Диссертация (1174186), страница 28
Текст из файла (страница 28)
Срок наблюдения составил: 1, 18 и72 ч для каждого из растворов.В период наблюдения при нанесении растворов Декстралинк, Риболинк,Хитолинк, как и контрольного раствора, через 1 час после окончанияэкспозиции каких-либо функциональных кожных нарушений отмечено небыло, эритемы отсутствовали.
Через 18 часов и в последующем до 72 часовтакже никаких патологических изменений на опытных участках кожныхпокрововэкспериментальныхживотныхнеобнаружено,эритемынеопределялись, что соответствовало «0» баллов по системе классификациикожных реакций (ГОСТ ISO 10993-10 – 2011). Рассчитанный нами индекспервичного раздражения (ИПР) для контроля, не отличался от значений приприменении препаратов Декстралинк, Риболинк, Хитолинк и составил «0»баллов.Такимобразом,наоснованиипроведенныхисследованийофтальмологические растворы Декстралинк, Риболинк и Хитолинк можноотнести к 1 классу препаратов – с низкой степенью потенциального риска приих применении в медицинских целях.Оценка раздражающего действия офтальмологических растворов дляУФ сшивания роговицы in vivo на слизистую оболочку глаз169В опыт включили 4 кролика на каждый исследуемый раствор,соответственно.Вконъюнктивальныймешоклевогоглазакроликовпроизводили инстилляции офтальмологических растворов (Декстралинк,Риболинк или Хитолинк) в количестве 0,1 мл (2 капли), правый – служилконтролем (изоосмотический рибофлавин).
Проверку состояния слизистойоболочки глаза и прозрачности роговицы проводили после удалениярибофлавина физиологическим раствором, посредством биомикроскопии иофтальмоскопии ежедневно в течение 7 дней. С первых часов и в течениевсегосроканаблюденийпослеинстилляцийрастворовДекстралинк,Риболинк или Хитолинк отек слизистой оболочки глаза не определялся,инъекция сосудов конъюнктивы склер – в пределах нормы, радужнаяоболочка без изменений, роговица прозрачная (Рисунок 62).Таблица 26 - Раздражающее действие офтальмологических растворов для УФсшивания роговицы на слизистую оболочку глаза кроликов после инстилляций(бальная оценка по системе классификации повреждений глаза)РастворРоговицаРадужнаяКонъюнктиваХемозВыделенияоболочкаРибофлавин(контроль)ДекстралинкРиболинкХитолинк00000000000000000000Каких-либо патологических выделений из конъюнктивальной полости вобласти век не обнаружено.
Раздражающее действие изучаемых растворов наслизистые оболочки глаза кроликов были оценены на «0» баллов (Таблица26).1701234Рисунок 62 - Конъюнктива кролика после инстилляций офтальмологическихрастворов для УФ сшивания роговицы без изменений.1 – изоосмотический раствор рибофлавина (контроль), 2 – Декстралинк,3 – Риболинк, 4 – Хитолинк.171Сенсибилизирующее действие офтальмологических растворов для УФсшивания роговицы in vivo оценка кожной реакцииИсследованияпредпринятыдляопределениявозможногосенсибилизирующего действия офтальмологических растворов для УФ сшиванияроговицы Декстралинк, Риболинк и Хитолинк на кожу век.Всем животным (морские свинки-альбиносы) на подопытный участок вмежлопаточной области вводились 3 парные внутрикожные инъекции: 0,1 млсмеси адъюванта Фрейнда с 0,1 мл физраствора; 0,1 мл исследуемых растворов(изоосмотический рибофлавин, Декстралинк, Риболинк, Хитолинк), в контроле –физраствор; и 0,1 мл исследуемого раствора с 0,1 мл адъюванта Фрейнда, а такжеконтроль – физраствор с адъювантом.Таблица 27 - Степень ответной кожной реакции при воздействииофтальмологических растворов для УФ сшивания роговицы in vivo (в баллах)ГруппаКонтрольКол-воживотных НаблюдениеnЭритема5ОтекРибофлавинизоосмотический10Декстралинк10Риболинк10Хитолинк10Сроки наблюдения24 ч48 ч0000Эритема00Отек00Эритема00Отек00Эритема00Отек00Эритема00Отек00ОписаниеответнойреакцииРеакцияотсутствуетРеакцияотсутствуетРеакцияотсутствуетРеакцияотсутствуетРеакцияотсутствуетПосле выполнения фазы местного воздействия (7 дней), с помощьюнакожных аппликаций из испытуемых растворов на 48 ч, проводилипровокационную пробу – через 14 дней на интактные участки кожи на 24 чнакладывали повязки с аппликациями из растворов Декстралинк, Риболинк иХитолинк и изоосмотического рибофлавина.
Осматривали и регистрировали172состояние кожи в месте аппликации через 24 и 48 ч у всех животных. Степенькожной реакции оценивали в баллах, при допустимых значениях не более 1балла.Изменения участка кожи при нанесении на нее аппликаций средствДекстралинк, Риболинк и Хитолинк, как и изоосмотического растворарибофлавина, не отличались от интактной поверхности кожных покровов(Таблица 27). У всех наблюдаемых животных эритемы отсутствовали, отекине определяли, исследуемые Декстралинк, Риболинк и Хитолинк невызывали сенсибилизации.Таким образом, результаты исследований – отсутствие раздражения кожина всех этапах наблюдений – позволяют сделать вывод, что средстваДекстралинк, Риболинк и Хитолинк не обладают гиперчувствительностьюзамедленноготипаисоответствуеттребованиям,предъявляемымкмедицинским изделиям по ГОСТ ISO 10993-10 – 2011 «Исследованияраздражающего и сенсибилизирующего действия».Исследование острой токсичности офтальмологических растворов дляУФ сшивания роговицыПроведено исследование возможного острого токсического воздействиярастворовДекстралинк,РиболинкиХитолинкприоднократномвнутрибрюшинном введении мышам, у которых оценивались выживаемость,внешний вид, поведение, вес тела и внутренних органов (печень, почки,селезенка, тимус), патоморфологическая оценка состояния внутренних органови тканей в сроки через 24 ч и 14 сут после инъекции растворов.
Контрольный(0,9% натрия хлорид) и исследуемые растворы, а также препарат сравнения(изоосмотический раствор рибофлавина) вводили внутрибрюшинно в дозе 50мл/кг.При оценке токсического действия растворов были получены следующиерезультаты.173Выживаемость.Напротяжениивсегоисследованиявсеэкспериментальные животные оставались живы.Внешний вид и поведение. Во всех опытных группах (при использованиисредств Декстралинк, Риболинк и Хитолинк) животные выглядели здоровыми,были подвижны, шерстный покров без изменений, белого цвета, плотноприлегал к поверхности тела.
Область живота в объеме не увеличена. Объемпотребляемой пищи не изменился, количество и консистенция фекальных массаналогичноживотныминтактногоконтроляигруппысравнения.Зоосоциальное поведение мышей соответствовало физиологической норме.Патоморфологическая оценка внутренних органов (трахея, бронхи,головной мозг, тимус, щитовидная железа, гортань, легкие, аорта, сердце,брюшина, пищевод, желудок, поджелудочная железа, печень, кишечник, почки,надпочечники, мочевой пузырь, семенники) животных всех опытных групп игруппы контроля без каких-либо изменений.Изменениявесателаживотныхчерез24чи14сутпослевнутрибрюшинного введения растворов Декстралинк, Риболинк или Хитолинкне наблюдали (Таблица 28). Достоверной разницы исследуемого показателя сконтролем не установлено.Таблица 28 - Вес тела мышей при внутрибрюшинном введенииофтальмологических растворов для УФ сшивания роговицы (г, M±σ)ВесФизраствор Рибофлавин Декстралинк(контроль) (контроль)До введенияРиболинкХитолинк26,20,80Через 24 ч26,50,7526,90,8226,70,6626,60,7226,10,76Через 14 сут27,40,5827,20,6827,00,5526,80,8026,50,60Достоверных отличий с контролем не выявлено.174Во второй серии экспериментов в эти же сроки определяли весвнутренних органов животных после внутрибрюшинного введения растворов.Через 24 ч вес печени мышей в контроле составил 1,140,05 г, почек –0,26±0,008 г, селезенки – 0,104±0,008 г, тимуса – 0,028±0,004 (Таблица 29).
На14-е сут вес внутренних органов животных этой же группы значимо неизменялся.Таблица 29 - Вес внутренних органов мышей при внутрибрюшинном введенииофтальмологических растворов для УФ сшивания роговицы через 24 часа и 14 сут(г, M±σ)ОрганыСрокФизрастворнаблюдений (контроль)ПеченьПочки(парно)СелезенкаТимусРибофлавин Декстралинк Риболинк(контроль)Хитолинк24 ч1,140,151,150,181,160,191,15±0,141,16±0,1414 сут1,150,091,160,141,150,181,17±0,131,16±0,1524 ч0,26±0,0210,25±0,0180,27±0,0100,25±0,0200,26±0,02214 сут0,27±0,0300,25±0,0270,28±0,0190,24±0,0250,27±0,02224 ч0,104±0,0140,106±0,0110,107±0,013 0,103±0,009 0,108±0,01214 сут0,105±0,0120,108±0,0080,109±0,014 0,102±0,018 0,110±0,01524 ч0,028±0,0050,031±0,0030,032±0,005 0,030±0,006 0,027±0,00514 сут0,028±0,0060,030±0,0080,034±0,004 0,032±0,008 0,026±0,005Достоверных отличий с контролем не выявлено.ВнутрибрюшинноевведениерастворовДекстралинк,РиболинкиХитолинк в отмеченные сроки наблюдений также не вызвало достоверныхотличий от значений интактного контроля – выявленные отклонения в весевнутреннихоргановмышейнаходилисьвпределахстатистическойпогрешности.Таким образом, в течение всего срока наблюдений (14 сут) смертностиживотных не наблюдали ни в одной группе.
Клинических симптомовинтоксикациинеобнаружено,внутренниеорганыбезпатологическихизменений. Статистическая обработка результатов изменения веса животных и175их внутренних органов не выявила достоверных отличий между опытной(Декстралинк, Риболинк и Хитолинк) и контрольной группами (физраствор), атакжегруппойсравнения(изоосмотическийрастворрибофлавина).Исследование острой токсичности растворов Декстралинк, Риболинк иХитолинк,изученнойнамышахпривнутрибрюшинномвведениивсоответствии с ГОСТ ISO 10993-11 – 2011 «Исследования общетоксическогодействия», позволяет отнести данные препараты к нетоксичным средствам.176ГЛАВА 5.ВЛИЯНИЕ УЛЬТРАФИОЛЕТОВОГО СШИВАНИЯ РОГОВИЦЫНА ДИНАМИКУ ЛОКАЛЬНОГО И СИСТЕМНОГО УРОВНЯЦИТОКИНОВ И АНТИОКСИДАНТНОГО СТАТУСАВажным аспектом локальной иммунной модуляции в роговице,особенно после процедуры УФ сшивания при хронических дегенеративныхсостояниях,являетсяцитокиноваярегуляция.Несомненныйинтереспредставляет местный и общий иммунный ответ, а также состояние системантиоксидантной защиты в условиях выполнения УФ кросслинкингастандартным (s-CXL) способом с деэпителизацией роговицы (Epi-Off) итрансэпителиальным (t-CXL) при котором эпителий сохраняется (Epi-On).5.1.
Особенности локального уровня цитокинов у пациентов скератоконусомпослестандартногоитрансэпителиальногоультрафиолетового сшивания роговицыДля оценки динамики уровня цитокинов в слезной жидкости (СЖ) вклинические наблюдения были включены 48 пациентов (48 глаз) скератоконусом I-II стадии (по классификации Амслер), находившихся налечении в Уфимском НИИ глазных болезней, в т.ч. женщин было 18 (37,5%),мужчин – 30 (62,5%). Из них группу стандартного сшивания составили 28человекитрансэпителиальногодеэпителизациироговицыс–20.последующимиs-CXLвыполнялиинстилляциямипослераствораДекстралинк и УФ облучением (3 мВт/см 2, 30 мин). t-CXL техника сшиваниявоспроизводилась посредством ионофореза с раствором 0,1% рибофлавина.Средний возраст больных составил 32,36,5 года.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
