Главная » Просмотр файлов » Диссертация

Диссертация (1154700), страница 3

Файл №1154700 Диссертация (Эпигенетические детерминанты миомы матки) 3 страницаДиссертация (1154700) страница 32019-09-14СтудИзба
Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 3)

Праймеры были синтезированы в компании «Евроген». Списокпраймеров, синтезированных для проведения ПЦР:WIF1 -M13F5’- gttttcccagtcacgacGAGTGATGTTTTAGGGGTTT -3’13WIF1 -M13R5’- ggaacagctatgaccatgCCTAAATACCAAAAAACCTAC -3’ESR1α-M13F5’- gttttcccagtcacgacTTTTATTGTATTAGATTTAA -3’ESR1α-M13R5’- ggaacagctatgaccatgCCAAATAATAAAACACCTACTAACC -3’PR-B-M13F5’- gttttcccagtcacgacGGGGAGTTTTTTAAGAGAGTTTTTTAA -3’PgR-B-M13R5’- ggaacagctatgaccatgCATTCTCAATAAAAACTAACTTCACTTATCA -3’Секвенирование проводили в центре коллективного пользования “ГЕНОМ”на базе Института молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН постандартному протоколу с использованием прямых праймеров и набора реактивовABI PRISM® BigDye™ Terminator v.

3.1.Статистическийанализрезультатовсеквенированияпроводилисиспользованием программного обеспечения DNA Sequencing Analysis Softwareверсии 5.1 и ресурса QUMA: quantification tool for methylation analysis [167].Уровень ДНК-метилирования оценивали качественно (наличие/отсутствие).Положение сайтов метилирования на приведенных рисунках отмечали числами,которые соответствуют положению цитозина в паре CpG, считая от началасинтезированного участка ДНК.Положения, выносимые на защиту:1.

Математическое прогнозирование служит эффективным инструментомстратификации пациенток, перенесших миомэктомию в репродуктивном возрасте,по группам риска рецидива миомы матки. Предикторами рецидива(р<0,05)являются: клинические проявления; наличие миомы матки в семейном анамнезе;сахарный диабет; хронический стресс и склонность к неврозам; нереализованноеили позднее деторождение; хронические воспалительные заболевания органовмалого таза; ожирение; выскабливания слизистой полости матки в анамнезе;курение; нарушения в интранодулярном кровотоке при допплерометрии; ДНК-14метилирование гена эстрогенового рецептора ERS1; ДНК-метилирование генапрогестеронового рецептора PRB; ДНК-метилирование гена WNT-ингибирующегофактора-1 (WIF1).2.

Эпигенетическими детерминантами миомы матки следует рассматриватьДНК- метилирование генов ERS1, PRB, WIF1, отсутствующее в ткани интактногомиометрия. Характер ДНК-метилирования зависит от гистологического вариантамиомы матки. Гены ERS1 и PRB характеризуются гипометилированием, болеевыраженным при пролиферативной миоме, что может быть расценено как вариант«пролиферативного покоя». При этом в опухолевой ткани преобладают рецепторыкпрогестерону.ДлягенаWIF1вопухолевойтканихарактерногиперметилирование. Частота аномального ДНК-метилирования гена WIF1возрастает в ряду «простая миома—пролиферативная миома», что позволяетсчитать его значимым маркером и возможным триггером ранних стадийпролиферативных изменений при миоме матки.3.

Миома матки является WNT-зависимой опухолью. Гиперметилированныйген WNT-ингибирующего фактора-1 (WIF1) не способен блокировать WNT-каскад,отвечающий за передачу пролиферативного сигнала. Когда он становитсяактивным, происходит запуск «пролиферативной» ветви этого пути: чем большечисло митозов в опухоли, тем выше ДНК-метилирование гена WIF1.4. Разработанный алгоритм лечебно-диагностических мероприятий уженщинрепродуктивноговозраста,перенесшихмиомэктомию,позволяетперсонализировать тактику ведения пациентки с учетом ее фертильных планов ириска рецидива заболевания, оценить который позволяет математическая модельиндивидуального прогноза с использованием эпигенетических детерминант миомыматки.Степеньдостоверностииапробациярезультатовработы.Длястатистической обработки массива данных использовались статистическиепрограммы Microsoft Excel 2007 (Microsoft Corp., США), Statistica 6.0 (Stat Soft Inc.,США).Для определения достоверности непараметрических количественных данных15использовалсякритерийМанна-Уитни,дляопределениядостоверностиколичественных нормально распределенных данных - критерий Стьюдента.

Методранговой корреляции Спирмана использовали для сравнения количественных ипорядковых показателей.В таблицах приведены следующие сокращения: М – среднее значение, m –среднеквадратичное отклонение, n – объем анализируемой подгруппы, р –вычисленный уровень значимости. За критическое значение уровня значимостипринимали р<0,05.С помощью метода Katz рассчитан относительный риск (ОР) развитияагрессивного течения миомы матки на основании клинико-анамнестическихданных:анамнеза,нарушенийменструальнойфункции,перенесенныхгинекологических и экстрагенитальных заболеваний, УЗИ с допплерометрией,данныхиммуногистохимических,гистологическихиэпигенетическихисследований.Для того, чтобы исследовать корреляцию нескольких независимыхпеременных и одной зависимой, применялся метод бинарной логистическойрегрессии.

При этом преимуществом данного метода является то, что независимыепеременные могут иметь любой вид шкалы (количественные, порядковые,дихотомические). Группе пациенток с пролиферативной миомой присвоенакодировка 1, а с простой миомой матки — 0.Вероятность наступления события (быстрый рост миомы матки) длянекоторого случая (конкретной пациентки) рассчитывается по известной формулегде “z=b1*X1 + b2хХ2+ ...+ bnxXn+ a”, при этомX1 представляет значения независимых переменных,b1 – это результаты бинарной логистической регрессии,а - свободный коэффициент,е - 2,71828182845904 (натуральный логарифм)16С помощью последовательного включения в модель в первую очередьнаиболее существенных факторов, выявленных с помощью однофакторныхметодов (корреляционного анализа, выявления показателей и перебора оставшихсяпеременных — прямая модель построения) нами была выбрана комбинацияпеременных, чтобы построенная модель была достоверной (р<0,05) и компоненты,входящие в нее, были независимыми между собой и также достоверными (р<0,05).В полученной в результате построения уравнения бинарной логистическойрегрессиивклассификационнойтаблиценаблюдаемыепоказателипринадлежности к группе (1=пролиферативная миома, 0=простая миома)противопоставляются предсказанным (р) на основе рассчитанной модели.Принимается принадлежность к группе с негативным прогнозом (пролиферативнаямиома) — при р>0,5, а принадлежность к группе с положительным прогнозом —при р<0,5.Бинарная регрессионная модель, с одной стороны, позволяет нам выделитьнаиболее важные факторы, влияющие на ухудшение тяжести заболевания, а сдругой — позволяет прогнозировать у конкретной пациентки вероятность развитияболее «худшего» или «лучшего» прогноза.ДляанализаиспользовалиопределениемклиническойReceiverOperatingинформативностиCharacteristicчувствительности,клиническихanalysisспецифичности,тестов(ROC-анализ)правдоподобиясидиагностического порога.

При этом за «чувствительность» принята вероятность«положительного результата исследуемого диагностического теста» при наличииболезни, а за «специфичность» принята вероятность отрицательного результататеста при отсутствии болезни.Экспериментысоответствовалиэтическимстандартам биоэтическогокомитета НИИМБиБ СО РАМН, Хельсинкской декларации «Этические принципыпроведения научных медицинских исследований с участием человека», «Правилклинической практики в РФ».Апробация диссертации состоялась на заседании кафедры акушерства игинекологии с курсом перинатологии медицинского факультета Медицинского17института Российского университета дружбы народов 27 июня 2017 года.Основные положения работы доложены и обсуждены на II Всероссийскомсеминаре «Репродуктивный потенциал России: версии и контраверсии. Московскиечтения» (14–16 апреля 2016 г., Москва); IV научно-практической конференции смеждународным участием «РЭМ-2016.

Рак, эндометриоз, миома. Пролапсгениталий» (20–21 октября 2016 г., Нижний Новгород), «17th World Congress onHuman Reproduction» (15–18 марта 2017, Рим, Италия), «25th World Congress onControversies in Obstetrics, Gynecology & Infertility (COGI)» (30 ноября–2 декабря2017, Вена, Австрия), «25th World Congress on Controversies in Obstetrics, Gynecology& Infertility (COGI)» (30 ноября–2 декабря 2017, Вена, Австрия).Участие автора в сборе и обработке материала — более 90%, резюмированиии анализе результатов работы — 90%. Научные выводы, положения диссертацииполучены автором лично.По результатам исследования опубликовано 8 печатных работ, из них 5 — врецензируемых изданиях, рекомендуемых Высшей аттестационной комиссиейРоссийской Федерации.18ГЛАВА 1.

СОВРЕМЕННЫЕ АСПЕКТЫ ЭТИОЛОГИИ И ПАТОГЕНЕЗАМИОМЫ МАТКИ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)Миома матки — моноклональная гормоночувствительная доброкачественнаяопухоль неизвестной этиологии, происходящая из фенотипически измененныхгладкомышечных клеток и соединительнотканной стромы миометрия [224]. Вмировой литературе это заболевание обозначается различными терминами:лейомиофиброма, фиброид, фибролейомиома, фибромиома, миофиброма и миома.Миома матки — самое частое гинекологическое заболевание у женщинрепродуктивного возраста, с частотой, по разным данным, до 25% [40]. По даннымнекоторых авторов, миома встречается у 25% женщин старше 35 лет [75, 84].

Приэтом сложно определить истинную распространенность заболевания в силу того,что лейомиома часто протекает бессимптомно и только у 20% пациентокзаболевание клинически проявляется болью в области малого таза, дисменорреей,меноррагией, анемией, бесплодием, дефектом имплантации эмбриона [40, 147].Большинствотакихмоноклональныхгормонозависимыхматочныхнеоформаций диагностируют у 60% женщин репродуктивного возраста и у 80%женщин в течение жизни [172]. По данным Вихляевой Е.М., миому матки впервыевыявляют в возрасте 32–33 лет [20]. В зависимости от возраста заболеваемостьизменяется следующим образом: 4% в группе от 20 до 30 лет, 11–18% в группе от30 до 40 лет, 33–40% в группе от 40 до 60 лет [116].К 50 годам около 70% представительниц европеоидной расы и более 80%представительниц негроидной расы имеют хотя бы один миоматозный узел, приэтом у 15–30% пациенток наблюдают серьезные клинические проявления [98, 147].По данным других авторов, распространенность миомы матки у женщиневропейского происхождения достигает до 70% и до 80% у женщин африканскогопроисхождения [147].

У представительниц негроидной расы миома развивается вболее молодом возрасте, имеет большие размеры, протекает тяжелее и имеет болеедлительный период роста [129, 143, 239].Существуют различные классификации миомы матки. По локализации19выделяютследующиемежмышечная),видымиомы:подбрюшиннаявнутристеночная(интрамуральная,(субсерозная), подслизистая(субмукозная),педункулярная, интралигаментарная, паразитирующая. В 1997 г.

Характеристики

Тип файла
PDF-файл
Размер
3,28 Mb
Предмет
Высшее учебное заведение

Список файлов диссертации

Свежие статьи
Популярно сейчас
Почему делать на заказ в разы дороже, чем купить готовую учебную работу на СтудИзбе? Наши учебные работы продаются каждый год, тогда как большинство заказов выполняются с нуля. Найдите подходящий учебный материал на СтудИзбе!
Ответы на популярные вопросы
Да! Наши авторы собирают и выкладывают те работы, которые сдаются в Вашем учебном заведении ежегодно и уже проверены преподавателями.
Да! У нас любой человек может выложить любую учебную работу и зарабатывать на её продажах! Но каждый учебный материал публикуется только после тщательной проверки администрацией.
Вернём деньги! А если быть более точными, то автору даётся немного времени на исправление, а если не исправит или выйдет время, то вернём деньги в полном объёме!
Да! На равне с готовыми студенческими работами у нас продаются услуги. Цены на услуги видны сразу, то есть Вам нужно только указать параметры и сразу можно оплачивать.
Отзывы студентов
Ставлю 10/10
Все нравится, очень удобный сайт, помогает в учебе. Кроме этого, можно заработать самому, выставляя готовые учебные материалы на продажу здесь. Рейтинги и отзывы на преподавателей очень помогают сориентироваться в начале нового семестра. Спасибо за такую функцию. Ставлю максимальную оценку.
Лучшая платформа для успешной сдачи сессии
Познакомился со СтудИзбой благодаря своему другу, очень нравится интерфейс, количество доступных файлов, цена, в общем, все прекрасно. Даже сам продаю какие-то свои работы.
Студизба ван лав ❤
Очень офигенный сайт для студентов. Много полезных учебных материалов. Пользуюсь студизбой с октября 2021 года. Серьёзных нареканий нет. Хотелось бы, что бы ввели подписочную модель и сделали материалы дешевле 300 рублей в рамках подписки бесплатными.
Отличный сайт
Лично меня всё устраивает - и покупка, и продажа; и цены, и возможность предпросмотра куска файла, и обилие бесплатных файлов (в подборках по авторам, читай, ВУЗам и факультетам). Есть определённые баги, но всё решаемо, да и администраторы реагируют в течение суток.
Маленький отзыв о большом помощнике!
Студизба спасает в те моменты, когда сроки горят, а работ накопилось достаточно. Довольно удобный сайт с простой навигацией и огромным количеством материалов.
Студ. Изба как крупнейший сборник работ для студентов
Тут дофига бывает всего полезного. Печально, что бывают предметы по которым даже одного бесплатного решения нет, но это скорее вопрос к студентам. В остальном всё здорово.
Спасательный островок
Если уже не успеваешь разобраться или застрял на каком-то задание поможет тебе быстро и недорого решить твою проблему.
Всё и так отлично
Всё очень удобно. Особенно круто, что есть система бонусов и можно выводить остатки денег. Очень много качественных бесплатных файлов.
Отзыв о системе "Студизба"
Отличная платформа для распространения работ, востребованных студентами. Хорошо налаженная и качественная работа сайта, огромная база заданий и аудитория.
Отличный помощник
Отличный сайт с кучей полезных файлов, позволяющий найти много методичек / учебников / отзывов о вузах и преподователях.
Отлично помогает студентам в любой момент для решения трудных и незамедлительных задач
Хотелось бы больше конкретной информации о преподавателях. А так в принципе хороший сайт, всегда им пользуюсь и ни разу не было желания прекратить. Хороший сайт для помощи студентам, удобный и приятный интерфейс. Из недостатков можно выделить только отсутствия небольшого количества файлов.
Спасибо за шикарный сайт
Великолепный сайт на котором студент за не большие деньги может найти помощь с дз, проектами курсовыми, лабораторными, а также узнать отзывы на преподавателей и бесплатно скачать пособия.
Популярные преподаватели
Добавляйте материалы
и зарабатывайте!
Продажи идут автоматически
6310
Авторов
на СтудИзбе
312
Средний доход
с одного платного файла
Обучение Подробнее