ипозволяет своевременно начать патогенетическую терапию.98Целью данного исследования было оценить спектр мутаций гена ATP7B ипроанализировать его возможную связь с развитием клинического полиморфизмаболезни Вильсона-Коновалова.Материалом исследования явились 81 пациент с установленным диагнозомБВК и 10 их ближайших родственников, а также 178 здоровых человека изконтрольной группы. Для решения задач данного исследования было решеноиспользовать метод таргетного NGS в связи с экономической целесообразностью ивозможностью анализа полной последовательности всех экзонов гена ATP7B, атакже фланкирующих интронных областей.

Метод NGS активно используется дляизучения генетических особенностей БВК по всему миру, однако в РоссийскойФедерации аналогичных работ (с проведением секвенирования и полногоклинического обследования всех включенных в исследование пациентов) ранее непроводилось. В предыдущих работах отечественных ученых по сходной тематикеобычно применялась ПЦР на частые мутации для основной массы пациентов исеквенированиеотдельныхобразцов.Крометого,впредшествующихисследованиях не изучалась частота непатогенных вариантов гена ATP7B.При оценке частоты и спектра мутаций в гене ATP7B у 81 пациентов с БВК иих 10 родственников были получены следующие результаты:Мажорная мутация c.3207C>A (p.His1069Gln) встретилась на 51,85%аллелей, что в целом согласуется с данными других исследователей генетическихособенностей БВК в России, а также с данными зарубежных исследователей изВосточной Европы [8, 12, 15, 50, 76].

Однако, второй по частоте (8,63% аллелей)оказалась мутация c.3190G>A (p.Glu1064Lys), которая ранее не включалась в числочастых. Вероятно, это упущение было связано с тем, что данная мутациярасположена в непосредственной близости от мажорной мутации c.3207C>A(p.His1069Gln), что может мешать прямой диагностике методом ПЦР. Третьей почастоте явилась мутация c.3402delC (p.Ala1135fs), которая была обнаружена на6,17% аллелей.

На 16,15% аллелей были обнаружены единичные редкие мутации.99Три мутации c.1870-8A>G, c.3655A>T (p.Ile1219Phe), c.3036dupC (p.Lys1013fs)были впервые описаны в данном исследовании как патогенные и приводящие кБВК.При обследовании родственников пациентов с БВК в двух случаях быливыявлены мутации в гомозиготной и компаунд-гетерозиготной форме у сибсовнаблюдавшихсяпациентов,чтопозволилосвоевременноначатьмедьэлиминирующую терапию. Кроме того, в одном случае было выявленоносительство мутации в гене ATP7B у супруга пациентки с БВК. Тот факт, что приобследовании даже незначительного числа родственников пациентов с БВК в трехслучаях были выявлены клинические значимые находки, демонстрируетисключительнуюважностьпрофилактическогомолекулярно-генетическогообследования членов семей больных, а не только клинико-биохимического,которое проводится рутинно главным образом в отношении сибсов больных, но наранних бессимптомных стадиях оказывается, как правило, недостаточным.Подобные заключения можно наблюдать в научных публикациях последних лет[75, 106, 115].У трех пациентов патогенных вариантов гена ATP7B не удалось обнаружитьс помощью NGS.

По данным литературы, до 15-20% мутаций гена ATP7B можетбыть представлено протяженными внутригенными делециями, инсерциями илидупликациями, которые не распознаются секвенированием [59]. В связи с этим вдальнейшем планируется провести исследование на наличие подобных мутаций уэтих пациентов с помощью метода MLPA.Исследований, посвященных непатогенным вариантам в гене ATP7Bопубликовано крайне мало, обсуждается роль вариантовATP7B в генетическойпредрасположенности к болезни Альцгеймера [101].

При анализе непатогенныхвариантов в нашей работе было обнаружено, что доброкачественные вариантыc.3419T>C(p.Val1140Ala),c.1216T>G(p.Ser406Ala),c.2855G>A(p.Arg952Lys),c.1366G>C(p.Val456Leu)c.2495A>G(p.Lys832Arg),вобследованнойгруппевстречаются несколько чаще по сравнению с данными 1000Genomes и ExAC [208,100209]. Кроме того, был выявлен ряд предположительно непатогенных вариантов, неописанных ранее в вышеуказанных базах данных: c.1373A>G(p.Glu458Gly),c.419C>G(p.Ala140Gly),c.409T>A(p.Ser137Thr),c.400C>G(p.Pro134Ala)иc.2956T>A(p.Ser986Thr).

Роль этих и других вариантов в формированииклинической картины при БВК предстоит оценить в будущем.Таким образом, NGS показывает себя как эффективный метод дляустановления генетических причин БВК среди населения Российской Федерации.Использование таргетного NGS с финансовой точки зрения соизмеримо с анализомначастыемутации,однакосущественноинформативнее.Внедрениевклиническую практику методов массивного параллельного секвенированияпозволяет облегчить и ускорить диагностику БВК, и, таким образом, своевременноназначитьмедъэлиминирующуютерапию.Молекулярно-генетическоетестирование показано всем пациентам с поражением печени неясной этиологии.Была определена частота гетерозиготного носительства мутаций в генеATP7B в группе контроля с помощью полноэкзомного секвенирования методомNGS.

В 2 случаях было выявлено гетерозиготное носительство мутации c.3207C>A(p.His1069Gln), что соответствует частоте носительства 1:89. Носительства другихпатогенных вариантов выявлено не было. Выявленная частота носительстватребует уточнения в связи с относительно небольшим объемом контрольнойгруппы, однако не противоречит данным литературы [59, 106, 155, 156, 180].При изучении особенностей клинических проявлений у пациентов с БВКбыли получены следующие данные: Клинические проявления БВК у обследованных нами пациентов отличалисьзначительным полиморфизмом.

Абдоминальная форма превалировала вдебюте БВК (60% пациентов), при этом у 34,5% отмечалось тяжелоепоражение печени. У 31% больных имели место неврологические ипсихиатрические проявления, у 14% больных присутствовали смешанные101проявления. У 9% БВК была обнаружена в результате семейного скрининга(обследованы как сибсы). Среди внепеченочных проявлений наиболеечастыми были нарушения менструальной функции у женщин (41,3%больных). Манифестация заболевания в среднем состоялась в 18,21±8,55 лет, однакодиагноз БВК устанавливался в среднем в 23,46±15,84 лет. ДиагностированиеБВК существенно запаздывало (в среднем на 34 месяца) а до выявления БВКпациенты наиболее часто наблюдались с диагнозами «гепатит неуточненнойэтиологии» и «аутоимунный гепатит», получая симптоматическую терапию.В результате этого у существенной части пациентов (25,8%) диагноз БВКбыл установлен уже при декомпенсации цирроза печени или развитиифульминантного поражения печени.

Однако, почти в трети случаев (30,6%)БВК была обнаружена на бессимптомной стадии – когда поводом для болееспецифического обследования послужили данные диспансеризации иливыявление БВК у родственника пациента.Превалирование абдоминальной формы БВК обусловлено проведениемисследованиянавариабельностьбазевозрастатерапевтическогодебютаистационара.клиническийОтмеченныеполиморфизмжеширокообсуждаются в литературе [86, 100, 115].В нашем исследовании в 4 из 81 наблюдений было обнаружено сочетаниеБВК с другими моногенными заболеваниями – гемохроматозом (молекулярногенетическийдиагноз),кавернознымимальформациямиголовногомозга,гипокалиемическим параличом и фруктоземией. Описанные клинические случаикоморбидности по моногенным заболеваниям представляют несомненный интересв плане изучения взаимодействия патогенетических путей при различныхнозологиях. Кроме того, они опровергают устоявшееся представление о крайнейредкостимоногеннойдиагностическогозаболевания.патологиипоискадажеидемонстрируютпослевыявленияважностьпервогоглубокогогенетического102В значительной части (27,2%) была выявлена семейная форма, причемнеоднократно (7,4% случаев) поводом для обследования пациентов на БВКпослужила смерть сибса.

Это подтверждает важность семейного генетическогоскрининга. Кроме того, не исключено псевдодоминантное наследование: приносительстве партнером мутации в гене ATP7B вероятность рождения больногоребенка составит 50%. В связи с этим целесообразно молекулярно-генетическоеобследование супруга/супруги больного БВК перед планированием беременности.Одним из недостаточно исследованных вопросов остается корреляция междугенотипом и фенотипом при БВК. По всему миру неоднократно проводилисьпопытки выявления генотип-фенотип корреляции. В некоторых случаяхисследователям удавалось обнаружить связь, однако в ряде случаев анализпоказывал отсутствие корреляции генотипа и фенотипа [62, 180, 195]. При анализесвязи тяжести течения с типом мутации и ее патогенетическим эффектом полученыследующие результаты: При анализе связи гомозиготности по мажорной мутации с тяжестью теченияи другими клиническими показателями не было выявлено статистическидостоверной связи.

Отсутствие цирроза печени чаще наблюдалось в группепациентов,гомозиготныхикомпаунд-гетерозиготныхпомутацииc.3207C>A(p.His1069Gln). Случаи поздней манифестации БВК (старше 31)отмечалисьтолькоупациентов,гомозиготныхлибокомпаунд-гетерозиготных по мажорной мутации, что может косвенно указывать навозможную ассоциацию мутации c.3207C>A(p.His1069Gln) с более позднимдебютом заболевания. При исследовании связи генотипов и тяжести болезни Вильсона-Коноваловапрослеживается общая тенденция, указывающая на более тяжелое течениеБВК при мутациях, потенциально приводящих к значительным нарушениямпроцессинга белка – nonsense, frameshift, splicing мутации. Полученныерезультаты согласуются с данными G.

Характеристики

Список файлов диссертации

Оценка спектра мутаций гена ATP7B и клинического полиморфизма болезни Вильсона-Коновалова
Свежие статьи
Популярно сейчас
Почему делать на заказ в разы дороже, чем купить готовую учебную работу на СтудИзбе? Наши учебные работы продаются каждый год, тогда как большинство заказов выполняются с нуля. Найдите подходящий учебный материал на СтудИзбе!
Ответы на популярные вопросы
Да! Наши авторы собирают и выкладывают те работы, которые сдаются в Вашем учебном заведении ежегодно и уже проверены преподавателями.
Да! У нас любой человек может выложить любую учебную работу и зарабатывать на её продажах! Но каждый учебный материал публикуется только после тщательной проверки администрацией.
Вернём деньги! А если быть более точными, то автору даётся немного времени на исправление, а если не исправит или выйдет время, то вернём деньги в полном объёме!
Да! На равне с готовыми студенческими работами у нас продаются услуги. Цены на услуги видны сразу, то есть Вам нужно только указать параметры и сразу можно оплачивать.
Отзывы студентов
Ставлю 10/10
Все нравится, очень удобный сайт, помогает в учебе. Кроме этого, можно заработать самому, выставляя готовые учебные материалы на продажу здесь. Рейтинги и отзывы на преподавателей очень помогают сориентироваться в начале нового семестра. Спасибо за такую функцию. Ставлю максимальную оценку.
Лучшая платформа для успешной сдачи сессии
Познакомился со СтудИзбой благодаря своему другу, очень нравится интерфейс, количество доступных файлов, цена, в общем, все прекрасно. Даже сам продаю какие-то свои работы.
Студизба ван лав ❤
Очень офигенный сайт для студентов. Много полезных учебных материалов. Пользуюсь студизбой с октября 2021 года. Серьёзных нареканий нет. Хотелось бы, что бы ввели подписочную модель и сделали материалы дешевле 300 рублей в рамках подписки бесплатными.
Отличный сайт
Лично меня всё устраивает - и покупка, и продажа; и цены, и возможность предпросмотра куска файла, и обилие бесплатных файлов (в подборках по авторам, читай, ВУЗам и факультетам). Есть определённые баги, но всё решаемо, да и администраторы реагируют в течение суток.
Маленький отзыв о большом помощнике!
Студизба спасает в те моменты, когда сроки горят, а работ накопилось достаточно. Довольно удобный сайт с простой навигацией и огромным количеством материалов.
Студ. Изба как крупнейший сборник работ для студентов
Тут дофига бывает всего полезного. Печально, что бывают предметы по которым даже одного бесплатного решения нет, но это скорее вопрос к студентам. В остальном всё здорово.
Спасательный островок
Если уже не успеваешь разобраться или застрял на каком-то задание поможет тебе быстро и недорого решить твою проблему.
Всё и так отлично
Всё очень удобно. Особенно круто, что есть система бонусов и можно выводить остатки денег. Очень много качественных бесплатных файлов.
Отзыв о системе "Студизба"
Отличная платформа для распространения работ, востребованных студентами. Хорошо налаженная и качественная работа сайта, огромная база заданий и аудитория.
Отличный помощник
Отличный сайт с кучей полезных файлов, позволяющий найти много методичек / учебников / отзывов о вузах и преподователях.
Отлично помогает студентам в любой момент для решения трудных и незамедлительных задач
Хотелось бы больше конкретной информации о преподавателях. А так в принципе хороший сайт, всегда им пользуюсь и ни разу не было желания прекратить. Хороший сайт для помощи студентам, удобный и приятный интерфейс. Из недостатков можно выделить только отсутствия небольшого количества файлов.
Спасибо за шикарный сайт
Великолепный сайт на котором студент за не большие деньги может найти помощь с дз, проектами курсовыми, лабораторными, а также узнать отзывы на преподавателей и бесплатно скачать пособия.
Популярные преподаватели
Добавляйте материалы
и зарабатывайте!
Продажи идут автоматически
6384
Авторов
на СтудИзбе
308
Средний доход
с одного платного файла
Обучение Подробнее