Диссертация (1174186), страница 26
Текст из файла (страница 26)
Следует отметить небольшие изменения формы клетокбазального слоя. Строма роговицы была представлена пучками коллагеновыхволокон с явлениями отека, более выраженными в глубоких слоях. Вдесцеметовоймембранеопределялосьнекотороеутолщение,однакорасположение и непрерывность эндотелиальных клеток соответствовала норме(Рисунок 36).152Рисунок 36 Гистологическаякартина роговицыкрыс на 3 сут послеУФ сшивания срастворомДекстралинк.Отек стромыроговицы.Окраскагематоксилином иэозином.Рисунок 37 Гистологическаякартина роговицыкрыс на 7 сут послеУФ сшивания срастворомДекстралинк.Незначительный отекстромы роговицы.Окраскагематоксилином иэозином.Рисунок 38 Гистологическаякартина роговицыкрыс на 14 сут послеУФ сшивания срастворомДекстралинк.Небольшая отечностьпучков коллагеновыхволокон.Окраска по ВанГизону.153Через 7 сут с момента ультрафиолетового сшивания в эпителиироговицы видимых патоморфологических изменений не отмечали.
В стромероговицы архитектоника роговичных пластин была близка к нормальной,отек пучков коллагеновых волокон уменьшался. Небольшие участки стромыбыли отёчны только в глубоких слоях, прилегающих к десцеметовоймембране. В самой десцеметовой мембране незначительное утолщениесохранялось,вслоеэндотелиоцитовпатологическиеизменениянеопределяли (Рисунок 37).На14-есутпослеультрафиолетовогосшиванияроговицысДекстралинком корнеальный эпителий экспериментальных животных имелобычную архитектонику клеточных слов. В строме сохранялась небольшаяотечность пучков коллагеновых волокон (Рисунок 38).Через 30 сут с после УФ облучения эпителиальный покров роговицыимел обычное строение, отмечали некоторое разнообразие формы и плотностирасположения клеток базального слоя (Рисунок 39). Отечность стромыроговицы приобретала очаговый характер, между пучками коллагеновыхволокон располагались кератобласты и зрелые кератоциты.
Эндотелийроговицы располагался в виде непрерывного слоя.К завершению эксперимента (90 сут) структура роговицы крыс в целомприближалась к норме. Эпителий имел характерную для интактной роговицыархитектонику и плотность клеточных слоев. В строме роговицы явленияочагового отека до конца не исчезали, однако структура роговичных пластини плотность пучков коллагеновых волокон были близки к показателяминтактных животных. При этом десцеметова мембрана и прилегающие к нейклетки эндотелия имели строение, типичное для нормальной роговицы(Рисунок 40).154Рисунок 39 Гистологическаякартина роговицыкрыс на 30 сут послеУФ сшивания срастворомДекстралинк.Очаговый характеротечности стромыроговицы.Окраскагематоксилином иэозином.Рисунок 40 Гистологическаякартина роговицыкрыс на 90 сут послеУФ сшивания срастворомДекстралинк.Небольшая отечностьпучков коллагеновыхволокон.Окраска по ВанГизону.Через 3 сут после роговичного УФ сшивания с раствором Риболинкобнаруживалиморфологическиеизменениявовсехслояхроговицы.Эпителиальный покров к этому сроку был полностью восстановлен.
Такжеследует отметить полиморфность эпителиальных клеток. В строме определялиразрыхление пучков коллагеновых волокон, свидетельствующее об отеке.Десцеметова оболочка была несколько утолщена (Рисунок 41).155Рисунок 41 Гистологическаякартина роговицыкрыс на 3 сут послеУФ сшивания сраствором Риболинк.Отек стромыроговицы.Окраскагематоксилином иэозином.Рисунок 42 Гистологическаякартина роговицыкрыс на 7 сут послеУФ сшивания сраствором Риболинк.Незначительный отекстромы роговицы.Окраска по ВанГизону.Рисунок 43 Гистологическаякартина роговицыкрыс на 14 сут послеУФ сшивания сраствором Риболинк.Отек стромыроговицы.Окраскагематоксилином иэозином.156На 7-е сут с моментаприсутствииизмененияультрафиолетового сшивания роговицы врибофлавинсодержащеговроговицепрактическирастворанеРиболинкотличалисьотструктурныетех,которыерегистрировали в предыдущий срок эксперимента (Рисунок 42).
Наблюдалиулучшение состояния структуры десцеметовой мембраны.Через 14 сут после УФ сшивания отмечали уменьшение отека стромыроговицы. В эпителии наблюдали упорядочение слоев: с дифференциациейбазального слоя и слоя шиповатых клеток. Местами обнаруживали утолщениедесцеметовой мембраны, структура эндотелия роговицы соответствовала норме(Рисунок 43).На 30-е сут после риболинк-УФ кросслинкинга роговицы в стромевизуализировали морфологические признаки улучшения ее структуры.
Однаконаблюдали уплотнение пучков волокон коллагена с сохранением локальногоотека преимущественно в глубоких слоях роговицы. Наряду с этимобнаруживали небольшое снижение относительной плотности кератоцитов(Рисунок 44).Через 90 сут после сшивания роговицы ультрафиолетом и препаратомРиболинк вэпителии отмечалиполноевосстановление архитектоникиклеточных слоев.
В строме роговицы при относительном уплотненииструктурыколлагенаместаминаблюдалиочагиразволокнения,чтосвидетельствует о сохранении жидкости между пучками коллагеновых волокон(Рисунок 45).Через 3 сут после хитолинк-ультрафиолетового сшивания роговицы крысопределяли все слои роговой оболочки глаза (Рисунок 46). При этом наблюдалиразрыхление пучков коллагеновых волокон, характерное для отека, которыйохватывал строму на всю глубину.
Десцеметова мембрана была незначительноутолщена.157Рисунок 44 Гистологическаякартина роговицыкрыс на 30 сут послеУФ сшивания сраствором Риболинк.Отек стромы вглубоких слояхроговицы.Окраскагематоксилином иэозином.Рисунок 45 Гистологическаякартина роговицыкрыс на 90 сут послеУФ сшивания сраствором Риболинк.Очаговый отек стромыроговицы.Окраскагематоксилином иэозином.Через 7 сут после ультрафиолетового воздействия на роговицу сфотосенсибилизатором Хитолинк обнаруживали морфологические изменения вовсех слоях оптической оболочки глаза.
В строме роговицы определяли явленияотека, а также небольшую полиморфноклеточную инфильтрацию. Отмечалиутолщениедесцеметовоймембраны.Клеткиэндотелияпрерывистой слой, вероятно, за счет дегенерации (Рисунок 47).образовывали158Рисунок 46 Гистологическаякартина роговицыкрыс на 3 сут послеУФ сшивания сраствором Хитолинк.Отек стромыроговицы.Незначительнаяполиморфноклеточнаяинфильтрация.Окраска по ВанГизону.Рисунок 47 Гистологическаякартина роговицыкрыс на 7 сут послеУФ сшивания сраствором Хитолинк.Отек стромыроговицы.Незначительнаяполиморфноклеточнаяинфильтрация.Окраска по ВанГизону.Рисунок 48 Гистологическаякартина роговицыкрыс на 14 сут послеУФ сшивания сраствором Хитолинк.Отек стромыроговицы.
Потерякомпактной структурыколлагеновыхволокон.Окраска по ВанГизону.159На 14 сут эксперимента с облучением роговицы в эпителии отмечалиизменения в слое базальных клеток, часть которых подвергалась дегенерации.В строме роговицы по сравнению с предыдущим сроком происходилонарастание отечных явлений, что выражалось в потере компактной структурыпучков коллагеновых волокон.
В промежутках между пучками обнаруживалифибробласты. В десцеметовой мембране определяли некоторое утолщение,большинство клеток эндотелия претерпевали дегенеративные изменения(Рисунок 48).Через 30 сут после УФ сшивания роговицы крыс с применениемХитолинка наблюдали трансформацию клеток базального слоя эпителия,(Рисунок 49). Поверхностные слои стромы роговицы были представленырыхлыми пучками коллагеновых волокон, между которыми определялиновообразованные кровеносные сосуды.
В глубоких слоях стромы роговицыотдельные пучки коллагеновых волокон располагались более компактно, ноявления отека сохранялись. Оставалось и утолщение десцеметовой мембраны,на которой располагались клетки эндотелия.Рисунок 49 Гистологическаякартина роговицыкрыс на 30 сут послеУФ сшивания сраствором Хитолинк.Отек стромыроговицы. Появлениеновообразованныхсосудов вповерхностных слояхроговицы.Окраска по ВанГизону.160На 90-е сут эксперимента поверхностные слои стромы были относительноплотными, состоящими из неоформленной соединительной ткани с гомогеннойструктурой,отличающейсяотнормальныхроговичныхпластин,чтосвидетельствует о потере прозрачности роговицы (Рисунок 50). В глубокихслояхстромыможнопроследить границымежду пучкаминесколькоуплотнившихся коллагеновых волокон вместе с явлениями отека.Рисунок 50 Гистологическаякартина роговицыкрыс на 90 сут послеУФ сшивания сраствором Хитолинк.Появление ткани сгомогеннойструктурой.Окраскагематоксилином иэозином.Таким образом, динамика морфологических изменений роговицы крыспосле воздействия на нее ультрафиолетового излучения (без рибофлавина) вдозе 3 мВт/см2 в течение 10 мин (370 нм) характеризовалась выраженнымразвитием патологических изменений в виде отека стромы, с врастанием в нееновообразованных сосудов и усиленной гибелью кератоцитов, при этомнаблюдались явные признаки эндотелиальной дистрофии с нарушениемцелостности десцеметовой мембраны, с последующей (90 сут) полной утратойнативной структуры роговой оболочки глаза.УФсшиваниероговицывприсутствиирастворарибофлавинаизоосмотического и препарата Риболинк характеризовалось незначительнымутолщениемдесцеметовоймембраны,связаннымсразвитием161послеоперационного отека стромы, интенсивность которого спадала к 14 сутэксперимента.
Однако локальное набухание пучков коллагеновых волоконстромы сохранялось до 30 сут. К 90 сут после ультрафиолетового сшивания срибофлавином изоосмотическим или препаратом Риболинк в эпителииопределялась полная нормализация архитектоники клеточных слоев безпризнаков патологии. К этому сроку в строме единичных образцовгистопрепаратовнаблюдалисьзоныуплотнения,свидетельствующиеоявлениях очагового отека.
Патоморфологических изменений эндотелияроговицы не установлено.При ультрафиолетовом облучении роговицы с раствором Декстралинк вранний послеоперационный период (3 сут) отмечался менее выраженный отекстромы, чем при использовании других исследуемых рибофлавинсодержащихпрепаратов, что связано с дегидрирующим действием декстрана в составепрепарата. Уже к 7 сут архитектоника эпителия и роговичных пластин былаблизка к нормальной с единичными очагами отека пучков коллагеновыхволокон.
Через 90 сут эксперимента структура роговицы, включая эндотелий,в целом была без патологических изменений, при этом встречалисьединичные участки разволокнения стромы.УльтрафиолетовоесшиваниероговицысосредствомХитолинкхарактеризовалась значительным отеком стромы с утолщением Десцеметовоймембраны.Вновообразованныеисследуемыхсосудыобразцахимикропрепаратовразрастаниевстречалисоединительнойтканипреимущественно в передних слоях стромы роговицы. Признаки выраженногоотека роговицы сохранялись до 30 сут эксперимента.Обобщая вышеописанное можно заключить, что полимеры, входящие всостав офтальмологических растворов для УФ кросслинкинга вносят свойвклад в стабильность морфологического состояния роговицы.1624.6.