Диссертация (1154326), страница 11
Текст из файла (страница 11)
Медико-демографические показатели семей с повторнымневынашиванием беременностиДанный этап исследования включал изучение национального состава,анализ возрастных показателей, изучение репродуктивного анамнеза, анализтиповбраковвсемьяхсрепродуктивнымипотерями.Исследованиенационального состава включало 531 семью, в которых национальность былаизвестна у 520 мужчин и 531 женщины, обратившихся в медико-генетическийкабинет по поводу репродуктивных потерь.Приопределениииспользованыданныемедико-демографическихВсероссийскойпереписихарактеристикнаселенияза2002былигод(Национальный состав и владение языками, гражданство.
Москва, ИИЦ"Статистика России", 2004. Итоги Всероссийской переписи населения 2002 года:14 т. Федер. служба гос. статистики; том 4, книга 1, 946 с.; Национальный составнаселения области и владение языками, гражданство. По данным Всероссийскойпереписи населения 2002 года. Калуга 2005) и Актов гражданского состояния за2000-2010, утвержденные Законом РФ от 15.11.1997г. №143-ФЗ "Об актахгражданского состояния", в которых содержалась информация о 1041641 человеке(включая мужчин и женщин), в том, числе о 104032 женщинах, родивших детейживыми в Калужской области была сформирована группа сравнения (ГС4).Для определения возможного влияния генных факторов на невынашиваниебеременности использовалась методика изучения типов браков. Типы браковклассифицировались согласно данным, опубликованным в работе Наумчик И.В(1993), где выделено шесть типов браков:- кровнородственные браки (между двоюродными и троюродными сибсами);- локальные браки – супруги одной национальности, выходцы из одной или рядомрасположенных (до 10 км) деревень;- внутрирайонные браки – супруги одной национальности, выходцы из несоседних (более 10 км) деревень одного сельского района;- внутриобластные браки – супруги одной национальности, выходцы из разных59районов одной области;- межобластные браки – супруги одной национальности, выходцы из разныхобластей;- межнациональные браки.Проведен анализ распределения по типам брака среди семей с разнымчислом выкидышей при сроке беременности до 12 недель и до 28 недель.Уровень образования семей с невынашиванием беременности былопределен у 1051 человека.
Для сравнения были использованы сведения обуровне образования в Калужской области, полученные по результатам переписи2002 года (ГС4). Суммарно данная выборка составляла 465115 человек, из них188745 женщин и 276370 мужчин. Уровень образования оценивался в возрастномдиапазоне: у женщин от 18 до 40 лет, у мужчин 18-59 лет.2.2. Методы исследованияВ обследовании семей использовался комплекс различных методов:клинический, клинико-генеалогический, цитогенетический, ДНК-диагностики,психологический, математико-статистический. Исследовалось состояние здоровьяродившихся детей в разные возрастные периоды.2.2.1.
Генетические методы исследования2.2.1.1. Клинико-генеалогический анализКлинико-генеалогическийметодявляетсяважнейшимметодомклинической генетики. Именно с него начинается клинико-генетическоеисследование, которое включает изучение патологических признаков у пробанда,его больных и здоровых родственников. Сущность его заключается в составлениии анализе родословных, что позволяет определить наследственный илиненаследственный характер заболевания (признака).
Сбор материала для анализа60проводился в нашем исследовании методом полной регистрации. Используемыеусловныеобозначенияприсоставленииродословныхобщепринятыииспользуются в повседневной медико-генетической практике.При составлении родословной использовались данные, полученные призаполнении генетической карты (приложение 1), в которой отражены: ФИО,возраст, национальность пробанда и его родителей.
В родословной отражаетсяналичие кровнородственных браков между любыми родственниками, выявлениебольных с одинаковыми патологическими признаками, наличие выкидышей,мертворождений, ранней гибели детей, случаи рождения детей с врожденнымипороками развития, геномными и хромосомными мутациями.Выделялись следующие типы наследования: аутосомно-доминантный,аутосомно-рецессивный,Х-сцепленныйдоминантный,Х-сцепленныйрецессивный, митохондриальное, полигенное наследование.Группадляпроведенияклинико-генеалогическогоисследованиясоставила 531 семью ОГ, группа сравнения составила 201 семью из ГС2.2.2.1.2. Цитогенетическое обследованиеЦитогенетическое исследование было произведено в 126 семьях изосновной группы, имевших в анамнезе повторное невынашивание беременности.В дополнение к существующим показаниям по проведению хромосомногоанализа (Бочков Н.П.
и др., 2013), нами было решено включать в обследование исемьи, страдающие невынашиванием беременности, даже при наличии здоровогоребенка. Кариотипирование проводили методом G-окрашивания с помощьюкрасителяГимзы.дифференциальноеПодготовкаокрашиваниепрепаратовметафазныхосуществляласьхромосомобщепринятымиметодом(Caspersson T. et al., 1968). С-варианты хромосом как патологические измененияне учитывали (Карагеоргий Н.М., 1994), принимая во внимание, что они неиграют определяющей роли в нарушениях эмбрионального развития человека.612.2.1.3. ДНК-диагностика, анализ ассоциаций аллелей HLAII класса ифенотипы групп крови в семьях с повторным невынашиванием беременностиОбследованиесупружескихпарсневынашиваниембеременностипроводилось по локусам DRB1, DQA1, DQB1 в лаборатории ДНК диагностикиМГНЦ РАМН (директор Гинтер Е.К., зав.
лабораторией Поляков А.В.).Подробное описание используемых методов типирования обследуемых в нашихисследованиях проводилось методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) (MullisK. et al., 1986). Для анализа выделяли группы аллелей DRB1: 01*, 03*, 04*, 06*,07*, 08*, 09*, 10*, 11*, 12*, 15*, 16*; аллели и группы аллелей в локусе DQA1:0101*/0104*/0105, 0102*/0106, 0103, 0201, 030*, 0401, 050*, 0601*; в локусеDQB1: 020*, 03010*/0309/0310/0313, 03020*/0307/0308/0311, 03030*/0306/0312,0304, 03050*, 040*, 05010*, 05020*/0504, 05030*, 06010*, 0602-18/20.
Исследуемаягруппа состояла из 44 семейных пар с повторным невынашиванием беременности.В качестве группы сравнения использованы данные, приведенные в исследованииБескоровайной Т.С. (2005) о 29 семьях с двумя и более потеряннымибеременностями (ПБ2+) и 50 семьях без репродуктивных потерь – группасравнения (ГС5).Данные о группах крови и Rh-факторе, как среди мужчин, так и средиженщин в семьях, обращавшихся по поводу невынашивания беременности,регистрировались по отметке в паспорте, а при отсутствии сведений в паспорте,обследование проводилось в отделении переливания крови ГБУЗКО «КОКБ» (зав.отделением Ефимов Ю.М.).
Для определения групп крови использовался методпрямой агглютинации эритроцитов с цоликлонами анти-А, анти-В, созданные наоснове полных антител класса IgM, анти-Д и антиД-супер, содержащиминеполныеантителаклассаIgG,используемыедлятипированиярезуспринадлежности эритроцитов в непрямом антиглобулиновом тесте (реакцияКумбса) (Приказ Минздрава РФ от 09.01.1998 №2 "Об утверждении инструкцийпо иммуносерологии"). Заключение о присутствии антигена в исследуемыхэритроцитах делали по наличию положительной реакции агглютинации, в62результате которой устанавливались группы крови по системе АВО и резусфактору. Использовались цоликлоны производства МНПК ―Гематолог‖ (г.Москва).Для анализа фенотипов групп крови и Rh-фактора среди семей с ППБ былаиспользована информация о 575 человек из основной группы, из них 347 женщини 228 мужчин.
Популяционные частоты по Калужской области групп крови и Rhфактора были представлены данными, полученными из индивидуальных картдоноров (уч. ф. № 200) на станции переливания крови Калужской областнойклиническойбольницы.Выборканосиласлучайныйхарактерибылапредставлена информацией о 1892 женщинах и 2236 мужчинах – группасравнения (ГС6).2.3. Метод лимфоцитотерапии в комплексе лечения невынашиваниябеременностиВыборка для проведения лимфоцитотерапии осуществлялась из семей,анамнез которых был отягощен репродуктивными потерями (самопроизвольныйаборт разных сроков и/или неразвивающаяся беременность).
Предварительносемейным парам проводилось цитогенетическое обследование. После того, как всемьеисключались хромосомные аберрации, женщинам рекомендовалинаблюдениеакушера-гинекологадляопределениястепенинарушенияврепродуктивной системе. Так как данное исследование во времени проводилосьболее 20 лет (с 1989 по 2010 г.), то обеспечить выполнение одинаковой скринингпрограммы по обследованию всем семьям не представлялось возможным.
Крометого, часть женщин обращалась за помощью уже при наличии беременности, чтозатрудняло уточнение причин невынашивания и в сложившейся ситуации,возникала необходимость в проведении сохраняющей терапии. Наличие ванамнезе воспалительного процесса трактовалось нами как несостоятельностьиммунитета, который при наступлении беременности приводил к неадекватной63реакции беременной на плод, что в конечном итоге, возможно, обуславливалорепродуктивные потери.Учитывая выше перечисленное, абсолютным противопоказанием попроведению лимфоцитотерапии, являлось наличие хромосомных аберраций средипар, имеющих в анамнезе невынашивание беременности, которые могли привестик рождению ребенка с пороками развития.Следует обратить внимание на показания и противопоказания к назначениюлимфоцитотерапии.
В данном случае необходимо ориентироваться на ПриказМинздрава РФ от 10 февраля 2012 г. N 572н "Об утверждении порядка оказаниямедицинской помощи по профилю «Акушерство и гинекология (за исключениемиспользования вспомогательных репродуктивных технологий)». В то же времяотсутствуют методические рекомендации по назначению ЛИТ и единыепротоколыпроведениялимфоцитотерапиидлялеченияневынашиваниябеременности. Публикаций по данному вопросу также небольшое количество(Ходова С.И., 1995; Сидельникова В.М, 2002; Takeshita T., 2004). Средипредставленных достаточно подробной является статья Takeshita T. (2004), вкоторой были определены показания и противопоказания для проведения ЛИТ,чем мы и руководствовались, внося, одновременно, необходимые обоснованныепредложения по их коррекции.Показания:1.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
