Диссертация (1174297), страница 2
Текст из файла (страница 2)
aureus.Степень разработанности темы исследованияНа сегодняшний день известно, что золотистый стафилококк обладаетобширным набором факторов, обеспечивающих его адгезию, колонизацию поповерхностям и тканям макроорганизма, а также агрессию и уклонение отиммунокомпетентных клеток хозяина. Наиболее важными из них являются:адгезины, инвазины, мембраноповреждающие токсины, эксфолиативные токсиныи суперантигены.Важным направлением в исследовании факторов патогенности S. aureusстало изучение семейства суперантигенов.
Взимодействуя с фрагментами β-цепиT-клеточного рецептора (Vβ-ТКР), суперантигены способны активировать до 60%всех Т-клеток (CD-4 положительные Т-хелперы) без предварительной презентациина поверхности антигенпрезентирующей клетки (АПК). Массовая активация Тлимфоцитовсопровождаетсясекрециейбольшогоколичествацитокинов,приводящей к системной токсичности и подавлению адаптивного иммунногоответа [105, 167].
Другой отличительной особенностью суперантигенов, являетсято, что, кодирующие их гены, находятся на мобильных генетических элементах(МГЭ) различных типов, и потому различные штаммы S. aureus могут содержатьразный набор генов этих токсинов [39].При изучении связи тяжести течения заболевания с колонизациейтоксигенными штаммами S. aureus была определена корреляция тяжести кожногопроцесса с наличием у штаммов S. aureus генов, кодирующих токсины сосвойствами суперантигенов [12]. В то же время, ряд исследователей не подтвердилвлияния наличия генов токсинов со свойствами суперантигенов S. aureus на8тяжесть клинического течения и уровень секреции провоспалительных цитокинов[104].
В РФ до настоящего времени не проводилось молекулярно-генетическихисследований особенностей S. aureus, выделенных от пациентов с АД.Особого внимания заслуживает лечение АД, протекающего в условияхколонизации/инфицирования S. aureus. Распространенное на сегодняшний деньиспользование топических моно- и комбинированных антибактериальныхпрепаратов строго ограничено курсовым применением, в виду снижениячувствительности микробных агентов при длительной обработке пораженной кожии рядом побочных эффектов стероидного компонента комбинированных формпрепаратов.Отсутствие молекулярно-генетических исследований суперантигенов S.aureus у пациентов с АД в РФ, на фоне противоречивых выводов зарубежныхисследований, а также недостаточное внимание, уделенное в современнойлитературе методам лечения и профилактики стафилококковой инфекции убольных АД, определили целесообразность и обоснованность проведениянастоящего исследования.Цель настоящего исследованияЦель: патогенетическое обоснование комбинированной терапии атопическогодерматита у детей и подростков, в условиях колонизации/инфицирования кожи ислизистых оболочек носа штаммами S.
аureus, несущими гены токсинов сосвойствами суперантигенов.Задачи исследования1. Определить клинические особенности течения АД, отягощенного колонизациейS. aureus, включающие: степень тяжести, значение SCORAD, клиникоморфологическую форму, характер воспалительного процесса, частотуобострений, продолжительность ремиссий, уровень IgЕ и сопутствующиезаболевания у обследуемых больных.92. Установить частоту колонизации, интенсивность микробной обсемененности,превалирующие гены экзотоксинов, кластера иммунного уклонения илейкоцидина LukDE у штаммов S. aureus, выделенных с пораженной кожи ислизистых оболочек носа больных АД, а также с кожи и слизистых оболочекноса здоровых детей.3. Сопоставить и оценить влияние генов экзотоксинов, LukDE и факторовиммунного уклонения S. aureus на тяжесть клинического течения АД.4. Оценитьклиническуюмикросеребраиэффективностьα-глутамилтопическихтриптофананаформсанациюS.препаратоваureusипродолжительность ремиссии у больных АД.Научная новизна работыВпервые в Российской Федерации у детей с АД было проведеномолекулярно-генетическое исследование штаммов S.
аureus, высеянных с очаговпоражения и слизистых оболочек передних отделов носа, у которых былиопределены гены лейкоцидина LukDE и кластера иммунного уклонения, а такжеопределен набор доминирующих генов токсинов со свойствами суперантигенов(seg, tst, sep, sea, sec, seb, sed, see), качественно и/или количественно отличающийсяот наборов генов суперантигенов, выявленных в других географических регионахмира.Впервые проведена оценка влияния обнаруженных генов факторовпатогенности S. аureus на тяжесть клинического течения АД.Впервые в составе комплексного лечения детей с АД показана клиническаяэффективностькомбинированнойкоррекциистафилококковойинфекции/носительства на коже и слизистых оболочках передних отделов носанаружными формами препаратов микросеребра и α-глутамил триптофаном.Теоретическая и практическая значимость10Полученные в результате молекулярно-генетического исследования данные,позволили определить набор генов токсинов со свойствами суперантигенов,характерных для штаммов S.
аureus, персистирующих у больных АД в РФ.Вероятно, это поможет сформировать представление о полном спектре геновэкзотоксинов S. аureus, для изучения их свойств и механизмов влияния на развитиеи течение АД у детей.Анализ клинических и лабораторных данных указывает на то, что геныконкретных токсинов, изученных в настоящем исследовании, либо не обладаютвыраженным влиянием на тяжесть течения АД, либо не наблюдалось экспрессиигеновданныхтоксинов.Полученныерезультатысвидетельствуютонеобходимости дальнейшего изучения других менее изученных факторовпатогенности S.
аureus.На основании полученных данных разработана методика комбинированнойкоррекции стафилококкой инфекции/носительства на коже и слизистых оболочкахноса. Наружные формы препарата микросеребра, обладающие выраженнымантисептическим и дерматопротективным свойствами, а также назальная форма αглутамил триптофана, стимулирующая неспецифические механизмы местногоиммунного ответа, способствуют снижению колонизации, вплоть до полнойсанации S. аureus. Длительное применение топических форм микросеребра всоставе базовой терапии способно как обеспечить санацию, так и предотвратитьповторную колонизацию патогенной микрофлорой кожи больных АД.
Курсовоеприменение α-глутамил триптофана способствует снижению колонизации S. аureusна слизистой оболочке носа, за счет стимуляции фагоцитарной функциинейтрофилов и моноцитов/макрофагов, уменьшая риск аутореинфицированиябольных АД.Методология и методы исследованияМетодологиясовременныхданногопринциповисследованиянаучногобылапознанияиспланированаорганизованасучетомадекватнопоставленной цели. В работе был применен современный комплекс клинических11(сбор и анализ анамнеза жизни и настоящего заболевания, определениеклинической тяжести течения АД по шкале SCORAD, оценка эффективностипредложенной терапии по показателям, принятым в доказательной медицине) илабораторных (общий анализ крови и мочи, биохимический анализ крови,определение содержания общего IgE, бактериологическое исследование мазков спораженной кожи и слизистой оболочки передних отделов носа, молекулярногенетическое исследование S.
aureus, высеянных с пораженной кожи и слизистойоболочки передних отделов носа) методов. В настоящей работе в составекомплексного лечения АД проведена комбинированная терапия, направленная насанацию S. аureus, локализованного на поверхности кожи и слизистой оболочкеноса с помощью топических форм микросеребра и назальной формы α-глутамилтриптофана, с последующей клинической и лабораторной (бактериологической)оценкой эффективности предложенной терапии.Основные положения, выносимые на защиту1. Для детей с АД, поступивших в стационар из внебольничных условий,характерна крайне высокая частота колонизации S.
аureus пораженной кожи ислизистых оболочек передних отделов носа, превышающая значенияколонизации данных экотопов у здоровых детей в три и два раза,соответственно. У больных АД, по сравнению со здоровыми, наблюдаетсястойкая колонизация пораженной кожи и слизистой оболочки носа штаммамиS. аureus, несущими гены токсинов со свойствами суперантигенов.2. НапораженнойдоминирующимикожегенамиислизистыхоболочкахстафилококковыхносатоксиновбольныхсоАДсвойствамисуперантигенов являются: seg, tst, sep, sea, sec. По нашим данным, наличиегенов данных токсинов не влияло на тяжесть течения заболевания, котораябыла соизмерима с тяжестью течения АД у детей, кожа которых былаколонизирована штаммами S.
аureus, не обладающими генами данныхтоксинов.123. Использование наружных форм микросеребра и α-глутамил триптофана вкомплексной терапии АД повышает эффективность лечения, способствуетснижению значения SCORAD, санации условно-патогенных микроорганизмов,обеспечивая увеличение продолжительности ремиссии заболевания.Внедрение результатов исследования в практику.Результаты настоящего исследования внедрены в практику лечебной работыотделения дерматовенерологии Федерального Государственного БюджетногоУчреждения «Российская детская клиническая больница» Минздрава России, атакже в отделения дерматологии филиала «Черемушкинский» ГосударственногоБюджетного Учреждения Здравоохранения «Московского научно-практическогоцентра дерматовенерологии и косметологии Департамента здравоохранения г.Москвы».Результаты настоящего исследования применяются в учебном процессе, приподготовке и проведении практических занятий со студентами, клиническимиинтернами и ординаторами на кафедре дерматовенерологии педиатрическогофакультета Федерального Государственного Бюджетного ОбразовательногоУчрежденияВысшегоОбразования«Российскийнациональныйисследовательский медицинский университет имени Н.И.
Пирогова МинздраваРоссии».Степень достоверности полученных результатовМатематическаяобработкаданныхпроводиласьнаперсональномкомпьютере с использованием программ Microsoft Office Excel 2016 версииWindows 10, а также STATISTICA 10 for Windows. Анализ количественныхпризнаков проводился с использованием параметрических (t-критерия Стьюдентадля несвязанных групп) и непараметрических методов (критерий Манна-Уитни), взависимости от полученной формы распределения.
При определении нормальногораспределения признака предпочтение отдавалось параметрическому методу,которым являлся t-критерий Стьюдента для несвязанных групп. Проводилось13вычисление среднего арифметического (М), среднего квадратичного отклонения(SD), стандартной ошибки среднего (m), доверительного интервала (CI, 95%).Данные считали статистически значимыми при ρ<0,05. При условиях, когданормальноераспределениепризнакаопределенонебыло,применялсянепараметрический метод с определением критерия Манна-Уитни для несвязанныхгрупп.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
