Диссертация (1173295), страница 8
Текст из файла (страница 8)
Контрольная группасостояла из 18 мужчин и 32 женщин с нейромышечными синдромаминепаранеопластической природы в возрасте от 35 до 82 лет (средний возраст –56,3 лет).Распределение пациентов с непаранеопластическими нейромышечнымисиндромам в контрольной группе (n=50) было следующим: 28 пациентов схронической сенсорной полиневропатией диабетического генеза, 12 пациентов с44различными формами миастении гравис и 10 пациентов с идиопатическимдерматомиозитом (рисунок 2).Рисунок 2 - Распределение пациентов по типам непаранеопластическихнейромышечных синдромов (контрольная группа)Клинический диагноз нейромышечного поражения устанавливался поклинико-анамнестическимданнымприпервичномосмотреневрологом.Интенсивность нейропатической боли оценивалась по визуально-аналоговойшкале(ВАШ).Всемпациентампроводилоськомплексноелабораторно-инструментальное исследование, включающее общий анализ крови, общий анализмочи, биохимический анализ крови, включая коагулограмму и электрофорезбелков сыворотки крови, иммунологические анализы, включая иммунограмму иопределениеонкомаркероввсывороткекрови,электронейромиографию,ультразвуковые исследования, магнитно-резонансную томографию, спиральную45компьютерную томографию.
Гистологическое исследование препаратов, включаяиммуногистохимическое типирование.Лабораторные методы исследования:Для определения общего анализа крови использовали венозную кровь,набранную в пробирки BD Vakutainerc К2-этилен-диамин-тетраацетатом.Измерение проводили через 1 час после забора крови, до момента исследованияпробирка с кровью хранилась при комнатной температуре.
Пробы исследовали наавтоматическом анализаторе UniCel DxH 800 Coulter (США) с технологиейпроточной цитометрии, позволяющей исследовать клетки крови в состоянииблизком к нативному. Дополнительно оценивали морфологию клеток крови вмазке, окрашенном по методу Романовского-Гимзы под масляной иммерсией намикроскопе Leica DM 1000 окуляр 10х, объектов 100х.
Скорость оседанияэритроцитов (СОЭ) исследовали на автоматическом анализаторе TEST 1 (Alifax,Италия). Валидацию результатов показателей общего анализа крови осуществлялврач клинической лабораторной диагностики. Внешний контроль качествапроходили по программе RIQAS (Ирландия) и ФСВОК (Россия).Определение гликозилированного гемоглобина проводили в венозной крови,набранной в пробирки BD Vakutainerc К2этилен-диамин-тетраацетатом.Измерение проводили в день взятия материала, хранение крови осуществляли прикомнатной температуре.
Определение проводилось методом высокоэффективнойжидкостной хроматографии на автоматическом анализаторе ADAMS НА - 8180V(ARKRAY, Япония). Валидацию результата осуществлял врач клиническойлабораторнойдиагностики.Внутрилабораторныйконтролькачестваосуществляли в соответствии с Национальным стандартом Российской ФедерацииГОСТР53133.2-2008«Контролькачестваклиническихлабораторныхисследований». Внешний контроль качества проходился по программе RIQAS(Ирландия).Биохимическиерутинныефотоколориметрическимиметодамиисследованиянаавтоматическомвыполнялисьбиохимическоманализаторе AU680 фирмы Becman Coulter (USA) стандартизированными46наборами этой же фирмы.Гемостазиологические исследования проводились коагулометрическимиметодаминакоагулометрестандартизированныминаборамиBSC-XPфирмыодноименнойSiemensфирмы.(Германия)Определениеволчаночных антикоагулянтов (ВА) выполнялся на коагулометре ASL-TOP фирмыInstrumentation Laboratory (USA) наборами этой же фирмы.Электрофорез белков выполнялся на системе Capillaris фирмы Sebia(Франция) наборами этой же фирмы методом капиллярного электрофореза.Уровеньгормоновионкомаркеровиммунохимическом анализатореопределялсяна автоматическомUniCel DxI 800 компании Beckman Coulter(США) методом иммуноферментного анализа (ИФА) на парамагнитныхмикрочастицах и ферментативно усиленной хемилюминесценции в качествеметода детекции.Маркерысистемныхзаболеванийсоединительнойткани(ANCA,ANAScreen, Антитела к нативной ДНК, ANA 14 line) выявлялись наавтоматическом анализаторе для диагностики аутоиммунных заболеванийALEGRIA компании ORGENTEC (Германия).Уровень С-реактивного белка, ревматоидного фактора, иммуноглобулиновопределялся на анализаторе специфических белков IMMAGE 800 компанииBeckman Coulter (США) методом иммуноферментного анализа (ИФА) иликинетической нефелометрии.Циркулирующиеиммунныекомплексы(ЦИКи)определялисьнаспектрофотометре Wallac 1420 Multilabel Counter (Victor-2) компании PerkinElmer(США).
Метод основаннапринципе селективной преципитации комплексаантиген-антитело в 3,6% растворе полиэтиленгликоля-6000 с последующимфотометрическим определением плотностипреципитата при длине волны 450нм.Уровень криоглобулинов определялся быстрым спектрофотометрическимметодом, основанным на измерении при длине волны 492 нми последующем47сравнении оптической плотности 2-х параллельных проб, находящихся в течение1 ч. при +37°С и +4°С.Уровень HE4 определялсяметодом твердофазного, неконкурентногоиммуноферментного анализа, основанного на прямой «сэндвич» технологии, сиспользованием двух типов моноклональных мышиных антител 2Н5 и 3D8 к двумразличным эпитопам C-WFDC домена молекулы HE4.
Измерение проводилосьпри длине волны 620 нм.Инструментальные методы исследования:1. Спиральная компьютерная томография (СКТ) проводилась на64-срезовом томографе Philips Brilliance CT 64 slice и 128-срезовом томографеPhilips Ingenuity.Обработка результатов проводилась на станциях IntelliSpasePortal 6 2013 с приложением CT TAVI Planning.2. Магнитно-резонансная томография (МРТ) проводилась на томографахPhilips Ingenia 1.5 T и Philips Achieva 3.0 T. Обработка результатов проводилась настанциях IntelliSpase Portal 6 2013 с полным комплектом неврологическихприложений для МРТ, NM NeuroQ Amyloid Analysis.3. Биопсия гистологического материала выполнялась с применениемметодаимунногистохимическоготипированиявусловияхлабораториипатоморфологии ГАУ РО ОКДЦ.4.
Ультразвуковое исследование проводилось на аппаратах: IU-22, IE-33 спринадлежностями (Philips), HI Vision Ascendus премиум класса с функциейэластографии в режиме 4D (Hitachi),APLIO-500 и УЗ APLIO-400система цифровая диагностическая УЗc принадлежностями (Toshiba), система УЗдиагностическая EPIQ c принадлежностями, вариант EPIQ – 5 и EPIQ - 7 (Philips),система УЗ Affiniti, вариант Affiniti - 70 с принадлежностями (Philips), аппаратмедицинский УЗД M-Turbo с принадлежностями (Fujifilm SonoSite).5. Цифровая маммография выполнялась на системе MicroDose Sl, модельL50.6.Электронейромиографическоеэлектромиографе Keypoint Focus.исследованиепроводилосьна48Статистическая обработка данных производилась методами описательнойстатистики икорреляционного анализа с использованием программногопакета STATISTICA 8.
Оценка нормальности распределения производилась сиспользованием критериев Колмогорова-Смирнова и Пирсона, корреляцияоценивалась посредством коэффициента линейной корреляции Пирсона, адостоверность различий – при помощи t-критерия Стьюдента, учитываяколичество наблюдений и параметрический характер данных.Список больных, включенных в исследование, представлен в Приложении.49ГЛАВА 3АНАЛИЗ КЛИНИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА3.1 Общая характеристикаАнализ материала основан на оценке клинических, электрофизиологическихи лабораторных показателей пациентов с нейромышечными синдромамипаранеопластической и непаранеопластической природы. Как уже отмечено, вработепроанализированыслучаипациентовсклассическимипаранеопластическими неврологическими синдромами, клиническая картинакоторых соответствует достоверным диагностическим критериям, включающимналичие классического ПНС и выявленной в течение 5 лет после развитияневрологической симптоматики злокачественной опухоли. Данные критерииисключают необходимость выполнения дорогостоящих и труднодоступныхспециальных серологических тестов.
В качестве клинических критериевучитывался характер неврологического синдрома и хронологическая связь сразвитием онкологического процесса.Инструментальные методы представлены стимуляционной и игольчатойэлектронейромиографией, а также различными методиками визуализации, такимикакультразвуковоекомпьютернаяисследование,томографии.магнитно-резонанснаяКлинико-лабораторныеиспиральнаяданныевключалиобщеклинические (общий анализ крови, общий анализ мочи) исследования,расширенныйбиохимическийскрининг(определениеуровняглюкозы,трансаминазы, креатинина, мочевины, билирубина, мочевой кислоты, Д-димера,общегобелка, кальция общего и ионизированного, магния, фосфора,волчаночногоантикоагулянта,коагулограммы,электрофорезабета-2-микроглобулина,белковсывороткииммунологические тесты (определение в сывороткекровивыполнениеимочи),крови циркулирующихиммунных комплексов, иммуноглобулинов, СРБ-2, ревматоидного фактора,50антицитрулиновых антител, антител к нативной ДНК, антинуклеарных антител,антител к фосфолипидам, криоглобулина, тиреотропного гормона, паратгормона,онкомаркеров СА 232, СА 19-9, СА 135, НЕ 4, АФП, РЕА), гликозилированногогемоглобина.По итогам обследования пациентов основной и контрольной группвыявлены определенные клинические закономерности.При анализе лабораторных данных в основной группе определен наборпоказателей, превышающих референсные значения в абсолютном большинствеслучаев,аименноскоростьоседанияэритроцитов,уровеньвысокочувствительного белка острой фазы CРБ-2, растворимых фибринмономерных комплексов и Д-димера в сыворотке крови.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
