Диссертация (1174186), страница 29
Текст из файла (страница 29)
Группа контроля – 24практически здоровых лица. Забор СЖ для определения уровней цитокиновTNF-, IL-1, IFN-, TGF-1 и -2 осуществляли в динамике исследования –177до операции, на 3, 7 и 14 сут после процедуры. В эти же сроки производилизабор венозной крови для получения сыворотки.Врамкахисследованийопределяемыхцитокиновотсутствовали.Отметим,ввыявлено,СЖчточторазличиязависимостипрактическиотвполаполноеуровняхпациентоввосстановлениецелостности роговичного эпителия после s-CXL наблюдали примерно на 3-4сут.Таблица 30 - Уровень цитокинов в слезной жидкости пациентов с кератоконусомпосле стандартного и трансэпителиального УФ сшивания роговицы в динамикеисследования (пг/мл, M±σ)МетодсшиванияПоказатель Контроль КератоконусроговицыTNF-IL-1IFN-8,9±1,3 20,9±2,1*8,8±1,67,5±0,84,2±0,7 11,1±2,7*Сроки наблюдения3 сут7 сут14 сутs-CXL21,8±2,5*19,0±2,8*14,5±1,9*t-CXL22,7±3,1*18,1±2,5*12,6±2,0s-CXL14,9±3,012,5±3,18,2±1,7t-CXL11,7±2,411,2±2,39,1±2,0s-CXL28,8±4,1*▲ 22,4±4,6**16,5±3,3*t-CXL22,2±3,7*13,5±3,8*20,4±4,3** р<0,05 ** р<0,01-0,001 – достоверность различий показателя при сравнении с контролем.▲р<0,05 – достоверность различий при сравнении с показателями пациентов с кератоконусом.Содержание фактора некроза опухоли альфа в СЖ больных с ККпревышало показатели контроля более чем в 2 раза (Таблица 30).Через 3-7 дней после s-CXL и t-CXL местный уровень TNF-практически не изменялся (Рисунок 63).
На 14 сут наблюденийконцентрация цитокина в СЖ снижалась, хотя и превышала величинуконтрольных показателей.178пг/мл302520151050до операцииTNFa s-CXL3TNFa t-CXL714IL-1b s-CXLСуткиIL-1b t-CXLРисунок 63 - Содержание TNF- и IL-1β в слезной жидкости пациентов скератоконусом после стандартного (s-CXL) и трансэпителиального (t-CXL) УФсшивания роговицы в динамике исследования (пг/мл).Контроль: уровень TNF- – 8,9±1,3 пг/мл, IL-1β – 8,8±1,6 пг/мл.По оси абсцисс – период наблюдений (сут), по оси ординат – концентрация TNF и IL-1β в слезной жидкости.Клинически период от 3-х до 14-ти дней отличался спокойным течением.Достоверной разницы в исследуемых показателях в зависимости оттехники УФ сшивания не установлено.Концентрация IL-1 в СЖ пациентов с кератоконусом находилась впределах контрольных значений. На 3 сут после s-CXL уровень IL-1 в 2раза, а после t-CXL – в 1,5 раза превышал дооперационные данные,однако различия не были статистически значимы (Таблица 30).Трансэпителиальный кросслинкинг, как менее инвазивный способсшивания роговицы не влечет столь выраженного роста цитокина в СЖ,179как в группе s-CXL, особеннов ранние сроки после деэпителизации иоблучения.
В последующем после выполнения обеих методик УФсшиваниярегистрировалиснижениесодержанияIL-1вСЖинормализацию его уровня до исходных значений (на 14 сут).Уровень IFN- в СЖ больных КК достоверно отличался от контроля(здоровые лица) – в 2,7 раза. Максимальную концентрацию интерферонаальфа обнаруживали на 3 сут в обеих наблюдаемых группах (р<0,05),причем у пациентов со s-CXL определяли его более выраженный рост. На7-14 сут наблюдений содержание IFN- в СЖ после стандартного итрансэпителиальногоультрафиолетовогокросслинкингароговицыдостоверно уменьшалось, приближаясь к значениям дооперационногоуровня.Установлено статистически значимое (р<0,01-0,001) повышениесодержания трансформирующего фактора роста 1 в СЖ пациентов с КК в10 раз, по сравнению с таковыми в группе практически здоровых лиц(Рисунок 64).
Исследование локального уровня TGF-1 в динамикепроведения s-CXL выявило его рост через 3 сут после процедуры 1,5 раза,относительнопрактическидооперационныхзавершеннуюзначений.эпителизациюКлиническидефектаотмечалироговицыглазапациентов, вызванного проведением процедуры УФ сшивания. На 7 сутисследованияконцентрациямаксимальнойTGF-1величины,значимовслезной(р<0,001)жидкостидостиглаотличаясьотдооперационного уровня и значения контрольной группы. Для 14 -х сутпослеs-CXLиt-CXLбылохарактерноснижениесодержаниятрансформирующего фактора роста 1, относительно предыдущего срокаисследования, хотя оно по-прежнему, были достоверно выше (р<0,010,001) контрольных значений.180Пг/мл1300.01150.81100.0900.0733.6682.4700.0641.5500.0437.4309.1300.0235.1100.0ДО37TGF-β1 s-CXLСутки14TGF-β1 t-CXLРисунок 64 - Содержание TGF-1 в слезной жидкости пациентов с кератоконусомпосле стандартного (s-CXL) и трансэпителиального (t-CXL) УФ сшиванияроговицы в динамике исследования (пг/мл).Контроль: уровень TGF-1 – 40,6±7,2 пг/мл.По оси абсцисс – период наблюдений (сут), по оси ординат – концентрация TGF1 в слезной жидкости.Локальная концентрация TGF-2 у больных КК более чем в 25 разпревышала показатели контроля (Рисунок 65).
Третьи сут после s-CXLхарактеризовались достоверным 2,5-кратным ростом TGF-2 в СЖ, при этомрегистрировалимаксимальныйуровеньцитокинапоотношениюкдооперационным данным (р<0,01-0,001). Отметим, что клиническая картинахарактеризовалась отсутствием роговичного синдрома, глаза пациентов былиспокойные. Наблюдаемое падение уровня TGF-2 на 7-е сут после s-CXL и t-181CXL сохранило свою тенденцию и в последующем – на 14 сут. Полученныерезультаты локального содержания трансформирующего фактора роста 2 вэти сроки имели статистически значимое отличие от контроля (р<0,01-0,001).Динамика изменения концентрации TGF-2 при используемых способах УФсшиваниябылаоднотипна,нодемонстрировалаболеезначительныеотклонения при s-CXL.Пг/мл2514.42500.02000.01736.51635.11500.01343.51274.11000.01163.21017.2500.0ДО3TGF-β2 s-CXL714СуткиTGF-β2 t-CXLРисунок 65 - Содержание TGF-2 в слезной жидкости пациентов с кератоконусомпосле стандартного (s-CXL) и трансэпителиального (t-CXL) УФ сшиванияроговицы в динамике исследования (пг/мл).Контроль: уровень TGF-2 – 36,8±5,5 пг/мл.По оси абсцисс – период наблюдений (сут), по оси ординат – концентрация TGF2 в слезной жидкости.182Таким образом, у пациентов с кератоконусом до лечения отмечаетсядостоверное увеличение локальной концентрации TNF-, IFN-, TGF-1,TGF-2 при нормальном уровне IL-1, что можно объяснить патологическимфоном заболевания.
Проведение ультрафиолетового сшивания роговицыстандартнымитрансэпителиальнымметодамиспособствовалократковременному транзиторному повышению содержания IL-1β, IFN-,TGF-1 и -2 в слезной жидкости, более выраженному при стандартнойпроцедуре с деэпителизацией роговицы.В сроки до 14 сут наблюдаетсяснижение концентрации цитокинов в слезе до уровня дооперационныхданных.5.2. Динамика системного уровня цитокинов у пациентов скератоконусомпослестандартногоитрансэпителиальногоультрафиолетового сшивания роговицыЕще одним аспектом оценки воздействия УФ облучения на роговицуможет служить исследование особенностей цитокинового системного ответапосле процедуры s-CXL и t-CXL у пациентов с КК.Проведенный анализ концентрации TNF-, IL-1, IFN-, TGF-1 и -2в сыворотке крови пациентов с КК до УФ сшивания и в послеоперационномпериоде также не выявил гендерного различия.Содержание TNF- в СК пациентов с КК находилось в пределахзначений здоровых лиц (Таблица 31).
На 3 сут после s-CXL концентрацияцитокина незначительно превышала показатели контроля 4,34±1,0 пг/мл,статистически не отличаясь от нормы (Рисунок 66). В сроки 7-14 сутзначимых изменений уровня фактора некроза опухоли альфа в СК выявленоне было. Сравнительный анализ двух техник ультрафиолетового сшиванияроговицы не показал значимых системных отличий в количественномсодержании цитокина.183Таблица 31 - Уровень цитокинов в сыворотке крови пациентов скератоконусом после стандартного и трансэпителиального УФ сшиванияроговицы в динамике исследования (пг/мл, M±σ)Сроки наблюденияМетодсшиванияПоказатель Контроль КератоконусроговицыTNF-IL-1IFN-2,1±0,21,50,34,3±0,42,92±0,52,80±0,65,72±1,63 сут7 сут14 сутs-CXL4,34±1,03,31±0,63,5±1,1t-CXL3,02±0,93,10±1,12,08±0,9s-CXL2,94±0,84,39±0,52,4±0,3t-CXL3,5±0,83,0±1,12,9±1,0s-CXL5,96±1,25,94±0,83,3±0,4t-CXL5,5±1,05,2±1,24,0±1,0Статистически значимых различий не установлено.Содержание интерлейкина-β1 в сыворотке крови у пациентов скератоконусомпоказателей.существеннымдолечения находилосьСтандартнаяизменениямпроцедураобщейвУФпределахсшиванияконцентрациифизиологическихнепривелацитокина,ккотораяоставалась в пределах нормы (0-5 пг/мл) в течение всего срока наблюдений(14сут)(Рисунок66).Аналогичнуюкартинунаблюдалиипритрансэпителиальном кросслинкинге (t-CXL).Статистически значимо не отличались и значения системного уровняIFN- у пациентов кератоконусом, как до операции, так и в динамике послепроведенного стандартного и трансэпителиального кросслинкинга, отпоказателей группы практически здоровых лиц (контроль).184пг/мл 86420до операцииTNFa s-CXL3TNFa t-CXL7IL-1b s-CXL14СуткиIL-1b t-CXLРисунок 66 - Содержание TNF- и IL-1β в сыворотке крови пациентов скератоконусом после стандартного (s-CXL) и трансэпителиального (t-CXL) УФсшивания роговицы в динамике исследования (пг/мл).Контроль: уровень TNF- – 2,1±0,2 пг/мл, IL-1β – 1,50,3 пг/мл.По оси абсцисс – период наблюдений (сут), по оси ординат – концентрация TNF и IL-1β в слезной жидкости.В сыворотке крови пациентов с кератоконусом обнаруживали достоверное(р<0,05) повышение уровня TGF-β1, по сравнению с таковыми в контрольнойгруппе (Рисунок 67).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
