Диссертация (1174186), страница 21
Текст из файла (страница 21)
Влияние офтальмологических растворов для УФ сшивания наультрафиолетовуюабсорбциюсистемы«роговица–рибофлавин–прекорнеальная пленка»На светопропускающую способность роговицы при ее УФ облученииможет влиять также и пленка фотосенсибилизатора, образуемая на корнеальнойповерхностипослеинстилляцийрастворарибофлавина.Устойчивостьпрекорнеальной пленки определяется физико-химическими свойствами раствора(вязкостью) и частотой инстилляций. Очевидно, что пленка, образующаяся наповерхности роговицы, может выступать в качестве дополнительного барьерадля УФ излучения. Это обстоятельство следует учитывать при выполнениипроцедуры ультрафиолетового сшивания роговицы.112Величину УФ абсорбции при корнеальном облучении, насыщеннойрастворами рибофлавина, оценивали по разнице мощности входящего ивыходящегочерезроговицуУФсветовогопотока,регистрируемогофотоприемным элементом УФ-радиометра. Показатели поглощения при УФвоздействии на систему «роговица – рибофлавин – прекорнеальная пленка» (РР-П) сравнивали с результатами облучения системы «роговица – рибофлавин»(Р-Р).Наблюдения проведены на 80 свиных роговицах ex vivo в 4-х группах: в1-ой производили инстилляции изоосмотичного 0,1% рибофлавина (контроль),во 2-ой – Декстралинк (группа сравнения), в 3-й и 4-ой – Риболинк и Хитолинк,соответственно.
Регистрацию показаний с УФ-радиометра выполняли через 1,5-30 мин, с дискретным интервалом 5 мин. Деэпителизацию осуществляли навсей поверхности свиной роговицы, при этом ее средняя толщина составила1,11±0,09 мм.ПредварительнопроизводилиизмеренияУФабсорбциисистемы«роговица – рибофлавин – прекорнеальная пленка» (Р-Р-П) с учетом частотыкорнеальных инстилляций растворов из расчета 1 или 2 капли в мин.
Прииспользовании растворов полимеров с рибофлавином существенного различия винтервалах закапываний, влияющих на интенсивность УФ потока, не выявлено.Соответственно, периодичность инстилляций для этих средств составила 1 капляв 2 мин. Тогда как, для поддержания прекорнеальной пленки при использованииизоосмотического раствора рибофлавина потребовались закапывания с частотой1 капля в мин.Средняя выходная мощность излучения после абсорбции в слояхинтактной роговицей составила 0,78±0,16 мВт/см 2. С 1-ой минуты инстилляцийизоосмотичный рибофлавин активно проникал в ткани деэпителизированнойроговицы, при этом образуемая прекорнеальная пленка снижала интенсивностьУФ света на 65% в сравнении с интактным контролем, тогда как в группе Р-Р –толькона39,1%(Таблица15).Через5миннасыщенияснижение113светопропускающей способности роговицы (на 80,5%) обеспечивалось за счетсистемыР-Р-П,втовремякакабсорбцияроговицей,пропитаннойфотосенсибилизатором (Р-Р), составляла только 74,4%.Таблица 15 - Остаточная мощность УФ-излучения после абсорбции системами«роговица – рибофлавин» (Р-Р) и «роговица – рибофлавин – прекорнеальнаяпленка» (Р-Р-П) при использовании офтальмологических растворов для сшиванияроговицы ex vivo (мВт/см2, M±σ)ИсходноеУФ излучениеИзоосмотический(контроль)группа 1Растворы с 0,1% рибофлавиномДекстралинкРиболинкХитолинкгруппа 2группа 3группа 41,16±0,051,08±0,033,0±0,05(мВт/см2)Толщинароговицы(мм)1,09±0,03Время насыщения роговицы(мин)Р-РРоговица без 0,82±0,09насыщения1 0,50±0,0650,21±0,031,14±0,04Р-Р-ПР-РР-Р-П0,82±0,09 0,70±0,08 0,70±0,08Р-Р0,88±0,1Р-Р-П0,88±0,1Р-РР-Р-П0,73±0,09 0,73±0,090,14±0,04 0,54±0,090,29±0,050,51±0,090,23±0,050,50±0,09 0,25±0,060,16±0,030,38±0,05 0,06±0,01* 0,12±0,05 ▲ 0,05±0,01*0,22±0,04 0,14±0,02▲10 0,10±0,02 0,04±0,008 0,27±0,05* 0,03±0,006 0,02±0,006*■00,10±0,008▲ 0,02±0,00515 0,09±0,01 0,03±0,009 0,26±0,05* 0,025±0,006 0,01±0,003*■00,08±0,009▲ 0,01±0,00420 0,06±0,008 0,02±0,005 0,22±0,04* 0,02±0,005 0,01±0,002*■00,05±0,006▲025 0,04±0,006 0,01±0,003 0,21±0,04* 0,01±0,003 0,01±0,002 *■00,03±0,004▲030 0,03±0,005 0,007±0,001 0,18±0,03* 0,01±0,002 0,007±0,001*00,01±0,002▲0* р<0,05– достоверность различий показателя при сравнении с контролем.▲р<0,05; ■ р<0,01 – достоверность различий при сравнении с показателями группа 2.Из таблицы видно, что закапывания препаратов Декстралинк, Риболинк иХитолинк оказывали более выраженное протекторное действие по отношению к114ультрафиолету за счет устойчивой рибофлавиновой пленки, обусловленнойвязкостью полимеров.С 1-ой по 5-ую мин эксперимента по мере пропитывания роговицырибофлавином (Р-Р) в т.ч.
в присутствии окулярной пленки (Р-Р-П)регистрировалось нарастающее снижение ультрафиолетового излучения. На 5ой мин система Р-Р с Декстралинком удерживала 45,7% УФ излучения, сРиболинком – 86,4%, с Хитолинком – 70%, относительно интактного контроля,тогда как система Р-Р-П – 91,1%, 94,3% и 81%, соответственно (Рисунок 11).Рисунок 11 - Остаточная мощность УФ излучения после абсорбции системами«роговица – рибофлавин» (Р-Р) и «роговица – рибофлавин – прекорнеальная пленка»(Р-Р-П) при использовании офтальмологических растворов для сшивания свинойроговицы ex vivo (% от исходной мощности УФО 3 мВт/см2).* р<0,05 – достоверность различий показателя при сравнении с контролем.▲р<0,05;■Декстралинк.р<0,01 – достоверность различий при сравнении с показателями группы115В последующий срок наблюдения (10-20 мин) регистрировали устойчивыйдостоверный рост УФ абсорбции роговицей с прекорнеальной пленкойфотосенсибилизатора.
Через 30 мин за счет системы Р-Р с использованиемизоосмотического рибофлавина обеспечивалось поглощение 96,3% УФ энергии,с препаратами Декстралинк, Риболинк и Хитолинк – 74,2%, 99% и 98,6%,соответственно. Система Р-Р-П обеспечивала абсорбцию 99% ультрафиолета сизоосмотическим рибофлавином и 98,5% с Декстралинком; при использованиипрепаратов Риболинк и Хитолинк проникновение УФ излучения прекращалосьполностью.Таким образом, слой рибофлавина, образуемый на поверхности роговицы,создает систему «роговица – рибофлавин – прекорнеальная пленка».
Последняяужеспервойминутыфотосенсибилизатораинстилляцийспособнавзависимостидополнительноотпоглощатьсоставаот25%(изоосмотический рибофлавин) до 53% (Декстралинк) энергии УФ излучения.Изоосмотичныйрастворрибофлавинаоказывалультрафиолетовуюпротекцию за счет физиологической диффузии действующего вещества встрому,создаваяприфотосенсибилизатора,этомнесмотрянеустойчивыйнадвукратноповерхностныйпревышающуюслойчастотуинстилляций по сравнению с препаратами в составе с полимерами.Риболинк и Хитолинк, кроме хорошей проникающей способностирибофлавина в роговицу, обеспечивали стабильность образуемой пленки ФС.Декстралинк,истончаяроговицуивменьшейстепенинасыщаяеерибофлавином, свой защитный эффект от УФ облучения реализовывалпреимущественно за счет прекорнеальной рибофлавиновой пленки.116ГЛАВА 4.ВЛИЯНИЕ УЛЬТРАФИОЛЕТОВОГО СШИВАНИЯ РОГОВИЦЫС ОФТАЛЬМОЛОГИЧЕСКИМИ РАСТВОРАМИ РИБОФЛАВИНАНА ПРОЦЕССЫ СВОБОДНО-РАДИКАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯВ ТКАНЯХ ГЛАЗА, МОРФОЛОГИЧЕСКОЕ И УЛЬТРАСТРУКТУРНОЕСОСТОЯНИЕ РОГОВИЦЫ4.1.
Влияние ультрафиолетового облучения роговицы с растворамирибофлавина на процессы свободно-радикального окисления во влагепередней камеры глаза кроликаОдним из методов, описывающих состояние процессов свободнорадикального окисления (СРО) в тканях глаза, в частности при УФ облучении,являетсяиндуцированнаяособенностиизмененийхемилюминесценции(ЛЗхемилюминесценциядинамикиХЛ)Исследование проводилось послевлаги(ХЛ).показателейпереднейНамиопределенылюминолзависимойкамерыглазакролика.деэпителизации роговицы, ее насыщениярастворами рибофлавина и последующего УФ облучения (3 мВт/см 2, 30 мин).Измерения ХЛ образцов переднекамерной влаги выполняли через 1 ч, 1, 4, 7 и14 сут после УФ воздействия, УФ облучения с рибофлавином и в группеживотных с удаленным эпителием роговицы.Воспроизведенная модель УФ сшивания роговицы кролика в 4-х группахсиспользованиемофтальмологическихрастворов0,1%рибофлавина:изоосмотического, препаратов Декстралинк, Риболинк и Хитолинк не выявилакаких-либо статистически значимых межгрупповых различий показателейхемилюминесценции ВПК животных в установленные сроки наблюдения.Поскольку, усиление процессов СРО в переднекамерной влаге при УФвоздействии на роговицу in vivo в исследуемых группах было однотипным(Таблица 16), последующие эксперименты проводили при УФ сшивании спрепаратом Риболинк.117Таблица 16 - Люминолзависимая хемилюминесценция влаги передней камеры глазакролика после УФ облучения роговицы с офтальмологическими растворамирибофлавина (изоосмотический, Декстралинк, Риболинк, Хитолинк)(усл.ед., M±σ)Срокнаблюденияпосле УФОУФ облучение с растворами с 0,1% рибофлавина(изоосмотический, Декстралинк, Риболинк, Хитолинк)Спонтанная светимостьСветосумма1ч0,58±0,080,49±0,071 сут0,76±0,090,81±0,104 сут0,73±0,090,75±0,127 сут0,54±0,100,62±0,1114 сут0,28±0,090,34±0,0916 животных (32 глаза) разделили на 4 группы (по 4 кролика в каждой): 1– интактные, 2 – УФО без рибофлавина, 3 – УФО с рибофлавином, 4 –деэпителизация без УФ облучения и насыщения.Анализ показателей ЛЗ ХЛ влаги передней камеры глаза выявилследующее.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
