Диссертация (1174186), страница 22
Текст из файла (страница 22)
В 2-ой группе роговица животных была облучена такой жемощностью ультрафиолета, что и при УФ сшивании, но без рибофлавина. Через1 час после процедуры наблюдали 6-кратное увеличение светосуммы ХЛ, посравнению с интактными кроликами (р<0,01), а значения спонтаннойсветимости были выше таковых в 5,3 раза (р<0,01). В последующемрегистрировали снижение исследуемых показателей ХЛ – через сутки послепроцедуры, соответственно, на 8% и 7% от максимальных значений, через 4 сут– на 13% и 20%, а через 14 сут – на 49% и 62% (Таблица 17). Т.е. избыточнаяактивация процессов СРО, регистрируемая 1 час после УФ облучения, вдальнейший срок наблюдений имела тенденцию к снижению. При этомсохранялась статистически значимая разница с контрольной группой.118Таблица 17 - Показатели люминолзависимой хемилюминесценции влаги переднейкамеры кролика после УФ облучения роговицы (усл.ед., M±σ)ИнтактныеУФО безУФО +ДеэпителизацияПоказаСрок(контроль) рибофлавина рибофлавинбез УФОтель наблюдения2 группа3 группа4 группа1,01±0,12▲0,58±0,08*0,49±0,09*0,94±0,12▲0,76±0,09▲0,35±0,090,81±0,09▲0,73±0,09▲0,24±0,067 сут0,68±0,14*0,54±0,10*0,24±0,0814 сут0,39±0,110,28±0,090,22±0,071ч0,97±0,15▲0,49±0,07*0,47±0,08*1 сут0,89±0,1▲0,81±0,10▲0,32±0,070,85±0,11▲0,75±0,12▲0,20±0,047 сут0,71±0,12*0,62±0,11*0,21±0,0614 сут0,50±0,08*0,34±0,090,15±0,05Спонтаннаясветимость1ч1 сут4 сутСветосумма* р<0,05;1 группа4 сут▲0,19±0,030,16±0,02р<0,01 – достоверность различий показателя при сравнении с интактнымконтролем.Параметры светосуммы и спонтанной светимости ЛЗ ХЛ переднекамернойвлаги животных после стандартного УФ сшивания (группа 3) превышаликонтрольные значения более, чем в 3 раза (р<0,01) (Рисунок 12).
Однакополученные результаты были существенно ниже показателей, полученных во 2-ойгруппе, что, очевидно, связано с присутствием рибофлавина, который кромефотосенсибилизирующей активности проявляет свойства ультрафиолетовойпротекции по отношению к внутриглазным тканям. Через сутки послерибофлавин-УФ сшивания величина светосуммы и спонтанной светимости былабольше контрольных значений в 5 (р<0,01) и 4 раза (р<0,01), соответственно, а на4-есутуказанныепоказателинезначительноснижались,относительнопредшествующего срока, сохраняя при этом достоверные отличия с контролем119(р<0,01).
К завершению эксперимента на 14 сут параметры светосуммы испонтанной светимости приближались к значениям нормы, превышая ее только на87% и 47%, соответственно.%▲600550▲▲▲Спонтанная светимостьСветосумма▲▲500400*350300250▲*▲450▲*▲* *****200150100500ттттттттттттечч1чсу 4 су 7 су 4 су л 1су 4 су 7 су 4 с усу 4 су 7 су 4 суны О 1f111fт111кллООi-O -Off -Off -Offоф фллffУФ ФООтаiiiооф боф офУУФУФ УФ риб-OEpipppИнбббEEEиииEpО++р О+р О+р +риФОУОУФУФУФ УФРисунок 12 - Люминолзависимая хемилюминесценция влаги передней камерыкроликов после УФ облучения роговицы (% к контролю).* р<0,05;▲р<0,01 – достоверность различий показателя при сравнении с интактнымконтролем.Нами исследовано возможное влияние травмирующего воздействиядеэпителизации (Epi-Off) роговицы на состояние СРО во влаге передней камерыглаза.
Непосредственно после удаления эпителия роговицы отмечали значимыйрост значений светосуммы в 2,9 раза (р<0,05) и спонтанной светимости в 2,5 раза(р<0,05), по сравнению с нормой. Через 24 ч указанные показатели снижались, ана 4-е сут эксперимента – срок, при котором определяли практическизавершенную эпителизацию дефекта роговицы глаза, – были на уровне интактных120животных. В дальнейшем на 7-14 сут данные параметры оставались в пределахнормы.Такимобразом,фотосенсибилизатораУФоблучениеприводилокроговицымногократномуглазростукроликовсветосуммыбезиспонтанной светимости люминолзависимой хемилюминесценции влаги переднейкамеры, что характерно для процессов усиленного образования активных формкислорода и интенсификации процессов свободно-радикального окисления,которые менее выражено протекают в присутствии рибофлавина. Значимыхотличий по влиянию на показатели ХЛ офтальмологических растворов при УФсшивании (рибофлавин изоосмотический, Декстралинк, Риболинк и Хитолинк) неустановлено.
К 14 сут после УФ воздействия на роговицу во всех группахнаблюдаласьпостепеннаянормализацияисследуемыхзначенийхемилюминесценции. Удаление эпителия роговицы также способствовалонезначительному увеличению исследованных параметров хемилюминесценции сих восстановлением на 4 сут.4.2. Особенности влияния ультрафиолетового облучения роговицыкролика с растворами рибофлавина на процессы свободно-радикальногоокисления в супернатантах корнеальных гомогенатовЛюминолзависимаяхемилюминесценциясупернатантовгомогенатовроговиц кроликаБыло установлено, что спонтанная светимость и светосумма ЛЗ ХЛсупернатантов из гомогенатов роговиц в УФ облученной без рибофлавина (группа2) на 75% (р<0,05) и 73% (р<0,05), соответственно, превосходили показателиинтактных животных (Таблица 18). В последующий срок наблюдений (1-4 сут) вэтой группе регистрировалось постепенное снижение указанных величин ХЛ отпиковых значений, хотя они по-прежнему статистически значимо отличались отконтроля.
Так, на 4 сут спонтанная светимость и светосумма отличались от нормына 30% и 43% (р<0,05), соответственно (Рисунок 13). На 7-14 сут такая тенденция121сохранялась, причем в заключительный срок эксперимента исследуемыепоказатели ХЛ были в пределах контрольных величин.Таблица 18 - Показатели люминолзависимой хемилюминесценции супернатантовгомогенатов роговиц кролика после корнеального УФ облучения (усл.ед., M±σ)ИнтактныеУФО безУФО +ДеэпителизацияПоказаСрок(контроль) рибофлавина рибофлавинбез УФОтель наблюдения1 группа2 группа3 группа4 группа0,98±0,12*0,88±0,14*0,81±0,09*0,81±0,11*0,71±0,100,77±0,110,73±0,090,57±0,070,60±0,087 сут0,69±0,100,60±0,090,59±0,1014 сут0,60±0,080,55±0,080,62±0,091ч2,56±0,34*2,35±0,3*1,89±0,281 сут2,34±0,31*2,16±0,28*1,81±0,302,12±0,26*1,82±0,251,62±0,217 сут1,76±0,321,60±0,311,51±0,2714 сут1,71±0,301,59±0,291,55±0,28Спонтаннаясветимость1ч1 сутСветосумма4 сут0,56±0,054 сут* р<0,05;▲1,48±0,2р<0,01 – достоверность различий показателя при сравнении с интактнымконтролем.В группе 3 после процедуры рибофлавин-УФ сшивания роговицвеличина спонтанной светимости и светосуммы ЛЗ ХЛ надосадочнойжидкости гомогенатов роговичных дисков также возросла, превосходязначенияинтактныхсоответственно.животныхОднаконаполученные57%(р<0,05)результаты,ипо59%(р<0,05),сравнениюспоказателями группы 2, облученной без рибофлавина, были незначительнониже и не имели между собой статистически значимых отличий.
Через 1 сутпослерибофлавин-УФвоздействиянаблюдалосьснижениеЛЗХЛ122относительно исходных данных, которое продолжалось и в дальнейшем. На4-е сут величина спонтанной светимости была на уровне интактныхживотных, а значения светосуммы свечения превышали данные контролятолько на 23%. На 7-14 сут показатели ХЛ были на уровне интактныхживотных.%240Спонтанная светимостьСветосумма220200180160140*********120100806040200ттттеттттттттчччсу 4 су 7 су 4 сусу 4 су 7 су 4 сусу 4 су 7 су 4 су л 1ны О 1f1f1т11к11ffffфллл-O Offf1ОООлтаОУФфффpi-O-OбоOfiiiфоооУФУФУФ УФEиipppИнорEEEбибибибEpО++р О+р О+р +риФООУУФУФУФ УФРисунок 13 - Показатели люминолзависимой хемилюминесценции супернатантовгомогенатов роговиц кролика после корнеального УФ облучения (% к контролю).* р<0,05 – достоверность различий показателя при сравнении с интактным контролем.Деэпителизация роговицы (группа 4) вызывала незначительное усилениепараметров спонтанной светимости (на 44%, р<0,05) и светосуммы (на 27%) ЛЗХЛ супернатантов гомогенатов роговиц.
По мере восстановления эпителия (1-4сут) и позднее на 7-14 сут, значения ХЛ возвращались к норме. В отмеченныесроки наблюдения (1-14 сут) в группе 4 достоверных отличий с контролем неустановлено.123Такимобразом,воздействиенароговицуглазакроликаультрафиолетового излучения (370 нм, 3мВт/см 2, 30 мин) приводило к ростуосновных параметров люминолзависимой хемилюминесценции супернатантовиз роговичных гомогенатов – спонтанной светимости и светосуммы. Значимоеувеличение светосуммы свечения свидетельствует об интенсивной продукцииактивных форм кислорода в роговице в процессе УФ воздействия на нее. УФоблучение роговицы в присутствии рибофлавина вызывает менее существенноеповышениезначенийофтальмологическихЛЗХЛ,прирастворовФСэтом,использование(рибофлавинразличныхизоосмотический,Декстралинк, Риболинк и Хитолинк) не имело значимых различий междусобой.
В сроки наблюдения 1-14 сут наблюдали тенденцию к постепенномувосстановлению исследуемых показателей.Железоиндуцированная хемилюминесценция супернатантов гомогенатовроговиц кроликаОценка результатов железоиндуцированной хемилюминесценции (ЖИХЛ) гомогенатов роговиц кролика после воздействия ультрафиолета нароговицу in vivo показала следующее. В группах, где проводилось УФоблучение с использованием офтальмологических растворов рибофлавина(изоосмотический раствор, Декстралинк, Риболинк и Хитолинк) также необнаруженозначимыхразличийисследуемыхпоказателейЖИХЛ.Соответственно, сравнительная оценка УФ воздействия на процессы СРО втканях роговицы включала группы животных, облученных в присутствиирибофлавина (Риболинк) и без него, кроме этого – группу кроликов сдеэпителизацией роговицы.Спонтанная светимость, характеризующая состояние ПОЛ в покое, втечение всего срока наблюдений после УФ обработки роговицы (группа 2)была достоверно выше контрольных значений (Таблица 19).
Непосредственнопосле облучения этот показатель значимо превосходил данные контроля на79% (р<0,05) и в последующем до 4-х сут после УФ воздействия этопревышение было двукратным (р<0,05), на 7-14 сут наблюдали его постепенное124снижение (Рисунок 14). Параметры спонтанной светимости при рибофлавинУФ облучении в отмеченные сроки имели сходную тенденцию к увеличению –на 42% через 1 ч и на 106% (р<0,05) через 4 сут, достигая при этоммаксимальных значений, от уровня интактных животных.Таблица 19 - Показатели железоиндуцированной хемилюминесценциисупернатантов гомогенатов роговиц кролика после корнеального УФ облучения(усл.ед., M±σ)ИнтактныеУФО безУФО +ДеэпителизацияПоказаСрок(контроль) рибофлавина рибофлавинбез УФОтель наблюдения2 группа3 группа4 группа0,88±0,07*0,7±0,090,60±0,080,98±0,12*0,8±0,110,64±0,100,99±0,08*1,01±0,09*0,45±0,067 сут0,80±0,100,92±0,100,51±0,0814 сут0,71±0,110,90±0,130,55±0,081ч0,96±0,140,76±0,090,80±0,111 сут0,99±0,160,81±0,120,66±0,091,05±0,11*1,1±0,09*0,54±0,087 сут0,82±0,120,90±0,130,61±0,1014 сут0,71±0,100,77±0,110,51±0,091ч4,9±0,65*4,51±0,38*3,64±0,41 сут4,2±0,47*3,89±0,443,31±0,523,60±0,413,85±0,313,22±0,517 сут3,54±0,613,26±0,593,30±0,6514 сут3,09±0,542,97±0,402,96±0,61СветосуммаАмплитудамедленнойвспышкиСпонтаннаясветимость1ч1 группа1 сут4 сут4 сут4 сут0,49±0,050,59±0,072,89±0,31* р<0,05– достоверность различий показателя при сравнении с интактным контролем.125В последующем до 14 сут наблюдений регистрировали уменьшение данногопараметра ХЛ.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
